188955. lajstromszámú szabadalom • Eljárás B12 koenzimet termelő fermentlé előállítására
1 188 955 kukoricalekvár 1 0,78 ammónium-hidrogénkarbonát 1 0,78 ammónium-szulfát # 1 0,92 magnézium-klorid 1 0,98 kobalt-klorid 1 0,69 5,6-dimetil-benzimidazol 1 0,80 o-xilidin 1 1,75 nátrium-biszulfit 0 1,0 sörélesztő hidrolizátum 1 0 ipari máj-extraktum 1 0 melasz 1 0 szulfitlúgpor ( 1) 1 0 ammónium-hidroxid 1 0 diammónium-hidrogénfoszfát 1 0 glicin 1 0 borostyánkő sav 1 0 nátrium-tripoli-foszfát (2) 1 0 aceton 1 0 napi hatóanyagtermelés 1 1,3 (1) A szulfitlúgpor a cellulóz gyártás során keletkezik. Ha a cellulózt kálcium-biszulfittal tárják fel, akkor képződik első lépésben a szulfitlúg-oldat, amely nagymennyiségű szerves anyagot tartalmaz. A szulfitlúgport a szulfitlúg-oldat lepárlása során nyerik. Szárazanyag-tartalma 20— 251%, amely lényegében erjeszthető szénhidrát, ezért az erjesztési iparban alkalmazzák például alkohol-, élesztő-, butanol-, aceton fermentációs úton történő előállításánál. A szulfitlúgpor másik felhasználási területe a növényvédőszerek formálásánál van, előnyös felületaktív tulajdonsága folytán. Kereskedelmi forgalomban vásárolható termék. (Vámos Gy.: Papíripari kézikönyv, Műszaki Könyvkiadó, Budapest, 1980, 391—392. o.). (2) A nátrium-tripoli-foszfátot nagymennyiségben a mosószeripar hasznába alapanyagként (Szolnoki Vegyiművek gyártja, az Egyesült Vegyiművek használja fel — többek között). Előállítása elemi foszforból történik, alacsony molekulasúlyú polifoszforsavat közömbösítenek nátrium-hidroxiddal. Kereskedelmi forgalomban vásárolható termék. A találmány eljárás új, anaerob, mezofil, metántermelő, vegyes mikropopulációval végzett B12 koenzimet termelő fermentlé előállítására anaerob, szeptikus körülmények között metanolt, prekurzor(oka)t és részben ismert tápanyag-komponenseket tartalmazó új táptalaj alkalmazása útján, oly módon, hogy' i./ 6—8 napon át az anaerob, mezofil, metántermelő, új vegyes mikropopulációt tartalmazó inokulum fermentlé 5—15 tf%-át elvesszük és helyébe azonos térfogatú __5,0-7,0 tf% metanolt, . 4 0,5—2,0 tf% hőkezelt kukoricalekvár oldatot, vagy 0,7—3,5 tf% hőkezelt kukoricamoslékot, 0,25—0,6 v% ammónium-hidrogén-karbonátot, 0,005—0,05 v% magnézium-kloridot, 0,0005—0,005 v% kobalt-kloridot, 0,0003—0,003 v% 5,6-dimetil-benzimidazolt (30 g/1 koncentrációban metanolban oldva), és 0,002—0,008 v% nátrium-biszulfitot tartalmazó tápközeget adunk és kívánt esetben az elvett fermentlevet feldolgozzuk, ii.) a legalább 0,15—0,2 g metanol/1 fermentllé/óra asszimilációs sebesség elérése után a fermentlé elvételt azonos módon folytatjuk, és helyébe azonos térfogatú 0,05—0,2 v% ammónium-szulfáttal és 0,002—0,006 v% o-xilidinnel kiegészített, egyéb tápanyagok mennyiségében és minőségében azonos tápközeget adunk és a fermentálást 7—10 napig folytatjuk, kívánt esetben az elvett fe'rmentlevet feldolgozzuk, in.) 0,2—0,3 g metanol/1 fermentlé/óra aszszimilációs sebesség elérését, azaz az inokulum fermentlé fenntartó fermentlévé történő átalakulását követően a fermentlé. elvételét és a tápközeg beadagolását a ii.) lépés szerint folytatjuk, kívánt esetben a fermentlé elvételt 4—6 napig szüneteltetjük, majd iv. ) az elvett 5—15 tf% fenntartó fermentléhez az első napon 0,8—1,2 tf% metanolt, 0,05—0,1 tf% kukoricalekvárt, vagy 0,2—0,5 tf% hőkezelt kukoricalekvár hidrolizátumotvagy 0,2—1,0 tf% hőkezelt kukoricamóslék ._ hidrolizátumot, 0,03-0,08 v% ammónium-hidrogén-karbonátot, 0,01—0,05 v% ammónium-szulfátot, 0,00005—0,0002 v% kobalt-kloridot, 0,001—0,004 v% 5,6-dimetil-benzimidazolt és _ 0,001—0,004 v% o-xilidint, kívánt esetben a második napon 0,3—0,6 tf% metanolt, 0,01-0,05 v% kukoricalekvárt vagy 0,02-0,1 v% hőkezelt kukoricalekvár oldatot vagy 0,03—0,2 v% hőkezelt kukoricamoslékot és 0,01—0,05 v% ammónium-hidrogén-karbonátot adunk, majd a kapott szakaszos termelő fermentlevet feldolgozzuk, végül v. ) az iii.) félfolyamatos fenntartó és az iv.) szakaszos termelő lépésekét naponta megismételjük. A találmány értelmében például oly módon járhatunk el, hogy naponta az 1. példa a) pontjában ismertetett inokulum fermentlé 5—15 tf%-át, előnyösen mintegy 10 tf%-át, elvesszük és függetlenül alacsony, de az időben növekvő Bi2 koenzim tartalmától, előnyösen feldolgozzuk. A vissza-2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
