188709. lajstromszámú szabadalom • Eljárás cedfalosporin-metilészterek enzimes dezészterezésére

1

188 709

2

Specifikus g/literig csökkenő koncentracioban adagolunk, aktivitás A táptalajokat beoltjuk a S. capillispira vegetatív

6)

metionin----------------13

7)

fenilalanin

5,2

8)

treonin

18

9)

triptofán

13

10)

valin

7,5

11)

alanin

4,4

12)

aszparaginsav

4,4

13)

cisztein

0

14)

glutaminsav

6,7

15)

glicin

22

16)

hidroxi-prolin

11

17)

prolin

17

18)

szerin

24

19)

tirozin

13

20)

glutamin

4,8

21)

aszparagin

7,1

7. példa

A tenyészethez adagolt aminosavak hatását vizsgáljuk. A 6. példában ismertetett alaptáptalajt ké- 25 sziljük el. Ezt az alaptáptalajt részekre osztjuk, és az alábbi, III. táblázatban megadott koncentrációban L-prolint és L-szerint adunk hozzá. Elosztjuk a táptalajokat, sterilizáljuk, lehűtjük, és a 6. példában megadott módon beoltjuk és tenyésztjük. 30

48 óra múlva mintákat veszünk, és a példákban megadottak szerint meghatározzuk a minták eszteráz-aktivitását.

Az eredményeket a III. táblázatban adjuk meg. ^

tenyészetével és 30 °C hőmérsékleten, állandó razas közben 44 órán át folytatjuk a tenyésztést. Mintákat veszünk a tenyészetekből, meghatározzuk a tenyészetek ml-enkénti száraz'sejtlartalmát, az előző példákban megadottak szerint megmérjük a tenyészetek eszteráz-aktivitását. Ebben az esetben nátrium-azidot nem használunk.

Az alábbi, IV. táblázatban megadjuk az egyes táptalajokban mért sejt szárazsúlyt (mg/ml), a specifikus aktivitást és a teljes aktivitást mól • 10~T észter hidrolizálva/liter tenyészet • percben.

IV. táblázat

Ammónium-ion

koncentráció

Sejt

szárazsúly

(mg/ml)

Specifikus

aktivitás

Teljes

aktivitás

0,05

0,56

9,3

5,2

0,1

1,04

9,0

9,4

0,2

1,18

7,0

8,3

0,3

1,48

6,8

10,0.

0,4

1,62

4,3

7,0

0,5

2,16

2,4

5,2

0,6

2,24

1,9

4,2

A fenti kísérlet eredményei világosan jelzik, hogy megfelelő mennyiségű nitrogénforrási kell adnunk a táptalajhoz; de a fölös mennyiség nem előnyös.

III. táblázat

Aminosav

Koncentráció

Specifikus

aktivitás

L-prolin

2 g/Iiter

9,7

4 g/liter

6,3

6 g/liter

3,1

8 g/liter

1,7

10 g/liter

1,5

L-szerin

2 g/liter

14

4 g/liter

0

6 g/liter

5,7

8 g/liter

3,2

10 g/liter

3,1

8. példa

9. példa

Kísérleteket végzünk a nyomokban jelenlévő fém-ionok hatásának vizsgálatára az A49492 jelű mikroorganizmus növekedésére és az enzim termelésére. A kísérlet során két alaptáptalajt használtunk. Ezek összetétele a következő;

1

11

L-szerin

3,0 g

3,0 g

magnézium-szulfát • 7 H20

0,5

0,5

dikálium-hidrogén-foszfát

2

2

kalcium-karbonát

1

1

glükóz

10

10

Czapek oldata

2 ml

—

viz. mindkét esetben 1000

ml-re kiegészítve

Különböző mennyiségű ammónium-ionok hatá- 60 sát vizsgáljuk. A 6. példában megadott összetételű alaptáptalajt készítjük el. 250 ml térfogatú lombikokba 50-50 ml táptalajt mérünk és sterilizáljuk. Ammónium-klorid törzsoldatot állítunk elő, az oldatot szűrővel sterilizáljuk és 0,6 g/liter-től 0,05 55

A táptalajok pH-ját foszforsavval 7,0-ra állítjuk be, sterilizáljuk, majd sterilizálást követően glükózt adunk hozzá.

Ezután elkészítjük az V. táblázatban megadottak szerint a megfelelő mennyiségű fémsót tartalmazó táptalajokat. A sók koncentrációját mg/literben

11