188565. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás új peptidek előállítására és ezek alkalmazási módja
49 188 565 50 7. AZ FR—900156 JELZÉSŰ VEGYÜLET AKUT TOXICITÁSA EGÉREN 1 g/kg (i. v. = intravénás adagolásban): nemtoxikus. 8. AZ FR—900156 JELZÉSŰ VEGYÜLET SEJTT OXICIT ÁS A (egér L-sejten) 500 ngjmh nincs toxikus hatás. A gyógyászati készítmény lehet valamely gyógyszerforma, például szilárd, félszilárd vagy folyadékforma, amelyben a találmány szerinti hatóanyag valamely olyan szerves vagy szervetlen vivőanyaggal vagy töltőanyaggal keverve van jelen, amely alkalmas külső, enterális (a gyomor- és bélrendszeren keresztül való), vagy parenterális (a gyomor- és bélrendszer megkerülésével történő) adagolásra. A tabletták, pasztillák, kapszulák, kúpok, oldatok, emulziók, szuszpenziók és a többi, használatos gyógyszerforma elkészítéséhez a hatóanyagot kombinálhatjuk például a szokásos, nem-toxikus, gyógyászatilag elfogadható vivó'anyagokkal. Ilyen vivőanyagok például a víz, glükóz, laktóz, akáciagumi, zselatin, mannit, keményítőpaszta, magnéziumtriszilikát, talkum, kukorica-keményítő, keratin, kolloid, szilícium-dioxid, burgonya-keményítő, karbamid vagy más vivőanyagok, amelyeket a készítmények előállítására használhatunk, szilárd, félszilárd vagy folyadék formában, ezenkívül használhatunk segédanyagokat, stabilizálóanyagokat, sűrítőanyagokat, színezőanyagokat és aromaanyagokat. A gyógyászati készítmények tartalmazhatnak konzerváló- vagy bakteriosztatikus (a baktériumok szaporodását gátló) szereket, hogy ezáltal a készítményben jelenlévő hatóanyag hatékonysága állandó legyen. A gyógyászati készítményben a találmány szerinti hatóanyag olyan mennyisége van jelen, amely elegendő ahhoz, hogy a kezelni kívánt betegség folyamatára vagy állapotára a kívánt gyógyhatást kifejtse. Ha embereken alkalmazzuk ezt a készítményt, akkor előnyösen intravénás, intramuszkuláris vagy orális adagolási módot alkalmazunk. Habár a találmány szerinti hatóanyagok gyógyászatilag hatékony mennyisége a kezelni kívánt beteg korától és állapotától is függ, a betegségek leküzdésére általában a kezelni kívánt ember vagy állat minden egyes testsúlykilogrammjára körülbelül 2—100 mg hatóanyagot alkalmazunk, és általában egyszerű dózisként átlagosan körülbelül 50 mg-ot, 100 ing-ot, 250 mg-ot vagy 500 mg-ot adunk be. A találmány szerinti eljárást a továbbiakban, a találmány oltalmi körének szűkítése nélkül, példákkal szemléltetjük. Az alábbi példákban a kiindulási vegyületek és a célvegyületek leírása során az alábbi rövidítéseket használjuk: Lac: laktil-csoport Alá : alanil-csoport Glu : glutamil-csoport Gly : glicil-csoport DAP: a, e-diamino-pimelil-csoport 26 Z: benziloxi-karbon il-csoport Bac: terc-butoxi-karbonil-csoport Bd: benzil-csoport Me: metil-csoport Et: etil-csoport Sa: N-hidroxi-szukcin imid-csoport Bzb: benzhidril-csoport Ac: acetil-csoport Val: valil-csoport Ser: szeril-csoport Phe: fenilalanil-csoport Asp: aszpartil-csoport I ys: lizil-csoport I eu: leucil-csoport Sar: szarkozil-csoport y -Abu : y-amino-butiril-csoport Aad: 2-amino-adipil-csoport Tyr: tirozil-csoport Tfa: trifluor-acetil-csoport. 1. példa 1. lépés: 1/1 reakcióegyenlet 662 mg L-Ala-y-D-Glu-(a-OH)-(L-Boc-D-mezo- DAP-D-NHNHBoc-L)-Gly-OH-t (1) feloldunk 8 ml 50%-os, vizes acetonban, és az oldathoz hozzáadunk 168 mg nátrium-hidrogén-karbonátot. Az elegyhez 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk 408 mg propionil-kloridot, és ugyanezen a hőmérsékleten további 1 órán át keverjük, miközben pH-ját nátrium-hídrogén-karbonát segítségével 7—8 között tartjuk. Utána az elegy pH-ját 3,0-ra állítjuk, 1 n sósavval, majd csökkentett nyomáson körülbelül 2 ml térfogatra betöményítjük. A sűrítményhez hozzáadunk 150 ml etil-acetátot, 10 ml metanolt és 30 ml nátrium-klorid-oldatot. A szerves fázist elválasztjuk, vízmentes nátrium-szulfáton megszárítjuk, majd az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradékot dietil-éterrel kezelve fehér színű, por-szerű anyag formájában 400 mg propionil-L-Ala-y-D-Glu-(oí-OH)-(L-Boc-D-mezo- DAP-D-NlINHBoc-L)-GlyOH-t (2) nyerünk. IR-spektrum (nujol): 3250, 1720 (váll), 1650cm-1 NMR-spektrum (deutero-kloroform, ö ppm): 1,0 2,5 (36H, m), 3,97 (2H, s), 3,90 4,60 (4H, m). 2. lépés: 1/2 reakcióegyenlet 350 mg propionil-L-Ala-y-D-Glu-(a-OH)-(L-Boc-D-mezoDAP-D-NHNHBoc-L)-GlyOH (2)hoz 1,8 ml trifluor-ecetsavat adunk, és az elegyet negyedórán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Utána az illékony részt csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, és a maradékként nyert olajat dietiléterrel eldörzsöljük. Az ily módon nyert fehér színű, szilárd anyagot 10 ml vízben feloldjuk, és a vizes oldathoz hozzáadunk 12,2 ml 0,1 n kénsavat, majd 260 mg nátrium-perjodát 4 ml vízzel készült oldatát, miközben az elegyet jeges fürdőben keverjük. A keverést további 2 órán át folytatjuk, majd az elegyhez nátrium-hidrogén-szulfitot adunk, míg a jód színe el nem tűnik. Az elegyet körülbelül 3 ml térfogatra betöményítjük, és a sűrítmény pH-ját 1 n sósavval, 2,5-re állítjuk, majd 50 ml HP20 jelzésű, makropórusos, nem-ionos adszorpciós gyantán (a Mitsubishi Chemical Industries Co. Ltd. védjegyzett terméke) kromatografáljuk. Eluensként 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
