188565. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás új peptidek előállítására és ezek alkalmazási módja
37. ) 37.s lépés Ebben a lépésben III—18 általános képletű vegyületeket állítunk elő oly módon, hogy a III—17 általános képletű vegyületeket valamely alkohol jelenlétében valamely oxidálószerrel reagálta tjük. Ebben a lépésben ugyanazokat az oxidálószereket használhatjuk, mint a IV—3 lépésben. Ebben a lépésben alkoholként valamely szokásos alkoholt, mint például metanolt, etanolt, propanolt, butanolt, benzilalkoholt vagy más hasonló alkoholt használunk. A reakciót lényegében ugyanúgy végezzük, mint a 4—3 lépést. 38. 38.8 lépés , Ebben a lépésben III—20 általános képletű vegyületeket állítunk elő oly módon, hogy a III—19 általános képletű vegyületek aminocsoportját védjük. Az amin-védőcsoport bevitelére ugyanazokat a reagenseket használhatjuk, mint a 6.s lépésben. Á reakciót lényegében ugyanúgy végezzük, mint a 8.8 lépést. ^ A fenti reakciólépésekben leírt módon előállított I általános képletű célvegyületekkel, és a II általános képletű és a III általános képletű kiindulási anyagokkal kapcsolatban meg kell jegyeznünk, hogy mindezen vegyületeknek lehet egy vagy több sztereoizomerje, mivel molekulájukban aszimmetrikus szénatom van, és a találmány oltalmi körébe valamennyi ilyen izomer beletartozik. Azt találtuk, hogy a találmány szerinti I általános képletű új peptidek és ezek gyógyászatilag elfogadható savai a következő biológiai hatásokkal rendelkeznek: fokozzák az immunválaszt, vagyis fokozzák a celluláris immunitást (sejt-immunitást) és a humorális antitest-termelést (a testnedvekben végbemenő antitest-termelést), és megnövelik a retikulo endotél-rendszer aktivitását; növelik a mitogén aktivitást, az interferon-indukciót; védelmet nyújtanak kísérletes fertőzésekkel szemben, és rák-ellenes hatást mutatnak. Ennek megfelelően a találmány szerinti I általános képletű peptideket és ezek gyógyászatilag elfogadható sóit patogén mikroorganizmusok, különösen gram-negatív baktériumok, gram-pozitív baktériumok és gombák által okozott fertőző betegségek, valamint rák gyógyítására használhatjuk, embereken és állatokon. Ezenkívül a II és III általános képletű vegyületeket a fentiekben említett biológiai hatásokat mutató I általános képletű vegyületek előállítása során köztitermékekként használhatjuk. Az I általános képletű peptidek gyógyászati hasznosságát az alábbiakban ismertetett farmakológiái kísérleti eredményekkel szemléltetjük. 25 14 ' 1. SZÉN-CLEARANCE A VÉRÁRAMBAN Reagensek 1. Szén-szuszpenzió. Rotring rajzolótust (170 mg szén/ml) 1% zselatint tartalmazó fiziológiás sóoldattal eredeti koncentrációjának 1/5-ére hígítjuk. 2. 0,1%-os, vizes nátrium-karbonát-oldat. Módszer DDY törzsbeli hím 5—6 hetes egerek farokvénájába testsúlygrammonként 0,01 ml szén-szuszpenziót injektálunk. A vérmintákat egy 50 mikroliterre kalibrált, és heparinban kimosott, hegyes kapilláris pipettával vesszük. Ezzel a pipettával a szemzugon át a retroorbitális (szemüreg mögötti) vénusz szinuszba nyúlunk be. A mintákat a szénszuszpenzió beadását követően 3 és 6 perc elteltével vesszük. A vérmintákat azonnal belefecskendezzük 3,0 ml nátrium-karbonát-oldatba. Ez a vért hemolizálja, és így meg lehet határozni a szén menynyiségét. Ezután leolvassuk a minták fényelnyelését egy spektrofotométeren, 660 nanométer hullámhossznál, a mért fényelnyeléshez tartozó koncentráció logaritmusát egy előzőleg meghatározott összehasonlító görbéről olvassuk le. A K clearanceértékét úgy kapjuk meg, hogy a szén koncentrációjának logaritmusát az idő függvényében az alábbi képletnek megfelelően grafikusan ábrázoljuk: K = (log Cl ~log Ta-Tx ahol Tj és T2 a vérminták vételének időpontja, és Q és C2 a szén koncentrációja a Tx és T2 időpontban. A TALÁLMÁNY SZERINTI ÚJ PEPTIDEK HATÁSA A SZÉN-CLEARENCE-RE A vizsgált vegyületek vizes oldatát szubkután (bőr alá) adjuk egereknek. 24 órával később mérjük a szén-clearance-et a véráramban. A kezelt egereknél mért K-értéket összehasonlítjuk a kontroll állatokon nyert értékekkel. A kísérlet eredményeit az 1—3. táblázatok mutatják be. I. táblázat 1. kísérletsorozat A vizsgált vegyületek általános képlete : lm. 565 26 188 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 6C 65
