188311. lajstromszámú szabadalom • Eljárás biológiailag aktív poliszacharid-koncentrátumok és ilyen hatóanyagot tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 188311 2 melegítjük és a fehérjecsapadékot kihűlés után szűréssel elkülönítjük. A szűrlethez keverés közben 5,0 liter npropilalkoholt adunk, majd 13 ÓTa hosszat szobahőmérsékleten állni hagyjuk, ezután centrifugáljuk. Az üledéket 0,5 liter propilalkohollal elkeverve vizes közegben dezintegráljuk, majd újra centrifugáljuk, a centrifugált anyagot 45 °C-on csökkentett nyomáson szárítjuk. A kapott poliszacharid-koncentrátum súlya 50,0 g. 13. példa 100 g darált lenmaghéjat 550 ml petroléterrel zsírtalanítottunk, majd 600 ml 80%-os metanollal perkoláltunk. Az így nyert 84 g zsírtalanított, előextrahált maghéjat 30 percig 300 ml desztillált vízzel duzzasztottunk, majd 5X500 ml 60°C-os desztillált vízzel rázógéppel történő rázatással vontunk ki. A kivonatból a drogot centrifugálással távolítottuk el, majd a 2100 ml felülúszót 400 nú-re töményítettük be., pH-ját 5 %-os ecetsav hozzáadásával 4,5-re állítottuk. A zavaros folyadékot lecentrifugáltuk, majd a felül úszóhoz 800 ml metanolt adva csapjuk ki a 3,23 g poliszacharidot, amelynek uronsav-tartalma: 15%, összcukortartalma 78%, gátlási % 10mg/kgi.p.:39,0. 14. példa 200 g szárított mályvalevelet 1 liter vízzel kivonatolunk. A vizes kivonatot 2 óra hosszat állni hagyjuk, majd a vizes fázist préseléssel, a préslé centrifugálásával, majd szűrésével elválasztjuk. A tiszta vizes kivonathoz keverés közben 2 liter metilalkoholt adunk, a láváit csapadékot szűrjük és metanollal mossuk. Így 2,0 g poliszacharidkoncentrátumot kapunk. Ha kiindulóanyagként szárított mályvalevél helyett ugyanannyi mennyiségű szárított és őrölt mályvavirágot alkalmazunk, akkor 3,5 g poliszacharid-koncentrátumot kapunk. Az előzőek szerint 200 g szárított és őrölt festőmályva herbából kiindulva 1,0 g poiiszacharid-koncentrátum állítható elő. 15. példa 200 g szárított és őrölt útifűlevelet a 14. példa szerint dolgozunk fel, így 0,5 g poliszacharid-koncentrátumot kapunk. 16. példa 200 g szárított bolhafűmagot 500 ml vízzel kivonatolunk és továbbiakban a 14. példa szerint járunk el. így 10,0 g poliszacharid-koncentrátumot kapunk. 17 17. példa 200 g száraz hársfavirágot az 5. példa szerint kivonatolunk és a tiszta vizes kivonathoz állandó keverés közben 30 g báriumhidroxidot adagolunk. A kivált csapadékot szűrjük, alkohollal és vizes nátrium-szulfát-oldattal mossuk. 2,5 g poliszacharid-koncentrátumot kapunk. Az előző példát megismételjük, azonban báriumhidroxid helyett 45 g ammónium-szulfátot adagolunk. A kivált csapadékot szüljük és alkohollal mossuk. 2,0 g poliszacharid-koncentrátumot kapunk. 18. példa 200 g szárított és őrölt mályvavirág és 200 g szárított és őrölt útifűlevél keverékét 2 liter vízzel kivonatoljuk, majd a továbbiakban a 14. példa szerint járunk el. így 2,7 g poliszacharid-koncentrátumot kapunk. 19. példa 10 kg Trigonella foenum graecum magot 3 mm-es rostabetéttel ellátott kalapácsos őrlőmalomban aprítjuk. Az őrleményhez 40 liter 35 °C hőmérsékletű csapvizet adunk, ezzel 6 óra hosszat keverjük, majd a vizes kivonatból az őrleményt szeparátorral elkülönítjük. A kivonatolást 30 liter 35 °C hőmérsékletű csapvízzel és 3 óra hosszat tartó keveréssel megismételjük. \z egyesített vizes kivonatokat 60 °C-ra felmelegítjük, majd centrifugálással és szűréssel tisztítjuk. A vizes fázishoz kétszeres térfogatú 96 %-os etilalkoholt adunk élénk keverés közben. A továbbiakban a 8. példában leírtak szerint járunk el, így 180 g poliszacharid-koncentrátumot kapunk. Savas hidrolízissel galaktóz és mannóz cukrok különíthetők eh Az 1-19. példák szerint előállított poliszacharidkor centrátumok aliquot részét Sephadex G 75 molekulaszűrővel töltött oszlopon átengedtük, majd elemzésnek vett ttük ala. Az elemzési adatok a következők:- molekulasúly 75 000-2 000 000- legfeljebb 5 % nitrogént és foszforpentoxidban kifejezett foszfort tartalmaznak,- legfeljebb 25 % izzítási maradékuk van,- legalább 60 % cukrot, ezen belül legalább 30 % redi káló cukrot tartalmaznak,- savas hidrolízis után glukóz, galaktóz, xilóz, rhamnóz arabínóz vagy uronsav komponensekből legalább kettőt vagy ezek keverékét tartalmazzák,- patkányláb, carragenin-ödéma-teszttel vizsgálva fenil-butazonnal vagy indomethacinnal azonos nagyságrendű gyulladásgátló hatásuk van,- LD50 értékű egéren p.o. nagyobb mint 3000 mg/ testsúly kg. 20. példa Gyulladásgátló kúp előállítása céljából a 19. példa szerint előállított tisztított poliszacharid-koncentrátumot 1 —5 mikron közötti szemcsefinomságra mikronizáljuk. 0,5 g mikronizált poliszacharidot 3 g-os 40 °C-on öntött kúpba keverünk be, amely 5-30% Butirum 'cacao-t tartalmazó Adeps lanae(lanolin)-ból áll (Pharmacopoea Hungarica VI. Ed. VII. Tom. 1.). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
