188120. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új peptidek előállítására
1 188 120 2 0,1 mg és 100 mg közötti mennyiséget adunk be, és az átlagos egyszeri dózis általában körülbelül 50 mg, 100 mg, 250 mg és 500 mg lehet. A találmány szerinti eljárást a továbbiakban - a találmány oltalmi körének szűkítése nélkül - példákkal szemléltetjük. A jelen leírásban az alábbi rövidítéseket alkalmázzuk: Lac : laktoilcsoport Alá : alanilcsoport Glu : glutamilcsoport Gly : glicilcsoport DAP : aco-diamino-pimelilcsoport Z : benziloxi-karbonilcsoport Boc : tercier-butoxi-karbonilcsoport Bzl : benzilcsoport Ac : acetilcsoport Su : N-hidroxi-szukcinimid. 1. példa (1) reakcióegyenlet) 3,95 g Z-(L)-Boc-(D)-mezoDAP-(L)-GlyOBzl (1) és 0,85 g N-metil-morfolin 70 ml vízmentes diklór-metánnal készült elegyéhez — 10— 15 °C hőmérsékleten hozzáadunk 0,95 g klórhangyasavizobutil-észtert, és az elegyet félórán át ugyanezen a hőmérsékleten keverjük. Utána -40 °C hőmérsékletre hűtjük, és hozzáadunk 15 ml, 2 normál etanolos ammónia-oldatot. Az elegyet további félórán át ugyanezen a hőmérékleten keverjük, majd az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot feloldjuk etil-acetátban. Az oldatot vízzel mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékként kapott olajat dietiléterrel eldörzsölve 3,1 g Z-(L)-Boc-(D)-mezoDAP(D)-NH2-(L)-GlyOBzl-t (2) kapunk. IR-spektrum (nujol): 3300, 1735, 1685, 1655 cm-1. NMR-spektrum (CD3OD, delta): 1,48 (9H, s), 1,4-2,0 (6H, m), 4,03 (2H, s), 3,9^1,3 (2H, m), 4,13 (2H, s), 4,22 (2H, s), 7,40 (10H, s). 2. példa (2) reakcióegyenlet) 2,7 g Z-(L)-Boc-(D)-mezoDAP-(D)-NH2-(L)GlyOBzl (1) 75 ml metanol és 10 ml víz elegyével készült oldatát 1,0 g, 10%-os csontszenes palládium jelenlétében, normál nyomáson hidrogénezzük. Utána a katalizátort kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot dietiI-éterrel eldörzsölve 1,59 g Boc-(D)-mezoDAP-(D)-NH2- (L)-GlyOH-t (2) kapunk. IR-spektrum (nujol): 3600-2200, 1690 (váll), 1670 cm“1. NMR-spektrum (CD3OD, delta): 1,42 (9H, s), 1,2-2,0 (6H, m), 3,6-4,1 (4H, m). 3. példa (3) reakcióegyenlet) A Z-(L)-Boc-(D)-mezoDAP-(L)-D-AiaOBzl(D)-NH2-t (2) lényegében az 1. példában leírt módon állítjuk elő. IR-spektrum (nujol): 3380, 1280, 3200, 1725, 1690, 1665, 1640 cm“'. NMR-spektrum (CD3OD, delta): 1,37 (3H, d, J = 7Hz), 1,43 (9H, s), 1,4^2,0 (6H, m), 3,8-4,3 (2H, m), 4,45 (1H, q, J = 7Hz), 5,08 (2H, s), 5,15 (2H, s), 7,35 (10H, s). 4. példa (4) reakcióegyenlet) A Boc-(D)-mezoDAP-(L)-D-AlaOH-(D)-NH2-t (2) lényegében a 2. példában leírt módon állítjuk elő. IR-spektrum (nujol): 3250,1675 cm“'. NMR-spektrum (CD3OD, delta): 1,47 (9H, s), 1,4-2,0 (9H, m), 4,0 (2H, m), 4,27 (1H, q, J = 7Hz). 5. példa a ) lépés (5/a reakcióegyenlet) 0,361 g Boc-(D)-mezoDAP-(L)-D-AlaOH-(D)NH2 (1) és 0,15 g trietii-amin 2 ml dioxán és 2 ml viz elegyével készült oldatához jeges hűtőfürdőben hozzáadjuk 0,446 g heptanoil-D-Glu-(a-OBzl)OSu 5 ml dioxánnal készült oldatát, és a reakcióelegyet 6,5 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Utána a dioxánt ledesztilláljuk, a maradék vizes oldatot 5%-os sósavval pH = 3-ra savanyítjuk, és 25 ml etil-acetáttal kirázzuk. Az etil-acetátos oldatról az oldószert ledesztilláljuk, a maradékot vízzel mossuk és foszfor-pentoxid felett szárítjuk, ily módon 510 mg heptanoil-y-D-Glu-(a-OBzl)-(L)-Boc-(D)mezo DAP-(L)-D-AlaOH-(D)-NH2-t (3) kapunk. IR-spektrum (nujol): 3280, 1725, 1660, 1635 cm“1. NMR-spektrum (CD3OD, delta): 0,90 (3H, t,J = 6Hz), 1,1-1,5 (23H, m), 1,46 (9H, s), 3,8-4 6 (4H, m), 5,13 (2H, s), 7,33 (5H, s). b) lépés (5/b reakcióegyenlet) 0,40 g heptanoil-y-D-Glu-(a-OBzl)-(L)-Boc(D)mezo DAP-(L)-D-AlaOH-(D)-NH2 (3) 10 ml metanol és 1,5 ml víz elegyével készült oldatát 0,2 g, 10%-os csontszenes palládium jelenlétében hidrogénezzük. Utána a katalizátort kiszűrjük, a szűrletről az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradékot feloldjuk 4 ml trifluor-ecetsavban, és az oldatot félórán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután a trifluor-ecetsavat ledesztilláljuk, a maradékot dietil-éterrel mossuk, majd feloldjuk 3 ml vízben. A vizes oldat pH-ját 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal 3-ra állítjuk, majd az olda ot felvisszük egy HP-20 makropórusos, nem-ion >s, adszorpciós gyantával töltött oszlopra (10 ml). \z oszlopot vízzel mossuk, majd 15 ml, 30%-os, vizes metanollal eluáljuk. Ily módon 270 mg hept.ínoil-y-D-Glu-(a-OH)-(L)-mezoDAP-(L)D-AlaO! l-(D)-NH2-t (4) kapunk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
