188079. lajstromszámú szabadalom • Eljárás isztamicin B 3-O-demetil-származékok előállítására
1 188 079 2 ence Publishers Inc. [1967]). Előnyös módszer a demetilezési reakcióra, melyet itt is használunk, az isztamicin B0 melegítése 48%-os hidrogén-bromiddal 90-100 °C-on lezárt csőben, így a demetilezési reakciót igen rövid reakcióidő alatt sikerül befejezni (lásd: 2 037 743 sz. nagy-britanniai szabadalmi bejelentés). Az (Ib) képletű 3-O-demetilisztamicin B-t a találmány szerint az (la) képletű 3-O-demetilisztamicin B0 4-metilamino-csoportjának glicinnel történő acilezésével állítjuk elő. Ezt a gyakorlatban úgy hajtjuk végre, hogy a 3-O-demetilisztamicin B0 1- és 2'-amino-csoportját és a 6'-metilamino-csoportját ismert monovalens amino-védőcsoporttal védjük, így a (III) általános képletű 3-O-demetilisztamicin B0 1-, 2'- és 6'-N-védett származékát kapjuk, ahol a képletben R' jelentése egyértékű aminovédőcsoport, a (III) képletű vegyületet olyan N-védett glicinnel reagáltatjuk, melynek amino-védőcsoportja vagy azonos vagy eltérő a (III) képletű vegyület 1-, 2'- és 6'-helyzetében lévő csoportok védőcsoportjával vagy ennek reakcióképes származékával, így a 4-metilamino-csoportot acilezzük és (IV) általános képletű vegyületet kapunk, ahol R' jelentése a fenti, és B jelentése amino-védőcsoport, majd a (IV) általános képletű vegyületben valamennyi amino-védőcsoportot eltávolitjuk és igy az (Ib) képletű 3-O-demetilisztamicin B-t kapjuk. Az aminocsoport védőlépésben az (la) képletű 3-O-demetilisztamicin B0 1- és 2'-amino-csoportját és a 6'-metílamino-csoportját egyidejűleg védhetjük egy egyértékű amino-védőcsoporttal anélkül, hogy a 4-metilamino-csoportot befolyásolnánk. Ilyen amino-védőcsoportként alkalmazhatunk például alkoxikarbonil-csoportot, előnyösen olyat, amely 2- 7 szénatomot tartalmaz, például tere. butoxikarbonil-, tere. amiloxikarbonil-, előnyösen 4-7 szénatomot tartalmazó cikloalkiloxikarbonil-csoportot, például ciklohexiloxikarbonil-csoportot, valamint aralkiloxikarbonil-, például benziloxikarbonil-csoportot és acil-csoportot, előnyösen 2-7 szénatomos alkanoil-, például trifluoracetil- és o-nitrofenoxiacetil-csoportot. Az ilyen amino-védőcsoport bevitelt a peptidek szintézisénél ismert módon végezhetjük, például ismert, az amino-védőcsoport bevitelére alkalmas reagenst használunk, például savhalogenid, savazid, aktív észter és savanhidrid stb. formájában. Az amino-védőcsoportbevitelre alkalmas reagenst 1 mól 3-O-demetilisztamicin Bora vonatkoztatva 2,5-4 mól mennyiségben használjuk, a 3-O-demetilisztamicin B0 amino- és metilamino-csoportjainak különböző reakcióképessége miatt célszerű a (III) képletű I,2',6'-tri-N-védett 3- O-demetilisztamicin B0 előállítása. Hasonlóan a (III) képletű 3-O-demetilisztamicin B0 l,2',6'-tri- N-védett formájának előállítása jó kitermeléssel történhet, ha a 3-O-demetilisztamicin B0-t 1 mólekvivalens kétértékű kationnal, például az átmeneti fémekkel, például rézzel, nikkellel, kobalttal vagy kétértékű cinkkel reagáltatjuk, így fémkomplexet kapunk, amely komplexet 3-5 mól amino-védőcsoport-bevezető reagenssel reagáltatunk, majd a reakció termékéből a fémkationt eltávolítjuk (lásd: 2 036 020 sz. nagy-britanniai szabadalmi bejelentés és 090 591 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi bejelentés). A (III) képletű l,2',6'-tri-N-védett 3-O-demetilisztamicin B0 4-metilamino-csoportjának glicilezését, azaz glicinnel történő acilezését úgy végezhetjük, hogyha a vegyületet glicinnel vagy a glicin reakcióképes származékával reagáltatjuk a peptidszintézisből ismert N-acilezésí eljárás segítségével. Ilyen eljárások például a diciklohexilkarbodiimides eljárás, a vegyes savanhidrides eljárás, az azidos eljárás, valamint az aktív észteres eljárás stb. Előnyös, hogyha a glicin-reagens aminocsoportja védett, erre a célra az amino-védőcsoport azonos vagy különböző lehet a 3-O-demetilisztamicin B0 1- és 2'-amino-csoportjának és a 6'-metilaminocsoportjának könnyen eltávolítható védőcsoportjától így például a glicin-reagensben az aminocsoportot védő csoport a fentemlített amino-védőcsoportok valamelyike lehet. A glicin-reagenssel végzett acilezési reakciót előnyösen az aktív észteres eljárás szerint szerves oldószerben, például dioxánban végezzük 40-60 °C-ra történő melegítés közben és így a fenti (IV) képletű vegyületet kapjuk. A (IV) képletű vegyület amino- és metilaminocsoportjainak amino-védőcsoportjait ismert módon távolíthatjuk el, például palládium, platinaoxid stb. mint katalizátor jelenlétében végzett hidrogenolízissel, ezáltal az aralkiloxikarbonil-csoportot eltávolitjuk, vagy trifluorecetsav vagy ecetsav vizes oldatában vagy híg vizes savas oldatban, például híg sósavban végzett hidrolízissel az egyéb amino-védőcsoportokat távolíthatjuk el. Az (Ic) képletű 3-0-demetil-2"-N-formimidoilisztamicin B-t a találmány szerint úgy állíthatjuk elő, hogy az (Ib) képletű 3-O-demetílisztamicin B 2"-aminocsoportját formimidoilezzük. Erre a célra kiindulási anyagként (III) képletű 2-O-demetilisztamicin B0 1-, 2'- és 6'-tri-N-védett származékát használjuk. A (III) képletű vegyületet N-védett glicinnel reagáltatjuk, melynek amino-védőcsoportja nem azonos a (III) képletű vegyület 1-, 2'- és 6'-helyzetében lévő amino-védőcsoportokkal, vagy ennek reakcióképes származékával reagáltatjuk és ezáltal a 4-metilamino-csoportot acilezzük. (IV) általános képletű vegyületet kapunk - ahol R' jelentése egyértékű amino-védőcsoport, és B jelentése egyértékű amino-védőcsoport, amely nem azonos R'-vel. Ezután a (IV) képletű vegyület glicincsoportjában a 2"-amínocsoport amino-védőcsoportját szelektíven lehasítjuk és a kapott vegyületet iminoéterrel reagáltatjuk, ily módon a 2"-aminocsoportot amidincsoporttá alakítjuk így egy (VI) általános képletű vegyületet kapunk - ahol R' jelentése a fenti. Végül a (VI) képletű vegyületben.az 1-, 2'- és 6'-helyzetekben az amino-védőcsoportokat eltávolítjuk és így kapjuk az (Ic) képletű 3-0- demetil-2''-N-formimidoil-isztamicin B-t. Az (IV) képletű N-védett intermedier vegyületet - ahol R' jelentése benziloxikarbonil-csoport és B jelentése tere. butoxikarbonil-csoport - előnyösen úgy állítjuk elő, hogy az l,2',6'-tri-N-benziloxikarbonil-3-O-demetilisztamícin B0-t a 4-metilamino-csoporton N-terc. butoxikarbonilglicin N-hidroxíszukcinimíd észterével acilezzük. Egy másik előnyös foganatosítási mód szerint az l,2',6'-tri-N-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
