188037. lajstromszámú szabadalom • Eljárás oxazolino-azetidinon-származékok előállítására
1 188 037 2 karbonil-amino))-5-(benzhidril-oxi-karbonil)-- t (-valeramido)]-3-hidroxi-metil-3-cefem-4-karboxilát-szulfont. Az oldatot ezt követően bevisszük egy 0 °C-ra termosztált elektrolizáló cella katódterébe. Az anódtérbe bevisszük az anolitot, egy 1,0 mólos 5 tetraetil-ammónium-acetát puffert (pH = 3,6) és a katolitot oxigénmentesítjük argongázárammal. Az elektrolízist úgy vitelezzük ki, hogy - 1,50 V potenciált viszünk a katódrá és ezt a potenciált addig tartjuk fenn, ameddig az áram nullára nem csők-10 ken. A katód-oldat HPLC analízisével kimutatjuk azt, hogy a kiindulási anyag mikor használódott el teljesen. Ily módon N-[benzhidril-3'-hidroxi-metil- 2'-il-2'-(R,S)-but-3'-enoát]-2-(R)-(nátrium-szulfinát)-3-[D-((5-)2,4-diklór-benzoxi-karbonil- 15 amino))-5-(benzhidril-oxi-karboniI))-valeramido]-4-oxo-azetidint állítunk elő. b) Olom-tetraacetátos oxidáció A katolitot ezután kinyerjük a katódtérből és 90 ml lehűtött etil-acetátot adunk hozzá. A rétegeket szétválasztjuk és az etil-acetátos réteget háromszor 40 ml 0,3 mólos foszfát-puflferrel, egyszer pe- 25 dig 40 ml telített nátrium-klorid-oldattal mossuk. Az etil-acetátos oldatot nátrium-szulfát felett szárítjuk, szűrjük és kis térfogatot (8 ml) kiveszünk belőle nmr analízis végett. A visszamaradó oldat térfogatát körülbelül 25 ml-re csökkentjük. Ezt az 30 oldatot hirtelen lehűtjük és 1 mmól ólom-tetraacetátot adunk hozzá keverés közben, majd újabb 88 mg ólom-tetraacetátot viszünk az elegybe. Abban az esetben, ha a HPLC analízis azt mutatja, hogy a reakció befejeződött, akkor a csapadékot34 35 vákuumszűréssel elkülönítjük, 25-25 ml 1 : 1 arányú telített nátrium-klorid-oldat/0,3 mólos 7-es pH-jú foszfát-puffer-oldat eleggyel kétszer mossuk, nátrium-szulfát felett szárítjuk, szűrjük és vákuumban szárazra pároljuk, így 557 mg habot kapunk. 40 Ennek az anyagnak kis részét (40 mg) HPLC módszerrel kezeljük WA C,8 előkészítő oszlopon, az eluálást acetonitrillel végezzük. Ily módon 14 mg benzhidril-(2'-(S))-2'-((lR,5S)-3-(D-)4-(2,4-diklórbenziloxi-karbonil-amino))-4-(benzhidril-oxi- 45 karbonil)-but-1 -il-7-oxo-4-oxa-2,6-diaza-biciklo[3.2.0]-hept-2-en-6-il]-4'-hidroxi-3'-exometilénbutirátot kapunk. Az nmr spektrum (CDCIj) dubletet mutat 8 6,1- nél 3,2 Hz kapcsoló állandóval, amely azt jelzi, 50 hogy a vegyület a 2'-(S)-izomer. Benzhidril-(2'-(R,S))-2'-[lR,5S)-3-(p-toluil)-7--oxo-4-oxa-2,6-diazo-biciklo[3.2.0]-hept-2-en-6-il]-4'-hidroxi-3'-exometilén-butirát A. Eljárásmód a) Elektrolízis 34 ml metanol és 2,0 ml ecetsav felhasználásával 0,5 mólos nátrium-perklorát-oldatot készítünk. 65 Ezután 4,0 g benzhidril-7-(S)-(p-toluil-amido)-3- hidroxi-metil-3-cefem-4-karboxilátot adunk az oldathoz és a keletkező elegyet egy 0 °C-ra termosztált elektrolizáló cella katódterébe visszük. Az elektrolitét kis mennyiségű argongázzal levegőmentesítjük. Az elektrolízist 750 ma (37,5 ma/cm2) katódárammal kezdjük és fokozatosan megyünk le 50 ma-ra 3000 másodperc alatt. Azután a katolitot HPLC-vel megelemezzük annak megállapítására, hogy a redukció mennyire haladt előre. Ilyenkor a folyamat majdnem teljes és N-[benzhidril-3'-hidroximetil-2'-il-2'-(R,S)-but-3'-enoát]-2-(R)-(nálriumszulfinát)-3-(S)-(p-toluil-amido)-4-oxo-az.etidin keletkezett. Az elektrolízist megállitjuk. b) NBS oxidáció A katolitot ezután egy lombikba visszük és 0 °C- ra hűtjük alkoholos-jeges fürdőben. A lehűtött katolithoz 10 perc alatt hozzáadjuk 1,96 g N-brómszukcinimid 50 ml metanollal készített oldatát, amelynek végén a reakcióelegyet HPLC-vel megelemezzük, amely azt mutatja, hogy az oxidáció teljessé vált. A reakcióelegyhez hozzáadjuk 0,3 mólos 7-es pH-jú foszfát- és telített nátrium-klorid. oldat 1 : 1 arányú elegyét, amely 1% nátrium-hidrogénszulfitot tartalmaz, majd az egészet kétszer exlraháljuk etil-acetáttal. Az etil-acetátos rétegeket egyesítjük, háromszor mossuk a fenti 1%-os hidrogén-szulfit-oldattal, magnézium-szulfát felett szárítjuk, szűrjük és vákuumban szárazra pároljuk, így fehér színű habot kapunk. Ez a fehér hab 3,32 g nyers benzhidril-(2'-(R,S)-2'-[(lR,5S)-3-(p-toluil)-7-oxo-4-oxa-2,6-diaza-biciklo[3.2.0]-hept-2-en-6- il]-4'-hidroxi-3'-exometilén-butirátot tartalmaz (94% nyers kitermelés). Ezt a nyers termékelegyet átkristályosítjuk 15 ml 1:3 arányú hexán/-toluolelegybci és így 2,03 g 2'-(R) és 2'-(S)-izomerelegyet kapunk. A kapott nyers termékelegynek az nmr spektruma azt mutatja, hogy a 2'-(R)- és 2'-(S)izomer közelítőleg egyenlő mennyiségben van jelen és a nyers termékelegynek 5-10%-a a (VIII) szerkezeti képletnek megfelelő lakton. Mindegyik jelenlévő vegyület mennyiségét mindegyik molekula C-5 protonjára kapott csúcs alatti terület adja meg. Hasonlóan az átkristályosított termékelegy elemzése azt mutatja, hogy csupán a 2'-(R)- és a 2'-(S)-izomer van jelen egyenlő mennyiségben (lakton nincs). A nyers termékelegy és az átkristályositott termékelegy nmr-spektruma mutatja a fenti molekulák jellemző C-5 protonjainak a kémiai változásait. nmr DMSOd6: 2'-(R)-izomer, 8 6,10; 2'(S)izomer, 8 6,28; lakton, 8 6,65. B. Eljárásmód a) Elektrolízis 48 ml metanol és 3,0 ml ecetsav felhasználásával 0,5 mólos nátrium-perklorát-oldatot készítünk. Ezután 3,0 g benz.hidril-7-(S)-(p-toluil-amido)-3- hidroxi-metil-3-cefem-4-karboxilátot adunk az ol5
