187836. lajstromszámú szabadalom • Eljárás (amino-propil)-amino-bleomicin származékok előállítására
1 187 836 2 3. Táblázat A vegyület sorszáma betűjelzése A rézmentes vegyület mikróbaellenes hatása mcg/mg Mycobacterium Bacillus symegmatis subtilis ATCC 697 ellen ellen A rézmentes vegyület 50%-os gátlást előidéző koncentrációja HeLa sejttenyészetben mcg/ml 1. MCLPE 16 800 13 266 0,54 2. MPE 7 282 7 660 0,60 3. MBZ 6 384 7 230 0,20 4. MCLBZ (P) 11 536 7 142 0,57 5. MCLBZ (m) 7615 5 490 0,80 6. MCLBZ (o) 6 548 4 545 1,10 7. MDCLBZ (m,p) 10 601 4 263 0,82 8. MDCLBZ (o,p) 13013 2 940 1,05 9. MFBZ (p) 8 116 8 145 0,75 10. MBRBZ (p) 15 446 6 001 0,57 11. MPFBZ 7 950 1 509 1,60 12. MMOBZ (p) 5 491 6 607 0.75 13. MDMOBZ (o,p) 5 351 5312 1,30 14. MCLAPE (p) 16 959 5 459 0,52 15. MDBZOBZ (m,p) 4516 1 772 0,36 16. MPP 8 453 10 295 0,46 17. MDPE 21 084 3 554 1,00 18. MCNBZ 3 163 4 347 1,10 19. MTFBZ (m) 8 504 6 063 0,75 20. MNAPH 6 581 4 785 0,78 21. MANTRA 13 250 4 504 0,80 22. MCO 22 860 12 300 0,45 23. MDBZME 14 920 2 593 1,45 24. MAPE 7 901 14 089 1,00 25. MFUR 4 790 9 548 0,30 26. MTHIO 5 595 10 626 0,39 27. MDBZ 14 194 1 138 0,89 28. MCP 13 595 16 180 1,00 29. MCHM 15414 12 148 0,63 30. MC HE 35 030 14 440 0,56 31. MCHEP 25 924 20 143 0,48 32. MCU 28 308 8 146 0,58 33. MNB 16219 13 332 0,68 34. MDDBZOBZ 164 49 0,38 35. MMDBZ 13 784 1 742 0,87 36. MMCO 21 840 20 000 0,29 37. EEDBZ 10 680 1 047 0,70 38. BBDBZ 17910 530 2,00 39. MTBZ 7 746 580 2,30 40. ATBZ 4 450 479 1,90 41. PPDBZ 16 000 7 100 0,66 42. PPCO 26 000 14 600 0,51 43. PYDBZ 14 420 1 230 0,50 44. PYCLBZ 11 350 6 080 0,31 45. PYCO 43 000 15 100 0,81 46. EECLPE 17 480 13 310 0,52 47. MCT 3915 1 760 0,18 48. MDDCL 14 8 0,058 49. MDDDCL 23 8 0,063 50. MDDMO 145 35 0,90 51. MDBZOBZOBZ 163 46 0,12 52. MDCOBZ 268 49 0,13 53. MDTBZOBZ 11 26 0,62 Az (1) és (2) kísérletekben kapott eredményeinket mutatja a 3. táblázat. A 3. táblázat mutatja, hogy a találmány szerinti vegyületek egyrészt erős gátló hatást fejtenek ki a tenyésztett HeLa sejtekre, másrészt jelentős mikróbaellenes hatásuk van. (3) A tüdőkárosító hatás (tüdőfibrosis, a tüdőszövet rostos elfajulása) vizsgálata egereken ICR törzsű egereket (15 hetes hímeket, csopor- 5 tönként 9 állatot) alkalmaztunk. Minden egyes egérnek 10 egymást követő napon át naponta 5 mg/kg vizsgálandó anyagot adunk intraperitoneális úton, naponta egy alkalommal, az adagolási időszak befejezése után az egereket 5 héten át meg- 10 figyeltük, utána leöltük, és felboncoltuk, hogy a tüdőfibrosis gyakoriságát és súlyossági fokát megállapítsuk. A kiértékelést úgy végeztük, hogy megállapítottuk a tüdőkárosult, kezelt egerek számát és a károsodás súlyosságát, vizsgálati eredményeinket 15 a 4. táblázatban foglaljuk össze. A 4. táblázatban a pontszámértékek jelentése a következő: 0 pontszám: nincsen fibrosis 0 1 pontszám: izzadmány felhalmozódása a tüdő'0 hólyagocskákban és fibrosis-szerű elváltozás a hólyagocskák elválasztófalában 2 pontszám: több területen mutatkozó fibrosis 4 pontszám: elszórt fibrosis 6 pontszám: fibrosis az összes területnek több, 25 mint kétharmad részében Az „arányt” a „bleomicin-komplex” figyelembe vételével számítottuk ki. A 4. táblázatból látható, hogy egyes találmány szerinti vegyületek egyáltalában nem idéznek elő 30 tüdőfibrosist, és még azon esetekben is, amikor fibrosis megfigyelhető, a tüdőkárosító hatás súlyossága lényegesen csökkent, előfordulásának gyakorisága kevesebb, mint a fele, és súlyossági foka kevesebb, mint a hetedrésze az APMP-BLM [(ami- 35 no-propil)-N-metil-amino-propil-amino-bleomicin] kezelés által előidézett tüdőkárosodás gyakoriságának, illetve súlyosságának. Mivel mindeddig igen nehéz volt elkerülni a bleomicin mellékhatásait, különösen a tüdőfibrosist, meglepő, hogy a talál- 40 mány szerinti vegyületek - bár ezt csak állatkísérletekben mutattuk ki - nem okoznak ilyen mellékhatást. 45 4. Táblázat A károsodás gyakorisága A súlyosság foka 50 A vegyület sorszáma A tüdőfibrosisban szenvedő egerek száma (%) A tüdőfibrosis pontszámértéke, Arány osztva az állatok Arány összes számával (%) 1. 2/9 (22) 0,35 3/27 (11) 0,13 2. 3/9 (33) 0,53 7/27 (26) 0,31 3. 2/8 (25) 0,40 2/24 (8) 0,10 4. 1/7 (14) 0,22 1/21 (5) 0,19 5. 4/9 (44) 0,70 7/27 (26) 0,31 6. 5/9 (56) 0,90 6/27 (22) 0,26 7. 1/9 (11) 0,18 1/27 (4) 0,05 8. 1/9 (11) 0,18 2/27 (7) 0,08 9. 2/9 (22) 0,35 3/27 (H) 0,13 10. 2/9 (22) 0,35 4/27 (15) 0,18 11. 2/9 (22) 0,35 2/27 (7) 0,08 12. 2/7 (29) 0,46 3/21 (14) 0,17 13. 2/6 (33) 0,53 2/18 (11) 0,13 14. 2/9 (22) 0,35 3/27 (11) 0,13 15. 1/9 (11) 0,18 1/27 (4) 0,05 17. 1/5 (20) 0,32 1/15 (7) 0,08 18. 0,9 (0) 0,00 0/27 (0) 0,00 8
