187808. lajstromszámú szabadalom • Eljárás N-(karboxi-alkil)-prolin tartalmő tripeptidek előállítására
1 187.808 2 létből 6,39 g-ot (0,02 mól) 2,23 g (0,01 mól) N-(metoxi-karbonil-metil)-prolin-hidrokloriddal kondenzálunk, szobahőmérsékleten 2,7 g (0,02 mól) 1- hidroxi-benztriazol, 12 ml N-etil-morfolin, 2,06 g (0,01 mól) diciklohexil-karbodiimid és 50 ml tetrahidrofurán jelenlétében 17 órán át végrehajtott reagáltatás útján. így 1,9 g mennyiségben szirup formájában N-(metöxi-karbonil-metil)-L-propil-ßalanil-L-prolin-benzilésztert kapunk, amely az előállítani kívánt tripeptiddé alakítható a szervezetben való lebomlás útján. Ezt a diésztert (1,75 g, 3,9 millimól) ezután bárium-hidroxiddal hidrolizáljuk metanolban, majd kénsavval kezeljük, 1,2 g mennyiségben fehér csapadékként N-(karboxi-metil)-L-propil-ß-alanil-L- prolin-hemiszulfátot kapva. Elemzési eredmények a Ci5H23N306 • Vi H2S04 képlet alapján: számított: C% = 46,15, H% = 6,20, N% = 10,76; talált: C% » 45,81, H% = 6,50, N% * 9,94, C% = 46,14, H% = 6,52, N% = 10,22 C«1d = -70,4“ (c = 0,8, víz). SHR-patkányokon végzett vizsgálatban (n = 3) 25 mg/kg intraperitoneális dózisban ez a vegyület a követkéző eredményeket adja a diuretikus-naturetikus elemzés során: nátriumion 676,04 (kontroll; 126,76), káliumion: 242,53 (kontroll: 85,12); vizelet (ml/patkány): 16 (kontroll: 3). A vegyület ugyanakkor két érzéstelenített kutyán 3,30 és 300 mg/kg nagyságú percenkénti dózisban növeli a renális véráramot és csökkenti a renális vaszkuláris ellenállását. Egy további kísérletben három kutyán ez a vegyület 12 pg/kg nagyságú EDj 5-értéket ad, szemben a dopaminnál intravénás beadás esetén észlelhető 3,5 pg/kg értékkel. 4. példa Az előző példákban ismertetett módon 7,23 g (0,03 mól) ß-brom-propionsav-etiteszter és 7,33 g (0,04 mól) L-prolin-benzilészter-hidroklorid reagáltatásával 4,6 g (50,2%) N-(2-etoxi-karboniletil)-L-prolin-benzilészter állítható elő. Az utóbbiból azután 4,6 g-ot (0,015 mól) szénhordozós palládiumkatalizátor fölött hidrogénezünk, 2,96 g (78%) mennyiségben a 169-171 “C olvadáspontú N-(2-etoxi-karbonil-etil)-L-prolin-hidrokloridot kapva. Az utóbbiból 2,42 g-ot (0,0096 mól) 2,25 g (0,0072 mól) L-alanil-L-prolin-benzilészterhidrokloriddal kondenzálunk diciklohexil-karbodiimides módszerrel, 0,8 g mennyiségben N-(2- etoxi-karbonil-etil)-L-prolil-L-alanil-L-prolinbenzilésztert kapva. Ezt a szervezetben a céltermék tripeptiddé alakuló vegyületet azután báriumhidroxiddal vizes metanolban hidrolizáljuk, 0,498 g (64%) mennyiségben a 133-136 “C olvadáspontú N-(karboxi-etil)-L-prolil-L-alanil-L-prolint kapva. Elemzési eredmények a C,8H2JN306 • C2H3OH képlet alapján: számított: C% = 51,54, H% = 7,93, N% = 10,02; talált: C% - 51,95, H% - 7,12, N% = 10,19, C% = 51,72, H% = 7,32, N% - 10,04. Md = -147,3* (c = 1, víz). Ez a vegyület két érzéstelenített kutyán percenkénti 300 pg/kg dózisban 34%-os növekedést eredményez a renális véráramban és 23%-os csökkenést a renális vaszkuláris ellenállásban. 5. példa 5,95 g (0,017 mól), az 1. példában ismertetett módon előállított DL-ß-metil-ß-alanil-L-prolinbenzilészter-hidrokloridot 4,41 g (0,015 mól), 6-bróm-kaprilsav-etilészter és prolin-benzilészterhidroklorid reagáltatása, majd a benzilcsoport lehasítása céljából végzett hidrogénezés útján kapott L-N-(5-metoxi-karbonil-pentil)-prolin-hidrokloriddal reagáltatunk, kondenzálószerként diciklohexil-karbodiimidet használva 1-hidroxi-benztriazol és N-etil-morfolin jelenlétében tetrahidrofuránban. A kapott termék 1,5 g mennyiségben szirupszerű N-(5-metoxi-karbonil-pentil)-L-prolil-DL-ß-metil-ß-alanil-L-prolin-benziteszter, amelynek tömegspektrumában 530 m/e értéknél M +1 csúcs észlelhető. Bárium-hidroxidos hidrolízissel ennek az észternek 0,5 g-nyi mennyiségéből 0,2 g mennyiségben a 80-84 “C olvadáspontú N-(5-karboxi-pentil)-L- prolil-DL-ß-metil-ß-alanil-L-prolin állítható elő. [aló = —90,1“ (c = 1, metanol és víz 1: 1 arányú elegye). Elemzési eredmények a C20H33N3<V 1,25 H20 képiét alapján: számított: C% = 55,35, H% = 8,36, N% = 9,68; talált: C% = 55,49, H% = 8,78, N% = 9,05 6. példa A korábbiakban ismertetett módon 12,5 g (0,76 mól) D,L-3-amino-3-fenil-propionsavat reagáltatunk 9,6 g (0,095 mól) trietil-aminnal és 20,7 g (0,095 mól) di-terc-butil-dikarbonáttal 250 ml dimetil-formamidban 25"C-on 17 órán át, 19,9 g (79%) mennyiségben 115-117 “C olvadáspontú fehér csapadék formájában a megfelelő t-boc származékot kapva. Ebből azután 7,95 g-ot (0,03 mól) 7,23 g (0,05 mól) L-prolin-benzilészter-hidrokloriddal kondenzálunk, 13,6 g mennyiségű dipeptidet kapva. A védőcsoportot trifluor-ecetsawal metilén-klorid és 1,3-dimetoxi-benzol elegyében lehasítjuk, vízmentes hidrogén-kloriddal végzett kezelés után fehér csapadékként DL-ß-fenil-ß-alanil-L- prolin-benzilészter-hidrokloridot kapva. Ebből az anyagból 10,1 g-ot (0,026 mól) azután 5,81 g (0,026 mól) N-(metoxi-karbonil-metil)-L-prolinhidrokloriddal kondenzálunk, amikor szilikagélen metanol és metilén-klorid elegyével végrehajtott gradiens-eluálás után 1,8 g mennyiségben N-(meto-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 6
