187804. lajstromszámú szabadalom • Eljárás színergetikus hatású vérnyomáscsökkentő gyógyszerkészítmények előállítására
1 187.804 2 és parcnterálisan adjuk. Külön kiemeljük, hogy a találmány szerinti eljárással előállított gyógyszerkészítményekben a renális dopaminerg vegyületek és a ß-blokkolo vegyületek klinikailag hatásos dózisát aszerint választjuk meg, hogy figyelembe veszszük az egyes komponensek fél-élettartamát és terápiái hatásának maximumát is. Egyes esetekben kívánatos lehet, hogy a beteg kezelőorvosa a két hatóanyagot külön-külön alkalmazza, a fentebb leírt új terápiái hatás elérése céljából. Bizonyos körülmények között egy harmadik - a fentiekkel azonos típusú vagy azoktól eltérő - hatóanyagot is adhatunk a készítményhez, például olyan orális egységdózist készíthetünk, amely klinikailag hatásos mennyiségű 6-klór-l-(4-hidroxi-fenil)-7,8- dihidroxi-2,3,4,5-tetrahidro-lH-3-benzazepin-metil-szulfonát és propranolol-hidrogén-klorid mellett hidroklórtiazidot vagy triamterene-t tartalmaz. A hirtelen fellépő, sürgős ellátást igénylő kardiovaszkuláris betegségek esetén parenterális, rendszerint intravénás készítményeket használunk, például olyan készítményt, amely 1-3 mg/kg propranololt és 0,1-10 mg/kg előnyös 6-klór-l-(4-hidroxi-fenil)-7,8-dihidroxi-2-3-4-5-tetrahidro-1 H-3-benzazepin-metil-szulfonsav-sót tartalmaz. A vese clearance vizsgálatot a szakemberek számára ismeretes módosított foszfát-mannitol-eljárással végezzük, kifejlett, idomított, éber, éheztetett nőstény korcs kutyákon, az állatokat hátukra fektetve lazán rögzítjük egy külön erre a célra kialakított homorú deszkalapon. A vizsgálandó vegyületek veseműködésre kifejtett hatását a tényleges renális plazma átáramlás (RPF), a giomeruláris filtráció mértéke (GFR) és a filtrációs frakció (FF) mérésével határozzuk meg. A vizelettérfogatot, pH-t és elektrolitürítést szintén mérjük. A tiszta víz clearance-ét a plazma és a vizelet ozmolitikus sajátságaiból számítjuk ki. Az állatoknak 500 ml csapvízből álló vízterhelést adunk orálisan, 30 perccel a kezelés megkezdése előtt. Az állatoknak a kísérlet egész tartama alatt infúziós pumpával, 3 ml/perc áramlási sebességgel 4% mannitol-foszfát-pufferoldatot (pH 7,4) adunk intravénás infúzió formájában. A giomeruláris filtráció mértékét a kreatinin clearance-ből, a tényleges renális plazma átáramlást a p-amino-hippursav (PAH) clearance-ből határozzuk meg. A clearanceeket szimultán módon határozzuk meg úgy, hogy az infúziós oldathoz 0,4% kreatinint és 0,08% p-amino-hippursavat adunk. A megfelelő plazmaszintet úgy állítjuk be, hogy a vizeletgyűjtés megindítása előtt 30 perccel elkezdjük a fenti oldat infúzióját, így az első vizeletminta (U,) levételekor már beáll az egyensúlyi helyzet. Ezen felül, 1,5 ml/kg 1% kreatinint tartalmazó foszfát-puffért injektálunk intravénásán 14 perccel az levétele előtt. A kísérlet során 10 percenként további vizeletmintákat veszünk. A vizeletminta gyűjtését a kísérlet során végig a húgyhólyagban maradó katéterrel végezzük, a tökéletes vizelet gyűjtést úgy biztosítjuk, hogy minden minta levétele után 10 ml meleg vízzel átöblítjük a hólyagot, majd a hólyagot levegővel is átöblítjük. A vénás vérmintákat az egyes clearanceszakaszok középidejében vesszük, a vénában bennmaradó katéter segítségével. A plazma és a vizelet ozmolitikus sajátságait a friss minták fagyáspontcsökkenésének mérésével határozzuk meg. A vizelet térfogatát és pH-ját a levételkor jegyezzük fel. A plazmát és vizeletet fagyasztva tároljuk a meghatározások elvégzéséig. A kálium- és nátriumion mennyiségét lángfotometriás módszerrel határozzuk meg, a kloridion, kreatinin és p-amino-hippursav mennyiségét pedig kolorimetriásan mérjük, standard automata analizátoros módszerrel. A fenti meghatározásokat minden egyes mintában egyidejűleg végezzük. Az intenzitás-csúcsokat elektronikusan azonosítjuk és on-line teletype-on regisztráljuk, egyidejűleg egy időosztásos üzemű számítógépen tároljuk, majd később ezen a megfelelő standardokat használva matematikailag elemezzük. Az adatokat a legkisebb négyzetek módszerével kapott regressziós egyenesből számítjuk ki, és a minőségét tekintve megfelelő kontrollokat egyidejűleg elemezzük a rendszer reprodukálhatóságának és megbízhatóságának kiértékelésére. A kísérlet kezdetekor a húgyhólyagot kiürítjük, így 3 kontroll clearance-et (U,-U3,1. fázis) határozunk meg. Az I. fázis után orálisan gyomorszondával 10 mg/kg bázisnak megfelelő 6-klór-7,8-dihidroxi- 1 -(4-hidroxi-fenil)-2,3,4,5-tetrahidro-1 H-3-benzazepin -metil-szulfonátot adunk az állatoknak. A propranolol-hidrogén-kloridot a vizsgálat folyamán a megfelelő hatásos vérszint biztosítása céljából 4 ml sóoldatban intravénásán adjuk a 3. clearance (I. fázis) után, 20 pg/kg 0,5 mg/kg és 1,0 mg/ kg dózisokban. A C4-Ca, C7-C9 és C,o-C,2 (II., III. és IV. fázis) vizsgálandó vegyület beadása utáni clearance-eket (post-drug clearance) azonnal a 3. clearance után kezdjük vizsgálni. A vegyület beadása utáni teljes megfigyelési idő 1,5 óra. Minden kísérletet 4 állattal végzünk. Az összes vizsgálandó vegyület dózisát a szabad bázis mennyiségére számítva adjuk meg. A fenti módszer szerinti eljárással kapott eredményeket az alábbiakban közöljük. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 4
