187763. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új poliéter-vegyületek előállítására
15 187 763 16 Minden lombikot 38 °C-on gázfelfogó sapkával felszerelt vízfürdőben történő rázatással inkubálunk. A sapkán folyamatosan széndioxidot vezetünk keresztül. 4 órás inkubálás után 10 ml fermentlevet percenkénti 14.000 fordulatszám mellett (kb. 30.000 g) 20 percen át centrifugálunk. A felül elhelyezkedő folyadékból 3 ml-t 1 ml 25 %-os metafoszforsavoldathoz adunk, mely belső standardként 23 mikromól 2-metil-valeriánsavat tartalmaz. A kapott folyadékot szobahőmérsékleten 30 percen át ülepedni hagyjuk. A folyadékot 0,22 millimikronos Milliporc szűrőn átszűrjük és lehűtjük. Az illékony zsírsavtartalmat gáz-folyadék kromatográfiás analízissel határozzuk meg. Négy in vitro kontroll fermentációnál és két fermentációnál (az X-14868A antibiotikum koncentrációja 10 és 25 ppm) kapott gáz-folyadékkromatográfiás analízis (GLC) eredményeit az alábbi táblázatban foglaljuk össze. t VII. táblázat Propionát (C3) móljainak az acélát (C2) és n-bulirát (nC4) móljai összegéhez viszonyított aránya in vitro kérődző bendő fermentációjánál Teszt-vegyület Koncentráció Illékony zsírsavak mólaránya Pozitív C3(C2 + nC4) kTM{‘ %-a Negatív kontroll 0 0,203 51,8 X-14868A 5 ppm 0,323 82,5 50 ppm 0,358 91,2 Pozitív kontroll (Monensin) 50 ppm 0,392 100,0 A VII. táblázatból látható, hogy a propionátnak (C3) az acetát és n-butirát összegéhez viszonyított aránya javul. A propionát növekedésével a szénhidrát-hasznosítás és ezáltal a takarmány-értékesítés javul. Az X-14868A antibiotikum (a továbbiakban „az antibiotikum”) a ketózis megelőzésére és kezelésére alkalmas és a takarmány-hasznosítást javítja. A ketózis óka a propionát-vegyületek termelésének hiánya ill. csökkenése. Ismeretes, hogy ez ellen oly módon védekeznek, hogy a takarmányba propionsavat kevernek, mely a propionát-termelésnek kedvez. Nyilvánvaló, hogy amennyiben a közönséges takarmány a propionát-termelést fokozza, ez a ketózis előfordulását csökkenti. Azt találtuk, hogy az X-14868A antibiotikumot kérődző állatoknak orálisan beadva a takarmányhasznosítás javítható. Előnyösen oly módon járhatunk el, hogy az antibiotikumot az állal takarmányába bekeverjük. Az antibiotikumot azonban más módszerekkel is az állat szervezetébejuttathatjuk. így pl. az antibiotikumot tartalmazó tablettákat, drazsékat, bóluszokat vagy kapszulákat adhatunk be az állatnak. Az antibiotikum formulázását az állatgyógyászatban szokásos és közismert módszerekkel végezhetjük el. A kapszulákat oly módon készíthetjük el, hogy a kívánt antibiotikumot zselatinkapszulákba töltjük. Az antibiotikumot kívánt esetben porított iners hígítóanyaggal (pl. cukor, keményítő vagy tisztitolt kristályos cellulóz) hígíthatjuk a kapszulába töltendő keverék térfogatának növelése céljából. Az antibiotikumot tartalmazó tablettákat szokásos gyógyszeripari eljárásokkal állítjuk elő. A tabletta a hatóanyagon kívül rendszerint valamely tablettaalapanyagot, szétesést elősegítő anyagot, abszorbenst, kögőanyagot és síkosítóanyagot tartalmaz. Tabletta-alapanyagként általában laklózt, finom cukrot, nátrium-kloridot, keményítőt és mannitol akalinazhatunk. Szétesést elősegítő anyagként előnyösen keményítőt, továbbá alginsavat alkalmazhatunk. Felületaktív anyagként előnyösen pl. nátrium-laurilszulfátol vagy dioktil-nátrium-szulfoszukcinálot alkalmazhatunk. Abszorbensként pl. keményítőt, laktózt, míg olajos anyagok esetében magnézium-karbonátot alkalmazhatunk. Kötőanyagként pl. zselatint, gumikat, keményítőt, dextrinf és különböző cellulózszármazékokat alkalmazhatunk. Síkosítóanyagként előnyösen pl. Magnézium-sztearátot, talkumot, paraffin viaszt, különböző fém-szappanokat és polietilénglikolt alkalmazhatunk. Az antibiotikumot 'ovábbá a hatóanyagot lassan leadó bóluszok alakjában is kikészíthetjük. A bóluszok előállítása a tablettákéhoz hasonlóan történik azzal a különbséggel, hogy az antibiotikum kioldásának késleltetéséről gondoskodunk. A bóluszok a hatóanyagot hosszabb idő alatt adják le. A lassú kioldódást oly módon segítjük elő, hogy az antibiotikumot vizben nagyon oldhatatlan formában alkalmazzuk. A bóluszhoz megfelelő anyagot (pl. vasat) adva a sűrűséget növeljük és ezáltal a bólusz a bendőben egy helyben marad. Az antibiotikum kioldódását oly módon is lassíthatjuk, hogy oldhatatlan anyagokból álló matrxot készítünk és a hatóanyagot oldhatatlan anyagokból álló mátrixba ágyazzuk be. E célra pl. növényi viaszokat, tisztított ásványi viaszokat és vízoldhatatlan polimer anyagokat alkalmazhatunk. Folyadékok készítéséhez az antibiotikumot előnyösen vízoldható formában alkalmazzuk. Amennyiben valamilyen okból az antibiotikum oldhatatlan formájára van szükség, fiziológiailag alkalmas oldószert (pl. polietilénglikolt) tartalmazó oldatot készítünk. Az antibiotikum oldhatatlan formáját tartalmazó szuszpenziót oly módon készítjük, hogy az antibiotikumot annak oldására nem alkalmas oldószerben felvesszük. E célra az antibiotikum adott formájától függően növényi olajokat (pl. mogyoró-, kukoricavagy szezámolajat), glikolokat (pl. propilénglikolt vagy polietilénglikolt) vagy vizet alkalmazhatunk. Az antibiotikum szuszpendálását fiziológiai szempontból alkalmas adjuvánsokkal biztosítjuk. E célra sűrítőanyagokat (pl. karboxi-mctil-cellulózt, polivinil-pirrolidont, zselatint és stigmátokat stb.) alkalmazik tunk. Az antibiotikum szuszpendálását felületaktív 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
