187561. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új karbonsav-származékok előállítására
1 187 561 2 A 4-{2-[2-(2-azabiciklo[3.3. l]nonan-2-il)-5-klórbenzoil-amino]-etil}-benzoesav, B 4-{2-[5-fluor-2-(oktahidro-1 H-azonino)benzoil-amino]-etiI}-benzoesav, C 4-{2-[5-klór-2-(cisz-3,5-dimetil-piperidino)nikotinoil-amino]-etil}-benzoesav és D 4-{2-[5-metil-2-(oktahidro-1 H-azonino)benzoil-amino]-etil}-benzoesav, és összehasonlításul E 4-[2-(2-etil-amino-5-klór-benzoil-amino)-etil]benzoesav (837 311 számú belga szabadalmi leírás, 5. példa). Lipidszintet csökkentő hatás szempontjából például a következő vegyületeket vizsgáltuk : F 5-klór-2-[4-(3-pentil)-piperidino]-benzoesav, G 5-bróm-2-(oktahidro-izoindol-2-il)-benzoesav, H 5-klór-2-(2,3,3a,4,7,7a-hexahidro-1 H-izoindol-2-il)-benzoesav és I 5-klór-2-(oktahidro-izoíndoI-2-iI)-nikotinsav. 1. Vércukorcsökkentő hatás A vegyületek vércukorcsökkentő hatását saját tenyésztésű 180-220 g-os hím patkányokon vizsgáltuk, és ezeket a kísérlet kezdete előtt 24 órával koplaltattuk. A vizsgálandó vegyületeket közvetlenül a kísérlet kezdetekor 1,5%-os metil-cellulóz oldatban szuszpendáltuk és nyelőcső szondán adtuk be. A vérvétel közvetlenül a vegyület beadása után, valamint egy, kettő, három és négy órával azután, minden esetben a retroorbitális vénaplexusból történt. A vett vérből 50 p litert 0,5 ml 0,33 n perklórsavval fehérjementesítettünk és centrifugáltunk. A felülúszóból a glükózt hexokináz-módszerrel analitikai fotométer segítségével határoztuk meg. A statisztikus kiértékelést a Student-féle t-teszt alapján p = 0,05 szignifíkációs határral végeztük. A kapott értékeket a következő táblázatban ismertetjük a kontroll százalékában. I. táblázat Ve-25 mg/kg 5 mg/kg gyű- 1 2 3 4 1 2 3 4 let óra óra A-42 -43 -36-32 B-31 -36 -34-34 C-37 -39 -40-38 D E ns. ns. ns. ns.-30 -34 -35-26 ns = statisztikusan nem szignifikáns 2. Lipidcsökkentő hatás Irodalom: P. E. Schurr és munkatársai Atherosclerosis Drug Discovery (1976); Kiadó: C. E. Day; Plenum, New York, 215. oldal. Átlagosan 100 g-os fiatal hím patkányokat négy napos megfelelő táplálékkal (10% kókuszzsír, 1,5% koleszterin, 0,5% kólsav, 0,2% kolinklorid és 15% szacharóz) hiperlipémiássá tettünk. A táplálék fenntartása mellett az állatoknak két egymást követő napon a vizsgálandó vegyületet metil-cellulóz szuszpenzióban nyelőszondán adtuk be. Ezután az állatokat éjszakán át koplaltattuk, a vegyületek utolsó beadása után 4 és 24 órával a szérummeghatározáshoz vért vettünk. A szérumban enzimatikusan meghatároztuk az összkoleszterint (Boehringer Mannheim, 187 313 számú teszt-kombináció) és a triglicerideket (Boehringer Mannheim, 126 039 számú teszt-kombináció). A ß-lipoproteineket kalciumionokkal és heparinnal váló leválasztás után autoanalizátorban nefelometrikusan határoztuk meg. A százalékos csökkenést egy kontroli-csoporthoz képest számítottuk ki. A kapott eredményeket a következő táblázatban ismertetjük. II. táblázat Százalékos változás a kontrolihoz képest kétszeres beadásnál Vegyü- Adag, s^rum-összko- Szérum ß-lipoc 8/8 leszterin proteinek 4 óra 24 óra 4 óra 24 óra F 5- 18-39 20-49-54-54-69 50-54-43-61-57 G 5-28-42 20-37-51-57-66 50-40-47-47-42 H 5-34-36 20-43-61-41-62 50-50-65-54-72 I 5-43-45-47 20-48-50-45-62 50-53-48-60-67 A változások statisztikusan szignifikánsak p = 0,05-nél. 3. Akut toxicitás Saját tenyésztésű 20-26 g-os hím és nőstény egereken határoztuk meg a vegyületek toxikus hatását perorálisan egyszeri adagban beadva (1%-os metilcellulóz oldatban szuszpendálva), és a megfigyelési idő legalább 7 nap volt. A kapott eredményeket a következő táblázatban ismertetjük. III. táblázat Vegyü- 'Tájékoztató toxicitás ç 1000 mg/kg fölött (10 állat közül egy sem pusztult el) P 1000 mg/kg fölött (10 állat közül egy sem pusztult el) Farmakológiai tulajdonságaik alapján a találmány szerint előállított I általános képletű vegyüle-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
