187417. lajstromszámú szabadalom • Eljárás spergualin-származékok előállítása sóik formájában
1 187 417 2 mossuk. Az etil-acetátos fázist vízmentes nátriumszulfát fölött szárítjuk, majd szárazra pároljuk és 20 g Wakogel C-200 márkanevű szilikagélből álló oszlopon kromatografálásnak vetjük alá, eluálószerként toluol és etil-acetát 1 :2 térfogatarányú elegyét használva és 3 ml-es frakciókat szedve. A 14-21. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk, 109 mg (79%) mennyiségben színtelen szirup formájában N-[4-(3-terc-butoxi-karbonil-amino-propil)-4-terc-butoxi-karbonil-aminobutil]-2,2-dietoxi-etánsavamidot kapva. Az előző bekezdés szerinti vegyületből 44 mg (0,13 millimól) 1 ml dioxánnal készült oldatához hozzáadunk 2,5 ml 0,1 n sósavoldatot, majd az ágy kapott reakcióelegyet olajfürdőben 100 °C-on 4 órán át melegítjük. Ezt követően a reakcióelegyet 0,2 n vizes nátrium-hidroxid-oldattal pH 6-ra semlegesítjük, majd szárazra pároljuk. A maradékot 1,5 ml metanollal extraháljuk, majd a kapott metanolos oldatot 16,5 mm belső átmérőjű és 100 ml Sephadex LH-20 márkanevű gyantával töltött oszlopon kromatografáljuk, metanollal eluálva és 2 ml-es frakciókat szedve. A 22-25. számú frakciókat - amelyek ninhidrin-pozitívak - összeöntjük, majd szárazra pároljuk, 13 mg (46%) mennyiségben a lépés és egyben a példa címadó vegyületét kapva színtelen szirup formájában. A termék dihidrokloridsó. 1. példa N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(4-guanidino-butánsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid (1. vegyület) előállítása 360 mg (2 millimól) 4-guanidino-butánsavamidhidroklorid, 701 mg (2,4 millimól) N-[4-(3-aminopropil)-amino-butil]-2,2-dihidroxi-etánsavamiddihidroklorid, 264 mg (2 millimól) glutársav és 0,36 ml víz keverékét 60 °C-on melegítjük 24 órán át. A reakció befejeződését követően a reakcióelegyhez 5 ml vizet adunk, majd átbocsátjuk 20 mm belső átmérőjű és 150 ml CM-Sephadex C-25 (Natipusú) márkanevű gyantával töltött oszlopon. Az oszlopot 1,5 1 víz és 1,5 1 0,8 mólos vizes nátriumklorid-oldat elegyével gradiens-eluálásnak vetjük alá, 15 ml-es frakciókat szedve. A 0,48-0,56 mól nátrium-klorid-koncentrációknak megfelelő 125-137. számú frakciókat összeöntjük, majd bepároljuk és a maradékot 10-10 ml metanollal háromszor extraháljuk. Az egyesített metanolos extraktumot 20 mm belső átmérőjű és 150 ml Sephadex LH-20 márkanevű gyantával töltött oszlopon átbocsátjuk, metanollal elüálva és 7 ml-es frakciókat szedve. A 9-15. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároluk, 318 mg (35%) mennyiségben fehér por formájában a cím szerinti vegyületet kapva trihídrokloridsóként. 2. példa N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(5-guanidino-pentánsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid (2. vegyület) előállítása 92,4 mg (0,48 millimól) 5-guanidino-pentánsavamid-hidroklorid, 166,5 mg (0,57 millimól) N-[4-(3- amino-propil)-amino-butil]-2,2-dihidroxi-etánsavamid-dihidroklorid, 62,8 mg (0,48 millimól) glutársav és 0,1 ml víz keverékét 60 °C-on melegítjük 24 órán át. A reakció befejezése után a reakcióelegyhez 5 ml vizet adunk, majd a reakcióelegyet az 1. példában ismertetett módszerhez hasonló módon tisztítjuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így 82,5 mg (37,1%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként. 3. példa N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(6-guanidino-hexánsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid -(3. vegyület) előállítása 446 mg (2,14 millimól) 6-guanidino-hexánsavamid-hidroklorid, 750 mg (2,57 millimól) N-[4-(3- arrino-propil)-amino-butil]-2,2-dihidroxi-etánsavamid-dihidroklorid, 283 mg (2,14 millimól) glutársav és 0,45 ml víz keverékét 60 °C-on 24 órán át melegítjük. A reakció befejeződése után a reakcióelegyhez 5 ml vizet adunk, majd az így kapott elegye! az 1. példában ismertetett módszerhez hasonló módon tisztítjuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így 459 mg (44%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsőként. 4. példa N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidino-heptánsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid (4. vegyület) előállítása 360 mg (1,62 millimól) 7-guanidino-heptánsavamid-hidroklorid, 568 mg (1,94 millimól) N-[4-(3- ammo-propil)-amino-butil]-2,2-dihidroxi-etánsavamid-dihidroklorid, 214 mg (1,62 millimól) glutársav és 0,36 ml víz keverékét 60°C-on 24 órán át melegítjük. A reakció befejeződése után a reakcióelegyhez 5 ml vizet adunk, majd az így kapott elegyet az 1. példában ismertetett módszerhez hasonló módon tisztítjuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így 317 mg (39%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként. 5. példa N-[4-(Amino-propil)-amino-butil]-2-(8-guanidino-oktánsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid (5. vegyület) előállítása 500 mg (2,11 millimól) 8-guanidino-oktánsavamid-hidroklorid, 740 mg (2,53 millimól) N-[4-(3- amino-propil)-amino-butil]-2,2-dihidroxi-etánsavamid-dihidroklorid, 335 mg (2,53 millimól) glutársav és 0,34 ml víz keverékét 60 °C-on 24 órán át melegítjük. A reakció befejeződése után 5 ml vizet 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 19
