187417. lajstromszámú szabadalom • Eljárás spergualin-származékok előállítása sóik formájában
1 187417 2 adunk a reakcióelegyhez, majd az így kapott elegyet az 1. példában ismertetett módszerhez hasonló módon tisztítjuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használ va. így 526 mg (49%) mennyiségben fehér por alak jában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidroklo ridsóként. 6. példa \ N-[4-(3-Amino-propil)-amino-buiil]-2-(9-guanidino-nonánsavamido)-2-hidroxi-etánsavamid (6 vegyület) előállítása 316 mg (1,26 millimól) 9-guanidino-nonánsavamid-hidroklorid, 442 mg (1,51 millimól) N-[4-(3 amino-propil)-amino-butil]-2,2-dihidroxi-etánsavamid-dihidroklorid, 166 mg (1,26 millimól) glutársav és 0,01 ml víz keverékét 60°C-on 24 órán át keverjük, majd a reakció befejeződése után 5 ml vizet adunk hozzá. Az így kapott elegyet ezután az 1. példában ismertetett módszerhez hasonló modor tisztítjuk, CH-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 márkanevű gyantákat használva. így 324 mg (49%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként. 7. példa \ N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(4-guanidino-butánsavamido)-2-metoxi-etánsavamid (7. vegyület) előállítása 45,5 mg (0,1 millimól) N-[4-(3-amino-propil)amino-butil]-2-(4-guanidino-butánsavamido)-2- hidroxi-etánsavamid-trihidroklorid 1 ml vízmentes metanollal készült oldatához 0,1 ml metanolos 2 n sósavoldatot adunk, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 17 órán át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, majd a maradékot 3 ml vízben feloldjuk. A kapott vizes oldatot 20 mm belső átmérőjű és 150 ml CM-Sephadex C-25 márkanevű gyantával töltött oszlopon átbocsátjuk. Az oszlopot egy liter 1 mólos nátrium-klorid-oldattal és egy liter vízzel gradiens-eluálásnak vetjük alá, 17 ml-es frakciókat szedve. A 67-71. számú frakciókat összeöntjük (ezek 0,63-0,67 mól nátrium-klorid-koncentrációnak felelnek meg), majd szárazra pároljuk és a kapott maradékot 5-5 ml metanollal háromszor extraháljuk. Az egyesített metanolos extraktumot 20 mm belső átmérőjű és 150 ml Sephadex LH-20 márkanevű gyantával töltött oszlopon átbocsátjuk, az oszlopot metanollal eluálva és 7 ml-es frakciókat szedve. A 10-14. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk, 31,4 mg (67%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapva trihidrokloridsóként. 8. példa N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(6-guanidino-hexánsavamido)-2-metoxi-etánsavamid (8. vegyület) előállítása 177 mg (0,37 millimól) N-[4-(3-amino-propil)amino-butil]-2-(6-guanidino-hexánsavamido)-2- hidroxi-etánsavamicl-trihidroklorid 3,6 ml vízmentes metanollal készült oldatához hozzáadunk 0,36 ml 2n metanolos sósavoldatot, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 17 órán át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, majd a kapott fehér port a 7. példában ismertetett módszerhez hasonló módon tisztítjuk, CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) és Sephadex LH-20 gyantákat használva. így 110 mg (60%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként. 9. példa N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(7-guanidino-heptánsavamido)-2-metoxi-etánsavamid (9. vegyület) élőállítása 920 mg (1,85 millimól) N-[4-(3-amino-propil)amino-butil]-2-(7-guanidino-heptánsavamido)-2- hidroxi-etánsavamid-trihidroklorid 20 ml vízmentes metanollal készült oldatához hozzáadunk 2 ml 2 n metanolos sósav oldatot, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 15 órán át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, majd a kapott fehér port 15 ml vízben feloldjuk. Az így kapott vizes oldat pH-értékét 1 n vizes nátrium-hidroxid-oldattal 6-ra beállítjuk, majd az oldatot 25 mm belső átmérőjű és 300 ml CM-Sephadex C-25 (Na-típusú) márkanevű gyantával töltött oszlopon átbocsátjuk. Az oszlopot ezután 2 liter vízzel és 2 liter 1 mólos vizes-nátrium-klorid-oldattal gradiens-eluálásnak vetjük alá, 17 ml-es frakciókat szedve. A 0,59-0,65 mól nátrium-klorid-koncentrációknak megfelelő 138-152. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk és a maradékot 10-10 ml metanollal kétszer extraháljuk. Az így kapott extraktumot egyesítése után 25 mm belső átmérőjű és 300 ml Sephadex LH-20 márkanevű gyantával töltött oszlopon átbocsátjuk, az eluálást metanollaj végezve és 7 ml-es frakciókat szedve. A 18-32. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk, 607 mg (64%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapva trihidrokloridsóként. W. példa N-[4-(3-Amino-propil)-amino-butil]-2-(8-guanidino-oktánsavamido)-2-metoxi-etánsavamid (10. vegyület) előállítása 220 mg (0,43 millimól) N-[4-(3-amino-propil)amino-butil]-2-(8-guanidino-oktánsavamido)-2- hidroxi-etánsavamid-rrihidroklorid 4,4 ml vízmentes metanollal készült oldatához 0,44 ml 2 n metanolos sósavoldatot adunk, majd az így kapott reak-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 20
