187417. lajstromszámú szabadalom • Eljárás spergualin-származékok előállítása sóik formájában
1 , 187 417 2 b) lépés: (S)-7-guanidino-3-hidroxi-heptánsavamid előállítása 30 ml 10:10:1 térfogatarányú piridin-víz-trietil-amin elegyhez - amely az a) lépésben ismertetett módon előállított (S)-3,7-diamino-heptánsavból 3,1 g-ot (19,3 millimól) tartalmaz - lassan 4,81 g (19,3 millimól) N-(benziloxi-karboniloxi)szukcinimidet adunk, majd az így kapott elegyet szobahőmérsékleten 5 órán át keverjük. Ezt követően szárazra pároljuk, majd 30 ml vízben oldjuk és a kapott vizes oldat pH-értékét 6 n sósavoldattal 6,4-re beállítjuk. Ezután az oldatot 16 mm belső átmérőjű és 100 ml Amberlite CG-50 (80% NH4- típusú) márkanevű gyantával töltött oszlopon átbocsátjuk. Az oszlop eluálását 300 ml vízzel végezzük. Az összegyűjtött eluátumot 16 mm belső átmérőjű és 100 ml Dowex 50W-X4 (H-típusú) márkanevű gyantával töltött oszlopon bocsátjuk át. Az utóbbi oszlopot egymás után 300 ml vízzel és 300 ml 0,2 mólos vizes ammónium-hidroxid-oldattal eluáljuk, 10 ml-es frakciókat szedve. A 16-33. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk, 2,73 g (48%) mennyiségben 143-147 °C olvadáspontú (bomlik) fehér por formájában (S)-3- amino-7-(benziloxi-karbonil-amino)-heptánsavat (C15H22N204 • H20) kapva. Fajlagos forgatóképessége (a]p = + 14° (c= 1, metanol). Az Amberlite CG-50 márkanevű gyantával töltött oszlopot 0,5 n vizes ammónium-hidroxid-oldattal eluálva 746 mg (24%) (S)-3,7-diamino-heptánsavat nyerhetünk Jeges hűtés közben 2,7 g (9,17 millimól) (S)-3-amino-7-(benziloxi-karbonil-amino)-heptánsav 33%-os vizes ecetsav-oldattal készült oldatához 1 óra leforgása alatt cseppenként hozzáadjuk 1,9 g (27,51 millimól) nátrium-nitrit 10 ml vízzel készült oldatát. Az így kapott reakcióelegyet 1 órán át keverjük, majd 5 °C-on 24 órán át állni hagyjuk. 50 ml víz adagolását követően a reakcióelegyet 50-50 ml ctil-acetáttal kétszer extraháljuk, majd az egyesített extraktumot vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk és szárazra pároljuk. így 2,16 g mennyiségben por alakú nyers terméket kapunk. Ezt azután 28 mm belső átmérőjű és 200 g Wakogel C-200 márkanevű gyantával töltött oszlopon kromatografálásnak vetjük alá, eluálószerként klproform, metanol és tömény vizes ammónium-hidroxidoldat 30 : 10 : 1 térfogatarányú elegyét használva és 20 ml-es frakciókat szedve. Az 51-60. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk, 460 mg (17%) mennyiségben 115-117 °C olvadáspontú (bomlik) fehér por formájában (S)-7-(benziloxikarbonil-amino)-3-hidroxi-heptánsavat kapva. Fajlagos forgatóképessége [a]“ = +3° (c=2, metanol). Jeges hűtés közben 450 ml (1,52 millimól) (S)-7- (benziloxi-karbonil-amino)-3-hidroxi-heptánsavoldathoz (1,2-dimetoxi-etánnal készült) hozzáadunk cseppenként 7 ml (4,56 millimól) dietiléteres diazo-metán-oldatot, majd az így kapott reakcióelegyet 30 percen át keverjük és ezután száraz[aß = + r.-10°C-on 450 mg (1,45 millimól) (S)-7- (benziloxi-karbonil-amino)-3-hidroxi-heptánsavmetilészter 50 ml vízmentes metanollal készült oldatát gázalakú ammóniával telítjük, majd lezárt edényben szobahőmérsékleten 3 napon át állni hagyjuk. Ezt követően a reakcióelegyet szárazra pároljuk, majd a maradékot 20 mm belső átmérőjű és 50 g Wakogel C-200 márkanevű szilikagélt tartalmazó oszlopon kromatografálásnak vetjük alá, az eluálást kloroform és metanol 100 : 9 : 1 térfogatarányú elegyével végezve és 10 ml-es frakcióké t szedve. A 82-106. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk. így 371 mg (87%) mennyiségben 126-127 °C olvadáspontú (bomlik) fe'rér por alakjában (S)-7-(benziloxi-karboftilanino)-3-hidroxi-heptánsavamidot kapunk. Fajlagos forgatóképessége [a]p= —3° (c = 5, metanol). 10 ml 90%-os vizes metanol és 0,01 ml ecetsav elegyében feloldunk 350 mg (1,19 millimól) (S)-7- (benziloxi-karbonil-amino)-3-hidroxi-heptánsavanidot majd a kapott oldathoz 50 mg 5% fémtarta’mú szénhordozós palládiumkatalizátort adunk és az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten hi Jrogéngáz-áramban 3 órán át keverjük. A katalizátor szűrés útján végzett eltávolítását követően a szűrletet bepároljuk, majd a maradékot kis térfogatmennyiségű vízben újraoldjuk és 12 mm belső átmérőjű, 30 ml Dowex 50W-X4 (H-típus) márkanevű gyantát tartalmazó oszlopon átbocsájtjuk. Az oszlopot 90 ml vízzel mossuk, majd 0,5 mólos vizes ammónium-hidroxid-oldattal eluáljuk, 3 ml-es frakciókat szedve. A 2'8-34. számú frakciókat öszszeöntjük, majd szárazra pároljuk, 201 mg (96%) mennyiségben (S)-7-amino-3-hidroxi-heptánsavamidot kapva. Fajlagos forgatóképessége [a'o = - 2° (c = 2, víz). 190 mg (1,08 millimól) (S)-7-amino-3-hidroxiheptánsavamid 3 ml vízzel készült oldatához 0,54 ml 2 n vizes nátrium-hidroxid-oldatot, majd jeges hűtés közben 30 perc leforgása alatt cseppenkéat 1 ml olyan metanolos oldatot adunk, amely 129 mg (1,08 millimól) 2-metil-l-nitrozó-karbamidot tartalmaz. Az így kapott reakcióelegyet 5 órán át keverjük, majd pH-értékét 6 n sósavoldattal 6,0- ra beállítjuk. Ezt követően a reakcióelegyet szárazra pároljuk, majd a maradékot 15 mm belső átmérőjű, 30 g Wakogel C-200 márkanevű szilikagélt tartalmazó oszlopon kromatográfiásan tisztítjuk, eluálószerként kloroform, metanol és tömény vizes ammónium-hidroxid-oldat 60 : 10 : 1 térfogatarányú elegyét használva és 6 ml-es frakciókat szedve. A 67-90. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk, 187 mg (70%) mennyiségben 148-149 °C olvadáspontú (bomlik) fehér por alakjában (S)-7-(nitro-guanidino)- 3-hidroxi-heptánsavamidot kapva. Fajlagos forgatóképessége [a] j = -2° (c = 2, metanol). 5 ml víz, 15 ml metanol és 7,5 ml ecetsav elegyében feloldunk 170 mg (0,69 millimól) (S)-7-(nitro ra pároljuk. így 461 mg (98%) mennyiségben (S)-7-(benziloxi-karbonil-amino)-3-hidroxi-heptánsav* metilésztert kapunk. Fajlagos forgatóképessége 15 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
