187296. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 2-(8-aciloxi-2,6-dimetil-polihidroxi-naftil-1)-etán-származékok előállítására
1 187.296 2 toltuk, majd a szűrletet szárazra párolva olajat Zabliszt 10 g kaptunk. A cisz- és transz-izomereket szilikagél-Cerelóz 10 g lapokon végzett preparativ vékonyrétegkromatogNyomelem-keverék 10 ml ráfiás eljárással szétválasztottuk (10% etil-acetát -5 Desztillált víz 1000 ml éter rendszer; sávok detektálása vizes permetezéspH 6,8 sel). A (III,) képletű vegyület (Q = (15) képletű csoport) transz-izomerje tűnt polárosabb foltnak Nyomelem-keverék: (a cisz-izomerhez képest). 60 mg transz-izomert FeS04 • 7H20 1 g különítettünk el. 10 MnS04 • 4H20 1 g Tömegspektrum: (M/e) CuClj 2H20 25 mg 408 (m+) CaCl2 100 mg 323 (m-85) H3 BO3 56 mg 306 (m- 102) (NH4 )6Mo7024 • 4H20 19 mg NMR-spektrum: (CDCl3-ban, 300 MHz) 15 ZnS04 • 7H20 200 mg 64,36 (széles szingulett, 1H) Desztillált víz 1000 ml 4,59 (m, 1H) 5,19 (triplett dublettje, J = 2,5 Hz, 1H) LM malátaextraktum nélküli tenyészközeg: Dextróz 20 g 20 Glicerin 20 ml Ardamine pH 10 g A (IIId) képletű vegyület (Q = (15) képletű CoCl2 • 6H20 8 g csoport) 6-dezmetil-analógjának előállítása Poliglikol p 2000 0,25 % fermentációval Desztillált víz 1000 ml A) Fermentáció 25 pH 7,0 Élesztő-maláta extraktum (YME) előállításához Penicillium citrinum (NRRL 8082) természetes izoiátumát használtuk fel. Az extraktumot 2 héten át inkubáltuk 28 °C-on. Az extraktum egy-egy hányadával (1/5-öd részeivel) beoltottuk az öt nyitott 250 ml-es oltólombikot, amelyek 44 ml KF oltóközeget tartalmaztak CaCl2-dal. A lombikokat 3 napig inkubáltuk 28 °C-on és 220 fordulat/perc mellett. Mind a 100 darab, egyenként 40 ml LM malátaextraktum nélküli tenyészközeget tartalmazó lombikba (nyitott, 250 ml-es) mintegy 1,5 ml oltóanyagot adtunk. A tenyészlombikokat 4 napig inkubáltuk 25 °C-on. A tenyészközeget tartalmazó lombikok egy másik csoportját (140) - amelyek egyenként 40 ml LM módosítás nélküli tenyészközeget tartalmaztak - a fenti módon és körülmények között beoltottuk és inkubáltuk. Mindkét fermentáció táptalajait egyesítettük. A% említett fermentációkban az alábbi közegeket alkalmaztuk: YME: Dextróz MalátaextfBktum Élesztőextraktum Agár Desztillált víz pH 4 g/I 10 g/1 4g/l 20 g/1 1 literhez szükséges mennyiségben 7,0 KF oltóközeg CaCh-dal: CaCIj 10 g Kukoricaáztatási lé S g Paradicsompaszta 40 g LM módosítás nélküli tenyészközeg: Dextróz 20 g Glicerin 20 ml Ardamine pH 10 g Malátaextraktum 20 g CoCl2 • 6H20 8 mg Poliglikol p 2000 0,25% Desztillált víz 1000 ml pH 7,0 B) Elkülönítés .q Az egyesített táptalajokat (10,3 liter) szúrtuk, majd a micéliumpogácsát 2,5 liter ionmentesitett vízzel mostuk. Az egyesitett szűrtetek és mosófolyadékok pH-ját 1 n sósavval 4,0-ra állítottuk be. A vizes oldatot 7 liter etil-acetáttal extraháltuk, és . _ az extraktumokat 3x2 liter vizes nátrium-hidroxid- 45 -oldattal visszaextraháltuk. Az egyesített nátriumhidroxidos extraktum pH-ját 1 n sósavval beállítottuk 3,8-re, majd 2 liter, majd 1 liter etil-acetáttal extraháltuk. Az egyesített etil-acetátos oldatokat vízmentes nátrium-szulfát felett szárítottuk, szűrsz tűk, majd szárazra pároltuk. Az olajos maradékot feloldottuk toluolban, majd egy órán át forraltuk visszafolyató hűtő alatt. A toluolos oldatot szárazra pároltuk, és a maradékot feloldottuk 18 ml n-hexán/toluol/metanol elegyben (4:1:1 térfogatarányú 55 elegy). Ezt az oldatot rávittük egy 30 mm-es belső átmérőjű, 40 cm hosszú, ugyanezzel az oldószereleggyel ekvilibrált Sephadex 1H-20 oszlopra. 300 , ml oldószerrel végzett eluálás után egy 10 ml-es frakciót kaptunk, amelyet olajjá pároltunk be. ES 60 Industries ChromegaR oszlopon (9 mm * 50 cm) 5
