187295. lajstromszámú szabadalom • Eljárás imidazolin-származékok és a származékokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 187.295 2 Vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat aluminiumoxid- kloroform Rf 0,5 0,6 8zilíciumdioxid- kloroform:me-0,1 0,3 tanol 4:1 Rr szilíciumdioxid- kloroform:me-0,2 0,4 tanol 1:1 Rf aluminiumoxid- kloroform :me-0,3 0,5 tanol 1:4 Rf Az NMR adatokkal kapcsolatban az 1. példa terméke kétféle multiplettet mutat x4,4 (1 proton) és T 5,4 (2 proton) régióban és ez a (IV) képletű vegyület dioxán-gyürűjére jellemző. (A fenti (VI) képletű ciáno-vegyület hasonló multipletteket mu- 15 tat a t 5,1 régióban (1 proton) és a t 5,7 régióban (2 proton)). Ezzel szemben a 2. példa termékeinek Színképe 3 proton szingulettet mutat t 7,85-nél, ez ti (III) képletű vegyület metil-csoportjára jellemző^ Is mivel a t 4,0-6,0 régiókban semmilyen jelnem 20 mutatkozik, ez a dioxán-gyűrű hiányára vall. Az 1. példa hidroklorid-termékének gyógyászati aktivitását meghatároztuk. Az alábbi táblázatokban ezt a vegyületet „A”-nak nevezzük, még a 2. példa szerinti izomer-vegyületet „B”-vel jelöljük. 25 1. Pre- és posztszinaptikus a-adrenoreceptorantagonizmus izolált szövetkísérletekben. A preszinaptikus a2-adrenoreceptor-antagonizmus biológiai értékelését úgy végeztük, hogy meghatároztuk a pA2 értékeket a jól ismert preszinapti- 30 kus a-adrenoreceptor-agonista, a klonidin gátló hatásával összevetve, 0,1 Hz frekvenciával stimulált patkány vas deferens-en mérve, Doxey, J. C., Smith, C. F. C., és Walker, J. M., Br. J. Pharmac., 1977, 60, 91. módszere alapján. 35 Ez az in vitro modell különösen hasznos a preszinaptikus hatás kezdeti szkrinelésére, mert a vas deferens szövet olyan, hogy a benne elhelyezkedő posztszinaptikus receptorok különösen nehezen 40 hozzáférhetők külső szerek számára. Ennek megfelelően egy másik szövetet, a patkány anococcygeus izmot használjuk a posztszinaptikus a-adrenoreceptor hatás megállapítására. A noradrenalin öszszehúzódások antagonizmusát használjuk a posztszinaptikus a-adrenoreceptorok pA2 értékének 45 meghatározására. Az adrenoreceptor szelektivitás kimutatására a preszinaptikus a-adrenoreceptorantagonizmus (a clonidin patkány vas deferensen mutatott hatásával összevetve) és a posztszinaptikus a-adrenoreceptor-antagonizmus (a patkány 5® anococcygeus izmon mutatott noradrenalin összehúzódásokkal összevetve) arányát használjuk. Az A és B vegyületek pA2 értékét az 1. táblázat mutatja. Az 1. táblázat értékeket tartalmaz négy standard gyógyszerre vonatkozólag is: i) nem-szelektív a-ad- 55 renoreceptor-antagonista, phentolamin, ii) szelektív preszinaptikus antagonista, yohimbin, iii) igen szelektív posztszinaptikus antagonista, prazosin és iv) antidepresszáns, mianserin, amely farmakológiái profilja részeként nem-szelektív pre- és poszt- 60 szinaptikus adrenoreceptor-antagonista tulajdon' Ságokat mutat. Vegyüld Preszinapti. kus antagonizmus pAj vs Clonidin (vas deferens) ______ I. táblázat Posztszinaptikus antagonizmus Prefposztszi-pAj vs Noradrenalin (anococcygenaptikus arány A 8,5 6,2 225 B 6,2 <4,4 > 67 Phentolamin 8,4 7,7 4,8 Yohimbin 8,2 6,4 60 Prazosin <6,6 8,2 < 0,03 Mianserin 7,3 6,6 5,0 („ < ” azt jelenti, hogy hatástalan annál a koncentrációnál, amely a megjelölt pA2 értéket adná). Az eredmények legalább öt kísérlet átlagát mutatják. Az 1. táblázat azt mutatja, hogy a tanulmányozott vegyületek közül az A vegyület a legpotenciálisabb preszinaptikus a-adrenoreceptor-antagonista és a legszelektívebb a preszinaptikus helyeken. Az A vegyület kétszázszor hatátosabb, mint a B vegyület, mint preszinaptikus antagonista. 2. Preszinaptikus a-adrenoreceptor-antagonizmus a gerincvelő megsértésével leölt patkányon 1. Patkány vas deferens-intravénás hatás Ez a teszt-modell a preszinaptikus a-adrenoreceptor-antagonizmus kiértékelésére alkalmas, in vivo, a clonidin „patkány vas deferens”-re gyakorolt hatásával összevetve. A gerincvelő megsértésével leölt patkányon a vérnyomást és a vas deferens stimulálással gerjesztett összehúzódásait Brown, J., Doxey, J. C., Handley, S. és Virdee, N. (Recent Advances in the Pharmacology of Adrenoreceptors, Elsevier North Holland, 1978.) módszerével figyeltük meg. 100 pg/kg intravénásán adagolt clonidin tartós vémyomásfokozó reakciót és a „vas deferens”-összehúzódások tartós gátlását idézi elő. A teszt-gyógyszereket intravénásán fecskendeztük be kumulatív dózisterv szerint; a vegyületek képesek a gyomor alatti idegstimulálás gátlását megfordítani és ez preszinaptikus antagonizmusra vall. A 2. táblázat az antagonisták azon dózisait mutatja, amelyek a gyomor alatti idegingerlés gátlását 50%-osan fordítják vissza. 5
