187258. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vérnyomáscsökkentő hatású vegyületek előállítására
21 187258 22 maradékot megoszlésos oszlop-kromatográfiás módszerrel (Sephadex G-25tB, oszlopméret: 1,2 x 99 cm, eluens: n-butanol, ecetsav és víz 4:1:5 térfogatarányú elegye) tisztítjuk. A terméket pH = 5,0-nél elektroforetikus úton vizsgálva, valamint az 1., 2. és 3. számú futtatóelegyben vékonyrétegen kromatografálva egységesnek mutatkozik. Rfi = 0,43, Rfí = 0,63, Rn = 0,48 74. példa Lényegében a 71. példában leírt módon eljárva, de piro-L-glutaminsav helyett N^N*"-bisz-tercier-butoxi-karbonil-L-lizint (a továbbiakban: bisz-Boc-L-Lys), vagy N^.N^N*--trisz-adamantiloxi-karbonil-L-arginint (a továbbiakban: trisz-Adoc-L-arginin) használva állítjuk elő az L-Phe-benzil-észter megfelelő bisz-Boc-L-lizil-, illetve trisz-Adoc-L-arginil-származékát. A bisz-Boc-L-Lys a kereskedelemben kapható. A trisz-Adoc-L-arginint Jager, G. és Geiger, R. [Chem. Ber. 103, 1727 (1970)] módszerével állítjuk elő. 75. példa A 71. és 74. példában leírt módon eljárva és a glicin, alanin, triptofán, tirozin, izoleucin, leucin, hisztidin vagy valin benzil-észteréből kiindulva állítjuk elő a megfelelő piro-L-glutarail-, bisz-Boc-L-lizil- és trisz-Adoc-L-arginil-származékokat. Ezután a benzil-észter-csoportokat lényegében a 72. példában leirt módon hasítjuk le. 76. példa Lényegében a 73. példában leirt módon eljárva, a 72., 74. és 75. példákban leírt módon nyert vegyületeket a 3-12. példákban leirt módon nyert vegyületek bármelyikével reagáltatva állítjuk elő a megfelelő bisz-Boc-L-lizil- és trisz-Adoc-L-arginil-származékokat. A tercier-butoxi-karbonil- és adamantiloxi-karbonil-védócsoportokat anizolban trifluor-ecetsavval hasítjuk le. Lényegében a 2-12. és 71-76. példákban leírt módszereket és eljárásokat követve állítjuk elő az I általános képletű, ahol R L-arginil-, L-lizil- vagy piro-L-glutamil-csoport; A jelentése L-fenil-alanil-, glicil-, L-alanil-, L-triptofil-, L-tirozil-, L-izoleucil-, L-leucil-, L-hisztidil- vagy L-valil-csoport, ezen csoportok oc-amino-csoportja amidkötéssel kapcsolódik az R csoporthoz; Rí jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport; R2 jelentése L-prolin, L-3,4-dehidro-prolin, D,L-3,4-dehidro-prolin, L-3-hidroxi-pro-lin, L-4-hidroxi-prolin vagy L-tiazolidin, amelynek iminocsoportja imidkótéssel kapcsolódik a karbonilcsoporthoz; és n jelentése 0 vagy 1, azzal a megkötéssel, hogy ha n jelentése 0, akkor Rí jelentése metilcsoport, vegyületeket. 77. példa N-[3-(lT'-Benzoil-L-triptofil-merkapto)-2--D-metil-propionil]-L-prolin 62 mg N° -benzoil-L-triptofán 0,5 ml kétszer desztillált dimetil-formamiddal készült oldatához -20 °C hőmérsékleten hozzáadjuk 35 mg l,l’-karbonil-diimidazol 1,0 ml dimetil-formamiddal készült, lehűtött oldatát, és az elegyet 2 órán ét -10 °C hőmérsékleten keverjük. Utána hozzáadjuk 48 mg N-(3-merkapto-2-D-metil-propionil)-L-prolin 1 ml dimetil-formamiddal készült N-etil-morfolinnal semlegesített, lehűtött oldatát. A reakcióelegyet további 1 órán át -10 °C hőmérsékleten keverjük, majd hagyjuk lassan szobahőmérsékletre melegedni. Utána az oldószert csökkentett nyomáson 40 °C hőmérsékleten ledesztilláljuk, és a maradékot feloldjuk etil-acetátban. Az oldatot lehűtjük, 0,1 normál sósav-oldattal, majd telitett nátrium-klorid-oldattal háromszor mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A terméket folyadék-kromatográfiás módszerrel (Sephadex LH-201*, oszlopméret: 1,2 x 95 cm, eluens: izopropanol) tisztítjuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, és az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. Ily módon habos anyag formájában 60,5 mg cím szerinti vegyületet nyerünk. Ez a termék az 1., 2., 3. és 5. számú futtatóelegyben vékonyrétegen kromatografálva egységesnek mutatkozik. Rs = 0,70, Rf3 = 0,68, Rh = 0,59, Rf (etil— -acetát-butanol-acetsav-viz 1 : 1 : 1 : 1) = = 0,74 78-85. példa Lényegében a 77. példában leírt módon eljárva, de N"'-benzoil-L-triptofán helyett N-benzoil-L-tirozint, iT'-benzoil-L-hisztidint, N-benzoil-L-fenil-alanint, N-benzoil-glicint, N-benzoil-L-alanint, N-benzoil-L-izoleucint, N-benzoil-leucint vagy N-benzoil-L-valint használva állítjuk elő a következő vegyületeket: Példa Vegyület száma 78. N-[3-(N-benzoil-L-tirozil-merkapto)-2- -D-metil-propionil]-L-prolin 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 GO G5 12
