187103. lajstromszámú szabadalom • Eljárás adalék előállítására tumorellenes szerekhez
A találmány tárgya eljárás a mitomicin C és a doxorubicin-hidroklorid hatását kiegészítő adalék előállítására. Pontosabban, a találmány tárgya a mitomicin C és a doxorubicin-hidroklorid daganatellenes aktivitását növelő és mellékhatásaikat csökkentő adalék (adminiculum) előállítása, melynek hatékony komponense a következő gyógynövények vizes vagy vizes-szerves oldószeres kivonata: Astragalus gyökér, Cinnamomum kéreg, Rehmannia gyökér, Paeonia gyökér, Cnidium győkértörzs, Atractylodes lanceae győkértörzs, Angelica gyökér, Ginseng gyökér, Poria cocos kéregtelenítétt szár és Glycyrrhiza gyökér. A mitomicin C-melynek képlete C, 5H1SN405 -, kékesibolya színű kristályokból vagy kristályos porból áll. A daganatsejtek DNS-ével kombinálódva a DNS lebomlását okozza, továbbá gátolja a DNS szintézisét, és ezáltal a daganatsejtek osztódását [Shibata, S. és munkatársai: Biken’s J., 1, 193. (1958); Szybalski, W. és munkatársai: Proc. Nat. Acad. Sei., 50, 355. (1963)]. A doxorubicin-hidroklorid - melynek képlete C^H^NOn • HC1 -, narancspiros színű kristályos por, mely gátolja a daganat-, illetve a sejt-DNS szintézisének útját, és a daganatsejtek osztódását. Főképpen az RNS-polimerázt gátolja, a DNS-sel történő kombinálódása révén (Tatsumi, K. és munkatársai: GANN, 65, 237, (1974)]/ Közismert, hogy a mitomicin C és a Doxorubicin-hidroklorid erősen daganatellenes aktivitásúak, azonban klinikai alkalmazásuk korlátozott, súlyos mellékhatásaik - leukopenia és thrombocytopenia - miatt. Megállapítottuk, hogy az Astragalus membranaceus Bunge (Leguminosae) gyökér, Cinnamomum cassia Blume (Lauraceae) kéreg, Rehmannia glutinosa Liboschitz var. purpurea Makino (Scrophulariaceae) gyökér, Paeonia lactiflora Pallas (Paeonia albiflora Pallas var. trichocarpa Bunge) (Paeoniaceae) gyökér, Cnidium officinale Makino (Umbelliferae) gyökértörzs, Atractylodes lancea De Candolle (Compositae) gyökértörzs, Angelica acutiloba Kitagawa (Umbélliferae) gyökér, Panax ginseng C. A. Meyer (Araliaceae) gyökér, Poria cocos Wolf (Pachyma holen Rumph) (Polyporaceae) kéregtelenített szár (Hoelen) és Glycyrrhiza glabra Linné var. glandulifera Regel et Herder vagy Glycyrrhiza uralensis Fischer (Leguminosae) gyökér vizes vagy vizes-savas oldószeres kivonata serkenti a mitomicin C, illetve a doxorubicin-hidroklorid daganatellenes hatását és csökkenti a mellékhatásokat (leukopéniát). A gyógynövények ismertetése a Commentary of Pharmacopoeia Japonica Editio Deçà kézikönyvben található. Pontosabban: 2,0-4,0 rész Astragalus gyökér, 2.0- 4,0 rész Cinnamomum kéreg, 2,0-4,0 rész Rehmannia gyökér, 2,0-4,0 rész Paenonia gyökér, 2.0- 4,0 rész Cnidium gyökértörzs, 2,0-4,0 rész Atractylodes lanceae gyökértörzs, 2,0-4,0 rész Angelica gyökér, 2,0-4,0 rész Ginseng gyökér, 2,0-4,0 rész Hoelen és 0,5-2,5 rész Glycyrrhiza gyökér alkalmazandó. Előnyös kombinációként megemlíthető a hagyományosan is ismert kínai gyógynövény-kombináció, a Juzentaihoto. A vizsgálatoknál összehasonlító anyagnak használtuk. (7.-13. ábták.) A találmány szerinti kiegészítő adalék előállítható úgy is, hogy elkészítjük a fent említett tízféle nyers gyógynövény vizes vagy vizes-szerves oldószeres - előnyösen alkoholos - kivonatát, majd az így nyert kivonatot megszűrjük, és a szokásos szárítási eljárásokkal szárítjuk, amilyen például a porlasztásos szárítás, a liofilizálás vagy a besűrítéses szárítás. A találmány szerinti kiegészítő adalék úgy készíthető, hogy a fenti tízféle nyers gyógynövény keverékéből állítunk elő kivonatot, vagy pedig az egyes nyers gyógynövények kivonatait keverjük össze. Az extrakciót szobahőmérsékleten vagy magasabb hőmérsékleten végezhetjük, előnyösen 50-100 °C-on. A találmány szerinti kiegészítő adalék használható eredeti alakjában, vagy pedig por, granulátum, tabletta vagy kapszulás készítmény formájában, a szokásos vivőanyagok, illetve adalékanyagok hozzátételével. A kivonatokat tetszés szerint tisztíthatjuk a szokásos módszerekkel, amilyen például a dialízis, a kromatográfia és egyéb módszelek. A találmányt a továbbiakban a megvalósítási lehetőségeket bemutató példák révén ismertetjük: 1. példa 285 ml vizet adunk 3 g Astragalus gyökérből, 3 g Cinnamomum kéregből, 3 g Rehmannia gyökérből, 3 g Paeonia gyökérből, 3 g Cnidium gyökérförzsből, 3 g Atractylodes lanceae gyökértörzsből, 3 g Angelica gyökérből, 3 g Ginseng gyökérből, 3 g Hoelenből és 1,5 g Glycyrrhiza gyökérből álló nyers gyógynövénykeverékhez, és 100°C-on egy órán át extraháljuk. A kivonatot szűrjük, és por'asztásos szárítással nyerjük a 2,3 g száraz, por alakú kivonatot. 2. példa 142,5 ml vizes alkoholt adunk az 1. példában leírt összetétel szerinti nyers gyógynövények keverékéhez, és 70 °C-on 30 percig visszafolyatás közben extraháljuk. A kivonatot szűrjük, és az 1,9 g száraz kivonat előállítása céljából szárítjuk. A következő kísérleti adatok a találmány szerinti kiegészítő adalék hatását mutatják, azaz a mitomicin C és a doxorubicin-hidroklorid daganatellenes aktivitásának növelését, és a leukopenia enyhítését. Ezen adatok azt is szemléltetik továbbá, hogy a találmány szerinti kiegészítő adalék meggátolja a testsúlyvesztést, és csökkenti a toxieitás okozta halálozást. 1. kísérlet 4-4,5 hetes, hím, BDF, (C57BL/6 DBA/2) fajtájú egereket intraperitoneálisan 1 x 10® mennyiségű, P-388-as leukémia-sejtekkel oltottunk be a 0. napon. Az 1. és a 2. példában leírtak szerint nyert találmány szerinti kiegészítő adalék élettartamot növelő hatását összevetettük a mitomicin C és a 5 10' 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
