186909. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hetearociklusos karboxamidok előállítására
27 186909 28 Ezenkívül a kővetkező vegyületek növelik jelentősen a karragenin-ödéma nagyságit, 10-160 mg/kg dózisban p.o. adagolás esetén: 8:1, 9:1, 12:7, 13:3, 14:7, 14:12, 16:1, 17:1, 18:1, 18:2, 18:3, 20:5, 20:9, 20:10, 20:16, 20:29, 20:35, 20:39, 21:3, 21:5, 21:7, 21:8, 21:10, 21:12, 21:14, 21:16, 21:20, 21:21, 21:35. 23. példa Ezzel a példával a találmány szerinti eljárással előállított (I) általános képlett! vegyületek hatását kívánjuk bemutatni patkányokon, adjuváns arthritis tesztben. Az adjuváns arthritis teszt patkányokban késői túlérzékenységi reakciót vált ki, ami felhasználható gazdaszervezetben bekövetkező késői túlérzékenységi reakcióban gyógyszer hatására létrejött változások meghatározására. A késői túlérzékenységi reakció mértékének növekedése gyógyszer hatására a megnövekedett celluláris immunitásra enged következtetni a gazdaszervezetben. Newbould, B. B. [Brit. J. Pharmacol. 21, 127 (1963)] módszerének módosított változatát használjuk. 250-275 g súlyú him Lister csuklyás patkányokkal dolgozunk, minden kísérleti csoport legalább 10 állatból áll. A patkányok jobb hátsó talpába egyszeri intrakután injekcióval 0,5 mg hővel elölt Mycobacterium butyricumot adunk, 0,1 ml steril folyékony paraffinban szuszpendálva. Az injekció beadása után, a 0. napon majd a kísérlet végéig mérjük a bal hátsó láb térfogatát, v1zkiszoritásos módszerrel. : A vizes metil-cellulóz oldatban szuszpenzált vizsgálati anyagokat 10 ml/kg adagokban adjuk gyomorszondával a kísérleti állatoknak. A kontroll csoport 10 ml/kg vizes metil-cél lui óz oldatot kap. A kísérleti állatokat naponta egyszer kezeljük a fenti módon, a kísérlet 4. napjától a 14. napig. A vizsgált anyagok hatását a bal hátsó láb térfogatának százalékos változása alapján értékeljük, a kontroll csoporthoz viszonyítva. A kísérleti eredmények egy részét a 2. táblázatban adjuk meg. Az (I) általános képlető vegyületek hatását az ismert levamisole és penicillamin hatásával hasonlítjuk össze, amelyek Huskisson, E. C. és munkatársai [Lancet 1, 393 (1976)] szerint immunrendszert stimuláló hatással rendelkeznek. 2. táblázat: Adjuváns arthritis teszt patkányokon - előzetes eredmények Vegyül et számjele/neve Dózis, p.o. (mg/kg) Bal hátsó láb térfogatnövekedése (%) 1:1 40 41 1:1 20 50 7:1 40 35 7:1 20 44 1:11 40 45 1:43 10 48 2:2 40 40 2:3 40 39 6:1 40 34 7:4 40 29 21:6 10 41 21:9 10 51 Vegyület Dózis, p.o. Bal hátsó láb számjele/neve (mg/kg) térfogatnövekedése (%) Penicillamin 40 0 Levamisole 10 12 Levamisole 5 4 A fenti vegyületeken kívül a következő vegyületek növelik jelentősen a talptérfogatot adjuváns arthritis tesztben, 40 mg/kg p.o. dózis alkalmazása esetén: 1:2, 1:9, 1:12, 1:22, 13:3, 21:4, 21:5, 21:7, 21:11, 21:14, 21:17, 21:23, 21:24, 21:26, 21:28, 21:30, 21:31, 21:33, 21:35. Az (I) általános képlető vegyületek toxicitása alacsony. Egereken mért p.o. LDS, érték >1000mg/kg. A levamisole akut LD» értéke egereken 285 mg/kg p.o., Renoux G. [Pharmac. Ther. A 2, 397 (1978)] szerint. A fenti példából kitűnik, hogy az (I) általános képlető vegyületek fokozzák a celluláris immunitást. 24. példa Ezzel a példával a találmány szerinti eljárással előállított (I) általános képlető vegyületek hatását kívánjuk bemutatni patkányokon, pertussis vaccina mell hártyagyulladás tesztben. A pertussis vaccina mellhártyagyulladás alkalmas teszt a kémiai vegyületek immunrendszerre kifejtett hatásának értékelésére. Azok a vegyületek, amelyek fokozzák ennek a késői immunválasznak a nagyságát, celluláris immunitást fokozó hatásúaknak tekinthetők. Dieppe, P. A. és munkatársai [Agents and Actions 6/5, 618 (1976)] módosított módszerét használjuk. 250-275 g súlyú hím Sprague-Dawley patkányokkal dolgozunk, minden csoport legalább 10 állatból áll. Freund-féle nem teljes adjuvánst azonos térfogatú hővel elölt Bordatella pertussis baktériumszuszpenzióval keverünk össze. Az állatok érzékenyltése céljából a 0. napon 0,2 ml, ml-enként 3,6x10* baktériumot tartalmazó keveréket oltunk be az állatok egyik hátsó és egyik mellső lábának hátoldali felületébe. Az állatokat a 12. napon a mellhártyába injektált 0,1 ml ml-enként 2,5x10* baktériumot tartalmazó keverékkel késztetjük a reagálásra. A provokál ás után 48 órával, a 14. napon mérjük a mellüregben lévő váladék térfogatát. A vizsgálandó anyagokat vizes metil-cellulóz oldatban szuszpendálva 10 ml/kg-ban adjuk gyomorszondával, naponta egyszer a 10-13. napokon. A kontroll csoport metil-cellulóz oldatot kap 10 ml/kg mennyiségben. A vizsgált anyagok hatását a váladék térfogatának százalékos változása alapján értékeljük, a kontroll csoporthoz viszonyítva. A kísérleti eredmények egy részét a 3. táblázatban adjuk meg. Az (I) általános képlető vegyületek hatását az ismert levamisole és penicillamin hatásával hasonlítjuk össze. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 15
