186749. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új, biológiailag aktív peptidek előállítására
1 I 86 749 2 i 1. Icpcs: Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NIl-Z (XI’) 1.0 g (3,5 inmól) ßoc-Tyr-011-t cs 1,65 g (3,4 mmél) (X’) képletű vegyületet az 5. lépés szerint reagáltatva 2,24 g (XT) képletű vegyületet kapunk. A metanol és diizopropiléter elegyéből kristályosított anyag 148 °C-on olvad. ja]^s = + 16,2° (c= 1 .metanol), =0,38. 12. lépés: Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH2 (XII’) 1.0 g (1,4 mjmól) Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-Z (Xí’) 10 ml metanollal készített oldatát szobahőmérsékleten 0,27 g 10 %-os palládium-csőntszén katalizátor jelenlétében liidrogénezzük. A reakcióelegyet a 4. lépés szerint leldolgozva 0,64 g (XII’) képletű vegyületet kapunk, amely 148 °C-on olvad. [ojp5 =4-26,6° (c = 1, metanol), R? = 0,34; Ej2 = 0,57. 13. lépés: Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro Ser-NH-NH-Z (XIII’) I g (1,75 mmól) Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH2 (XII’) 15 ml vízmentes dimetilformamiddal készített oldatához —30 °C-on 1,1 ml (4,38 mmól) vízmentes tetrahidrofurános 4 n hidrogénklorid-oldatot, majd 0,2 ml (1,93 mmól) n-butilnitritet adunk. A reakcióelegyet -30 °C- on 30 percen át keverjük, utána 0,5 mi (4.38 mmól) N-metil-morfolint, majd 0,803 g (1,46 mmól) (VI’) képletű H-Tyr-Pro-Ser-NH-NH-Z* HC1 és 0,16 ml (1,46 mmól) N-metil-morfolin 15 ml vízmentes dimetilformamiddal készített oldatát adjuk hozzá. A reakcióelegyet —9 °C-on2 napon át állni hagyjuk, utána a sókat kiszűrjük, az oldószert vákuumban eltávolítjuk és a terméket 0 °C-ra hűtött 10%-osdtromsav-oldűtba öntjük, A csapadékot szűrjük, vízzel semlegesre mossuk és vákuumban szárítjuk. Az etilaceíát és dietjléter elegyéből átkxisíályosítoti termék 140-150 °C-on olvad. Hozam: 1,15 g; [ü]q = -20,3° (c = 1, metanol). R® = 0,17; = 0,92. 14. lépés: H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH-NH-Z” * HCl (XIV’) 1.0 g (0,95 mmól) (X1IF) képletű vegyidéiből kiindulva a 2. lépés szerint járunk el, és 0,89 g (XIV) képletű vegyületet kapunk, amely etilacetátból átkristályosítva 170 °C-on bomlás közben olvad, [a]^5 = -1,8° (c = = 1, metanol), [cejt.5 = +1,0° (c = 1, ecetsav), R? = 0,69; Ei>2=0,50. 7. példa H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-NH-NH-Z.• HCl (XVIII’) 1. lépés: Boc-Tyr-NH-NH-Z (XV ) i ,0 g (3,55 mmól) Boc-Tyr-OH 20 ml vízmentes teírahidrofuránnal készített oldatához —12 °C-on 0,4 ml (3,55 mmól) N-metil-morfolint, majd 0,48 ml (3,55 mmól) izobutilkíórformiátot adunk. Az oldatot-12°C- on 2 percen át keverjük, majd 0,72 g (3,55 mmól) H2N-NH-ZcHCl cs 0.4 ml N-melilmorfolin 20 nil dimetüformamiddaí készíteti, hűtött oldatát adjuk hozzá. A reakcióelegyet - 10 °C-on 90 percen át keverjük, utána a sókat kiszűrjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A maradékot etilacetátban oldjuk, és az oldatot többször citromsav IM vizes oldatával, nátriumhidrogénkarbonát 1M vizes oldatával, valamint telített konyhasó-oldattal mossuk. A szerves fázist vízmentes nátriuniszulfátta! szárítjuk és hcpároljuk. 1,3 g (XV) képletű vegyületet kapunk, amely 68-70 °C-oii olvad. [cv]^5 = -5,85° (c = 2, metanol), = 0,76. 2. lépés: H-Tyr-NH-NH-Z* HCl (XVI’) 1.0 g (2,33 minél) (XV) képletű Boc-Tyr-NH-NH-Z 10 ml vízmentes íetraliidrofurános 4 n hidrogénkloridoldaCal készített oldatát szobahőmérsékleten 30 percen át állni hagyjuk. Utána az oldószert vákuumban ledesztilláljuk és a terméket izopropanol és dietiléter elegyéből kicsapjuk. 0,76 g (XVI’) képletű vegyületet kapunk, amelv 103—105 °C-on olvad, [a]^5 = 448,8° (c= l,metanoi), R^= 0,70; E1;2 =0,92. 3. lépes: Boc-Tyr-ala-Phc-Gly-Tyr-NH-NH-Z (XVIF) 1.0 g (1,75 mmól) (X1T) képletű Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH2 15 ml vízmentes dimetilformamiddal készített oldatához egymás után -30 °C-on 1,1 ml (4,38 mmól) vízmentes íetraliidrofurános 4 n hidrogénkloridoldatot, majd 0,2 ml (1,93 mmól) n-butilnitritet adunk. A rerkcióelegvet a megadott hőmérsékleten 30 percen át keverjük, majd 0,5 ml (4,38 mmól) N-metil-morfolint, utánr 0,535 g (1,46 mmól) H-Tyr-NH-NH-Z“HCl és 0,16 ml ( : ,46 mmól) N-metil-morfolin 15 ml vízmentes dimetiíformamiddal készített oldatát adjuk hozzá. A reakcióelegyet -9 °C-on 3 napon át állni hagyjak, majd a sókat kiszűrjük és az oldószert vákuumban elpároljuk. A termeket 0 °C-ra hűtött 10 %-os citromsav-oldatba öntjük. A csapadékot szűrjük, vízzel semlegesre mossuk, majd vákuumban szárítjuk. Az izopropanol és dietiléter elegyéből átkristályosított termék 137—150 °C-on olvad. Hozam: 0,85 g, [a]j* = 43,8° (c = 1, metanol), R^ = = 0,27; R» =0,52. ' 4. lépés: H-Tvr-ala-Pke-Gly-Tyr-NH-NH-Z' HC1 (XV! II’) 1.0 g (!.15 mmól) (XVII*) képletű Boc-Tyr-ala-Phe- Gly-Tyr-NH-NH-Z-tőI kiindulva a 2. lépés szerint járunk el. C,83 g (XVIII ) képletű vegyületet kapunk, amely etilacetátból átkristályosítva 190—192 °C-on bomlás közben olvad. [a]q = 419,9° (c = l, metanol), = =0,81 :E1j2 =0,59. 8. példa H-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-Za HCl (XIX’) i ,0 g (1,60 mmól) (XT) képletű Boc-Tyr-ala-Phe-Gly- NH-NH-Z-től kiindulva a 6. példa 8. lépése szerint járunk el. 0,70 g (XIX’) képletű vegyületet kapunk, amely etilacetátból kristályosítva 215 °C-on olvad, [ajj^ =433° (c = 1, metanol), =0,70; Ei 2 = 0,62. 9. példa II i yr-ala-i’hc-Gly-NIl Nll-C’O-Cl 12-Cli2 -Cll2 • •HCl (XXI’) I. lépés: Boc-Tvr-ala-Phe-Gty-NH-NH-CO-CHj-CH2- Clij (XX’) 0,12 ml (1,3 mmól) vajsavat és 0,742 g (1,3 mmól) (Xll!) képletű Boc-Tyr-nla-Plie-Gly-NH-NH2-t a 6. példa 1. lépése szerint reagáltaíunk. 0,8 g (XX’) képletű vegyü-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 11
