186398. lajstromszámú szabadalom • Eszköz plazma vagy szérum teljes vérből való leválasztására
9 186398 10 Természetesen az is lehetséges, hogy az 1 jelzésű reakcióréteg két vagy több egymástól eltérő zónából álljon. Ezek vagy ugyanazt az anyagot különböző koncentrációtartományokban, vagy pedig különböző anyagokat mutathatnak ki, ha a receptúrákat megfelelően választjuk ki. Elképzelhetők továbbá olyan elrendezések is, amelyeknél egyidejűleg különböző reakciórétegeket nedvesít meg a plazma, amely egy felcseppentési helyről szivárog szét. A legkülönbözőbb formák képzelhetők el, hosszúkásak, köralakúak és hasonlók. A 15a)-tói 16b) ábrákig néhány lehetséges elrendezést ábrázoltunk, amelyeken a különböző — laj-tól 1 d) jelzésű tesztzónák eltérőek, de az egyéb vonatkozásokban az előbbi ábráknak megfelelők. A vérszétválasztás egyébként javítható, ha a 3 jelzésű üvegszál-rétegre a vér felcseppentési helyénél még egy további 3a) jelzésű üvegszál-réteg lap van felerősítve. A 3a) és a 3 jelzésű rétegek lehetnek azonos anyagból, lehet azonban a 3a) jelzésű anyag más vastagságú, illetve más rostátmérőjű anyagból is kiválasztva. A 18. ábra és a 19. ábra olyan lehetséges elrendezéseket mutatnak be, amelyek egyébként a 3. és 12. ábráknak megfelelők. A következő példákon a találmányt részletesebben szemléltetjük. 1. példa Koleszterin-tesztcsíkok 0,117 g metil-(hidroxi-propil)-cellulózt (Culminai MHPC 8000), 7.000 g titán-dioxidot, 0,138 g kálium-dihidrogén-foszfátot, 0,479 g dinátrium-hidrogén-foszfát-monohidrátot, 3400 egység koleszterin-észterázt, 5000 egység koleszterin-oxidázt, 7 ■ 104 egység peroxidázt, 0,476 g nátrium-dioktil-szulfoszukcinátot oldunk 70 ml vízben. Utána egymás után homogenizálunk vele 14.0 g cellulózt, 8,4 g polivinil-propionát diszperziót. Végül hozzáadunk 0,66 g 3,3',5,5'-tetrametil-benzidint 1,6 ml acetonban oldva. Ezt az elegyet körülbelül 300 ;j. vastagságban felkenjük egy sima műanyag fóliára, és 60—70 °C-on való szárítás után 6 mm széles csíkokra felvágjuk. Ezeket a csíkokat utána egy 60 p. vastag nylonhálóval és egy szintén 6 mm széles csíkokra vágott üvegszálpapírral (Schleicher & Schüll 3362 sz. üvegszál-szűrő; papírvastagság 0,47 mm; sűrűség 0,27 g/cm3 ; átlagos rostátmérő körülbelül 2,5 p) együtt egy poliészter-fóliára ragasztjuk fel. Végül ezt 6 mm széles csíkokra szétvágjuk. » A tesztcsík felső oldalára 40 pl vért cseppentünk, és 1 perc múlve eltávolítjuk az üvegszál-papírt a maradék vérrel együtt a háló letépésével, utána a tesztzónán 3 percen belül reakciószín jelenik meg, amely megfelel annak, amit akkor kapunk, ha a vér helyett ugyanezen vér lecentrifugált plazmáját cseppentjük fel. Koleszterin-teszt 0,45 g kálium-dihidrogén-foszfátot, 1,55 g dinátrium-hidrogén-foszfát-monohidrátot, 1,5 • 104 egység koleszterin-észterázt, 1 • 104 egység koleszterin-oxidázt, 3 • 105 egység peroxidázt, 2.0 g nátrium-dioktil-szulfoszukcinátot, 6,9 g nátrium-alginátot (Algipon) feloldunk 250 ml vízben, utána még hozzáadunk 2.0 g 3,3',5,5'-tetrametil-benzidint 15 ml acetonban oldva. Majd még 20.0 g kovaföldet homogenizálunk benne. Ezt a masszát 6 mm széles csíkokban szitanyomógéppel (szövet : 190 p) egy üvegszálpapírra (például Macherey, Nagel and Co. Nr. 85/90 üvegszál-szűrő) nyomtatjuk fel az 1. példában leírt formában. A megnyomtatott üvegszál-papírt 60—80 °C-on megszárítjuk, és így 12 mm széles csíkokra vágjuk, hogy a megnyomtatott reakciózóna a csík felét elfoglalja. Ezt a csíkot a végén egy poliészterfóliára ragasztjuk, és az üvegszál-papírokra merőlegesen 6 mm széles csíkokra vágjuk. Ha most az üvegszálpapírnak a reagensrétegen túlnyúló szélére 40 pl vért cseppentünk a plazma a reakciózóna alá diffundál. Ez a vér koleszterinkoncentrációjától függően különböző kék reakciószínt vesz fel. A reakciószín intenzitása megfelel annak, amit akkor kapunk, ha a vér helyett ugyanezen vérből nyert szérumot vagy plazmát cseppentünk fel. Hasonló módon alkalmazhatók a következő 1. táblázatban felsorolt papírok is. 1. táblázat 2. példa Üvegszál-szűrőpapírok plazmaelválasztásra Papír Gyártó Típus szálátmérö (H) átlagos szálátmérő U) terüíetsúly (g/m2) vastagság (V) sűrűség (g/cm1) Macherey and Nagel 85/90 BF 2—9 3,2 87 350 0,249 Nudepore P 300 1—3 1,5 25 89 0,275 Schleicher und Schüll Nr. 9 3—4 3,4 67 269 0,247 Scleicher und Schüll 3362 1—7 2,5 127 472 0,269 3. példa Koleszterinteszt 16.0 g Cellulóz M+N Ac 10-ből, 86.0 g 0,2%-os met il-(hidroxi-propil)-cellulóz (Culminai MHPC 8000) oldatból, 5 10 15 20] 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
