186282. lajstromszámú szabadalom • Eljárás bisz-indol-vegyületek előállítására
9 186282 10 0,065 ml (0,45 mmol) trifluor-ecetsavanhidridet. Egy óra elteltével a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, majd a maradékot feloldjuk 5 ml tetrahidrofuránban. Hozzáadunk vizes nátrium-karbonát oldatot (40 g/1 ; 0,012 ml), és a reakcióelegyet egy éjszakán át keverjük szobahőmérsékleten. Az 1. példában ismertetett kloroformos extrahálás után a maradékot preparatív rétegkromí tográfiás eljárással tisztítjuk (eluens : kloroform és metanol 90: 10 arányú elegye), így 16 mg 15 vegyületet (23%) kapunk. A termék fizikai állandói : IR színkép: 3400, 2950, 1740. UV színkép : 222 (50 000), 265 (14 000), 285 (12 000), 292 (11 200), 310 (7000) (váll). CD: 295 (-4,0), 287 (-4,0), 260 (+18,3), 225 (+16,6), 215 (-18,0). Tömegszínkép m/e: 810, 796, 794, 764, 750, 738, 736, 598, 577, 522, 480, 282, 144, 138 (100%), 135 (100%), 125,124(100%), 122,121. NMR színkép (250 MHz): 8,70 (s, 1H, Na—H vagy OH), 7,55—7,0 (m, aromás 4H), 7,02 és 5,97 (2s, 2H, C14—H és C17—H), 5,91 (m, 1H, C7—H), 5,49 (s, IH, C4—H), 5,34 (d, J76=7,5, 1H, C6—H), 4,28 (s, széles, 2H, C8—H), 3,79, 3,66 és 3,42 (3s, 9H, OCH3, C3C02CH3 és C18C02CH3), 2,70 (s, 3H, Na—CII3), 2,12 (s, 3H, OCOCHj), 0,70 és 0,52 (2t, 6H, J =7, C2i,-H3). 6. példa 7 ',8 '-szeko-8 '-Metoxi-anhidrovinblasztin előállítása (b) eljárás) 66 mg (0,08 mmol) anhidrovinblasztin-7 '-klór-indolenin — melyet a 7 902 981 számú francia szabadalmi leírás szerint állítunk elő (amely a 7 824 586 számú szabada!mi bejelentés 1978. VIII. 24-én kelt póttanúsítványa) — 7 cm3 vízmentes tetrahidrof uránnal készült oldatához hozzáadunk 18 mg ezüst-tetrafluoro-borátot, majd az elegyet 5 órán át keverjük 40 °C-on. Ezután az oldószert csökkentett nyomáson lehajtjuk. 2 cm3 metanol hozzáadása, fölös mennyiségű nátrium-bór-hidriddel való redukálás után az 1. példában ismertetett módon kloroformos extrakcióval tisztítjuk. 34 mg dimer 13 vegyületet (50 %) kapunk. A találmány szerinti I általános képletű vegyületek daganatellenes tulajdonságokkal rendelkeznek, ezért felhasználhatók számos daganatos megbetegedés, például leukémia kezelésére. A találmány tárgyát képezi az I általános vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítása is. A példák szerinti vegyületek in vivo és in vitro farmakológiái vizsgálatainak eredményeit az alábbiakban ismertetjük. Tubulin polimerizációjának gátlása A tubulin a vinblasztin típusú daganatellenes indolvázas alkaloidák receptora a sejtben. A tubulin könnyen kivonható sertések agyából, aholis az oldható fehérjék 10%-át alkotja. A tubulin polimerizációja ultraibolya spektrofotométerrel könnyen nyomon követhető 350 nm-en. A vizsgált anyagoknál meghatároztuk a maximális polimerizációs sebességet — ezt vinblasztin típusú inhibitorok hozzáadásával csökkentettük — és meghatároztuk az I50 koncentrációt (vagyis a polimerizációs sebességet felére csökkentő inhibitor-koncentrációt). A terméknek egy másik hatását is vizsgáltuk : nagyobb dózisoknál a polimerizáció teljes leállítása után (elektronmikroszkóppal) megfigyelhető a tubulin spirális felcsavarodása, egy spirális formába való átalakulása. Meghatároztuk az S50 koncentrációt (amelynél a jelenség 50%-ban figyelhető meg). A kapott eredményt minden egyes termékre összehasonlítottuk a referenciaként használt vinblasztinra kapott eredményekkel. Úgy találtuk, hogy a fentemlített kísérleti eredmények és az állati daganatok esetében kapott eredmények igen jó korrelációt mutatnak. így az alábbi táblázatban a 10~5 nagyságrendű vagy kisebb I50, illetve S50 értékekkel rendelkező vegyületek gyógyászati szempontból figyelemre méltóak. Vegyületek I50 [mol/liter] Sso [mol/liter] Vinblasztin 1,70 x 10~6 9,0x10-6 11 3,40 xlO“6 4,5 x IO-6 12 2,38 xl0~4 — 13 5,10xl0-6 6,7 x IO-6 14 6,40xl0-J — 15 1,70 x 10~5 — A találmány tárgyát képezik továbbá olyan gyógyászati készítmények is, amelyek valamely I általános képletű új vegyületet vagy azok sóját tartalmazzák bármilyen egyéb semleges vagy fiziológiailag aktív, gyógyászatilag elfogadható termékkel együtt. Ezek a készítmények bármilyen kiszerelési formában előállíthatok, amely alkalmas a tervezett adagolási módhoz. A találmány szerinti készítményeket parenterális adagolás céljára steril vizes vagy nemvizes oldatok, szuszpenziók vagy emulziók formájában állíthatjuk elő. Oldószerként, illetve közegként használhatunk propilén-glikolt, polietilén-glikolt, növényi olajokat, különösen olívaolajat, továbbá injektálható szerves észtereket, előnyösen etil-oleátot. Ezek a készítmények tartalmazhatnak adalékanyagokat, előnyösen nedvesítőszereket, emulgeálószereket és diszpergálószereket. A sterilizálás több módszerrel is elvégezhető, például bakteriológiai szűrő segítségével, sterilizálószereknek a készítménybe történő beépítésével, besugárzással vagy hevítéssel. A készítmények előállíthatok steril szilárd anyag formájában is, amelyek steril vízben vagy bármilyen egyéb steril injektálható közegben az alkalmazás időpontjában feloldhatók vagy diszpergálhatók. Az új vegyületek, illetve azok sói hatásosak a szilárd és folyadék halmazállapotú daganatok, különösen emberi rákbetegségek kezelésében. A felnőttek napi dózisa 10—20 mg. A találmány szerinti készítményt az alábbi példával mutatjuk be. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
