185978. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új tetrapeptid-származékok előállítására
1 185 978 2 4,13 (2H, s), 4,22 (2H, s), 7,40 (10H, s). 2. példa (F-reakcióegyenlet) 2,7 g [Z-(L)-Boc-(D)-mezoDAP-(D)-NH2]-(L)-Gly-OBz (1) 75 ml metanol és 10 ml víz elegyével készült oldatához hozzáadunk 1,0 g, 10%-os csontszenes palládium-katalizátort, és az elegyet normál nyomáson hidrogénezzük. Utána a katalizátort kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot dietiléterrel eldörzsölve 1,59 g[Boc-(D)-mezoDAP-(D)-NH2]-(L)-GlyOH-t (2) kapunk. IR-spektrum(nujol): 3600—2200,1690 (váll), 1670 cm'1. NMR-spektrum (CD3OD): <5 1,42 (9H, s), 1,2-2,0 (6H, m), 3,6—4,1 (4H, m). 3. példa 1/ lépés (G-reakcióegyenlet) 1,15 g D-Lac(oAc)-L-Ala-D-Glu(OH)-OBzl (1) és 0,27 g N-metil-morfolin 55 ml diklór-metánnal készült oldatához -15 °C hőmérsékleten hozzácsepegtetünk 0,37 g klórhangyasav-izobutil-észtert. Az elegyet félórán át -10 -----15 °C hőmérsékleten keverjük, majd -40 °C hőmérsékletre hűtve hozzáadjuk 0,94 g[Boc-(D)-mezoDAP-(D)-NH2]-(L)-GlyOH (2) és 2,76 g bisz-trimetilszilil-acetamid 25 ml diklór-metánnal készült oldatát. Ezután az elegyet másfél órán át -10-----15 °C hőmérsékleten, majd további másfél órán át -15 — 0 °C hőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert ledesztilláljuk, a maradékot feloldjuk 80 ml etil-acetátban, és az etil-acetátos oldatot először 2,5%-os sósavval, majd telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. A kristályos, szilárd maradékot dietil-éterrel mosva 1,80 g D-Lac(oAc)-L-Ala7-DGlu(a-OBzl)-(L)-[Boc-(D)-mezoDAP-(D)-NH2]-(L)-GlyOH-t (3) kapunk. IR-spektrum (nujol): 3280, 1730, 1655, 1640 cm'1. NMR-spektrum (CD3OD): ő 1,2-2,2 (25H, m), 2,12 (3H, s), 3,97 (2H, s), 4,2—5,0 (5H, m), 5,20 (2H, s), 7,39 (5H, s). 2/ lépés (H-reakcióegyenlet) 1,67 g D-Lac-L-Ala-7-D-Glu(a-OBzl)-(L)-[Boc-(D)-mezoDAP-(D)-NH2]-(L)-GlyOH (3) 50 ml metanol és 8 ml víz elegyével készült oldatát 1,0 g 10%-os csontszenes palládium-katalizátor jelenlétében, normál nyomáson hidrogénezzük. Utána a katalizátort kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot feloldjuk 15 ml trifluor-ecetsavban. Az oldatot félórán át szobahőmérsékleten keverjük, majd a trifluor-ecetsavat ledesztilláljuk. A maradékot feloldjuk 44 ml 50%-os, vizes metanolban, és az oldat pH-ját 10%-os nátrium-karbonát-oldattal 9-re állítjuk. Az elegyet 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd a metanolt ledesztilláljuk, és a maradék vizes oldat pH-ját 5%-os sósavval 2-re állítjuk. A megsavanyított oldatot felvisszük egy 30 ml aktív szénnel töltött oszlopra, az oszlopot vízzel mossuk, majd 80%-os, vizes metanollal eluáljuk. Az elutumról az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot 230 ml HP-20 jelzésű, makropórusos, nem ionos adszorpciós gyantán kromatografáljuk. Eluensként vizet használunk. Az elutumot betöményítjük, majd a maradékot fagyasztva szárítjuk. Ily módon 0,81 g D-Lac-L-Ala-7-D-Glu(a-OH)-(L)-[mezoDAP-(D)-NH2]-(L)-GlyOH-t (4) kapunk. [a]D = -34,4° (c = 0,2 víz). IR-spektrum (nujol): 3280, 1720 (váll), 1650 cm'1. NMR-spektrum (D20): ő 1,38 (3H, d, J=7Hz), 1,42 (3H, d, J=7 Hz), 1,6-2,5 (ÍOH, m), 3,96 (2H, s), 4,03 (1H, t, J=6 Hz), 4,2-4,5 (5H, m). 4. példa 1/ lépés A heptanoil-L-Ala-7-D-Glu(a-OBzl)-(L)-[Boc-(D)mezoDAP-(D)-NH2]-(L)-D-AlaOH-t lényegében a 3. példa 1/ lépésében leírt módon állítjuk elő. NMR-spektrum (CD3OD): ő 0,93 (3H, t, J=5Hz), 1,1-2,5 (35H, m), 3,9-4,6 (5H, m), 5,17 (2H, s), 7,35 (5H, s). IR-spektrum (nujol): 3260, 1720, 1630, 1520, 1330, 1290, 1265, 1165 cm'1. 2/ lépés A heptanoil-L-Ala-7-D-Glu(a-OH)-(L)-[mezoDAP-(D)-NH2]-(L)-D-AlaOH-t lényegében a 3. példa 2/ lépésében leírt módon állítjuk elő. NMR-spektrum (D20): ő 0,87 (3H, t, J=5Hz), 1,37 (3H, d=7Hz), 1,40 (3H, d, J=7Hz), 1,1-2,5 (20H, m), 3,9-4,5 (5H, m). IR-spektrum (nujol): 3280, 1690 (váll), 1640, 1540, 1230, 1165 cm'1. 5. példa 1/ lépés A fenil-acetil-L-Ala-7-D-Glu(a-OBzl)-(L)-Boc-(D)mezoDAP-(D)-NH2-(L)-D-AlaOH-t lényegében a 3. példa 1/ lépésében leírt módon állítjuk elő. NMR-spektrum (CD3OD): ö 1,2—2,4 (25H, m), 3,56 (2H, s), 4,1—4,5 (5H, m), 5,14 (2H, s), 7,28 (5H, s), 7,34 (5H,s). IR-spektrum (nujol): 3250, 1720, 1660, 1625, 1520, 1290, 1240, 1205, 1160 cm'1. 2/ lépés A fenil-acetil-L-Ala-7-D-Glu(a-OH)-(L)-[mezoDAP-(D)-NH2]-(L)-D-AlaOH-t lényegében a 3. példa 2/ lépésében leírt módon állítjuk elő. NMR-spektrum (D20): ő 1,32 (3H, d, J=6Hz), 1,38 (3H, d, J=6Hz), 1,4—2,2 (ÍOH, m), 3,65 (2H, s), 3,8-4,5 (4H, m), 7,33 (5H, s). IR-spektrum (nujol): 3270, 1640, 1530, 1240, 1160, 1025 cm'1. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
