185954. lajstromszámú szabadalom • Eljárás bisz-tetrazolil-metil-csoporttal helyettesített cefem-karbonsav-származékok előállítására
1 185 954 2 (s, 2H, a tetrazolgyűrűk közötti metiléncsoport), 7,14 (széles s, 2H, tiazol-amino H), 7,46 (s, 1H, tiazol H), és 9,43 (d, 1H, 7-amid-H). 6. példa 7-(2-Tienil-acetamido)-3-[ l-( lH-tetrazol-5-ilmetil)-lH-tetrazol-5-il-merkaptometil]-3-cefem-4- karbonsav 808 mg (2 mmól) 7-(2-tienil-acetamido)-3.-acetoxi-metil-3-cefem-4-karbonsav-nátriumsó (cefalotin-nátriumsó), 368 mg (2 mmól) l-(lH-tetrazol-5-il-metil)-lH-tetrazol-5-il-merkaptán és 168 mg (2 mmól) nátrium-hidrogén-karbonát 16 ml vízzel készült oldatát olajfürdőn 7 órán át körülbelül 55 °C és körülbelül 60 *C közötti hőmérsékleten tarjuk. Ezután a reakcióelegyét csökkentett nyomáson körülbelül 8 ml térfogatra betöményítjük, és ezt a betöményített oldatot felvisszük egy fordított fázisú szilikagéllel töltött, preparatív nagynyomású vékonyréteg-kromatográfiás oszlopra. Az oszlopot először acetontril : ecetsav : víz = 15 : 2 : 83 arányú eleggyel eluáljuk, 20 ml térfogatú frakciókat szedünk, majd körülbelül 90 frakció leszedése után az eluálást acetonitril : víz = 20 : 80 arányú elegygyel folytatjuk. A terméket tartalmazó 133-153. frakciókat egyesítjük, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon p-nitrobenzil-észter formájában 350 mg kristályos terméket kapunk. A 181-193. frakciókban a kiindulái cefalotin-nátriumsó van. A kristályos termék adatai: NMR-spektrum (100 MHz, DMSO-d6). ö 3,63 (m, 2H, C-2 metiléncsoport), 3,73 (s, 2H, tiofén-acetilcsoport metiléncsoportja), 4,32 (m, 2H, C-3' metiléncsoport), 5,04 (d, 1H, C-6H), 5,63 (q, 1H, C- 7H), 5,97 (s, 2H, tetrazol-metiléncsoport), 6,8-7,4 (m, 3H, tiöfén-H) és 9,08 (d, 1H, 7-amid-H). Analízis* számított:C: 39,22; H: 3,10; N: 26,91%; talált: C: 38,86; H: 3,33; N: 25,11%. IR-spektrum (KBr): ß-laktäm karbonil-abszorpció: 1775 cm-1. Molekulasúly a tér-deszorpciós tömegspektrum alapján: 521. 7. példa 7- ( 2- Tienil-acetamido ) - 7-metoxi-3-f l-( lH-tetrazol-5-il-metil)-lH-tetrazol-S-il-merkaptometil]-3~ cefem-4-karbonsav 3,1 g (5,3 mmól) 7-(2-tienil-acetamido)-7-metoxi- 3-bróm-metil-3-cefem-4-karbonsav-p-nitrobenzilészter és 1,38 g (7,5 mmól) l-(lH-tetrazol-5-ilmetil)-lH-tetrazol-5-il-merkaptán 20 ml dimetilformamiddal készült oldatát körülbelül 16 órán át szobahőmérékleten keverjük, utána 75 ml 1 n sósav és 75 ml etil-acetát kétfázisú elegyére öntjük. A szerves részt elválasztjuk, kétszer 1 n sósavval, utána egyszer telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, nátrium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon világosbarna színű, habos anyag formájában 3 g szennyezett terméket kapunk. Ezt a terméket 75 g szilikagélen kromatografáljuk, eluensként először 1 1 diklór-metánt használunk, majd 2 1, 2% metanolt tartalmazó diklór-metánt. Az elúció alatt az oszlopot nitrogén-atmoszférában tartjuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és az oldószert ledesztilláljuk. Az olajos maradékot feloldjuk etilacetátban, az oldatot megszűrjük, majd az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. Ily módon 0,84 g terméket kapunk. A fenti termék észter-csoportját elektrolitikus redukcióval az alábbiak szerint hasítjuk le: 700 mg (1 mmól) p-nitrobenzil-észter 30 ml 1 n, dimetilformamidos kénsav-oldattal készült oldatát egy higany-katóddal és platinadrót anóddal felszerelt elektrolizáló cellába teszünk. Az elektródokat zsugorított üvegszürŐ-réteg választja el. Aa redukciót I órán át -0,64 V potenciálon végezzük. Ezután az oldatot a cellából kiszivatjuk és etil-acetát és 1 n sósav kétfázisú elegyére öntjük. A szerves részt elválasztjuk és 1 n sósavval kétszer mossuk. Ezután a terméket 50 ml vizes nátrium-hidroxid-oldatba átrázzuk (pH = 7,5), és a vizes kivonatot etilacetáttal mossuk. Ezután a vizes részre tiszta etilacetátot rétegezünk, és sósavval pH = 2,2-re savanyítjuk. A szerves részt elválasztjuk, kétszer 1 n sósavval, majd telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, a nátrium-szulfáton megszárítjuk és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon sárga színű, habos anyag formájában 290 mg szabad savat kapunk. A terméket az alábbiak szerint tisztítjuk: a 270 mg súlyú terméket 0,05 mólos ammóniumacetát-oldatban szuszpendáljuk, és 2 csepp tömény ammónium-hidroxid-oldat hozzáadásával beoldjuk. Az oldatot megszűrjük, és felvisszük egy fordított fázisú szilikagéllel töltött nagynyomású folyadék-kromatográfiás oszlopra. Az oszlopot először acetonitril:ecetsav:víz = 12:2:86 arányú eleggyel, majd acetonitril:ecetsav:víz = 15:2:83 arányú eleggyel eluáljuk. 20 ml térfogatú frakciókat szedünk. A 72-89. frakciókat egyesítjük és fagyasztva szárítjuk. Ily módon száraz por formájában 75 mg terméket kapunk. A termék adatai: IR-spektrum (KBr): ß-laktäm karbonil-abszorpció: 1775 cm"1. Molekulasúlya a tér-deszorpciós tömegspektrum alapján: 551. NMR-spektrum (100 MHz, DMSO-d6): 5 3,34 (s, 3H,,7-metoxicsoport), 3,51 (m, 2H, C-2 metiléncsoport), 3,80 (s, 2H, tiofén-acetilcsoport metiléncsoportja), 4,29 (m, 2H, C-3' metiléncsoport), 5,06 (s, 1H, C-6H), 5,97 (s, 2H, tetrazol-metiléncsoport), 6,9-7,4 (m, 3H, tioféngyűrü-H) és 9,42 (s, 1H, 7- amid-H). 8. példa 7-(0-Formil-mandelamido)-3-[ l-( lH-tetrazol-5-il-metil)-lH-tetrazol-5-il-merkaptometilJ-3- cefem-4-karbonsav 1,01 g (5,5 mmól) l-(lH-tetrazol-5-il-metil)-lH- tetrazol-5-il-merkaptán 15 ml, 7,0 pH-jú puflferoldattal (amely 0,88 g nátrium-hidrogén-karboná-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 10
