185954. lajstromszámú szabadalom • Eljárás bisz-tetrazolil-metil-csoporttal helyettesített cefem-karbonsav-származékok előállítására
1 2 185 954 A tisztított termék NMR-adatai: NMR-spektrum (100 MHz, DMSO-d6): 5 3,65 (m, 2H, C-2 metilén), 3,85 (s, 3H, oxim-metilcsoport), 4,15 (s, 3H, N-metil /tetrazol/), 4,35 (m, 2H, C-3' metiléncsoport), 5,13 (d, 1H, C-6 H), 5,76 (q, 1H, C-7 H), 6,1 (s, 2H, metiléncsoport), 6,74 (s, 1H, tiazol H), 7,20 (széles s, 2H, tiazol-amino H) és 9,58 (d, 1H, amid H). 3. példa 7-Amino-3-[ l-( lH-tetrazol-5-il-metil)-lH-tetra-zol-5-iI-merkaptomeíilJ-3-cefem-4-karbonsav 5,3 g (29 mmól) l-(lH-tetrazol-5-il-metil)-lH- tetrazol-5-il-merkaptánt és 6,8 g (25 mmól) 7-amino-cefalosporánsavat 38 ml ecetsavban szuszpendálunk, a szuszpenziót olajfürdőn körülbelül 62 °C hőmérséklet és körülbelül 65 °C közötti hőmérsékletre melegítjük, majd hozzáadunk 16,6 ml desztillált bór-trifluorid-éterátot. Ekkor az oldatlan részek majdnem teljesen beoldódnak. Az oldatot 1 órán át körülbelül 60 °C és körülbelül 65 °C közötti hőmérsékleten keverjük. Utána lehűtjük, és 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Utána 45 ml vízzel hígítjuk, a hígított elegyet 0 °C hőmérsékletre hütjük, és pH-ját tömény ammónium-hidroxidoldattal 4,0-ra állítjuk. A kivált csapadékot kiszűrjük, vízzel, utána acetonnal, majd dietil-éterrel kimossuk, és 2 órán át 50 °C hőmérsékleten, csökkentett nyomáson szárítjuk. Ily módon világos krémszínű por formájában 8,0 g terméket kapunk, hozam: 88%. NMR-spektrum (T-60, nátrium-hidrogén-karbonát/D2Ó) ppm: 4,3 (m, 2H, C-3', metiléncsoport) és 5,9 (s, 2H, a tetrazolgyűrűk közötti metiléncsoport). 4. példa 7$-[ a,-tnetoxi~imino-a- ( 2-amino-l ,3-tiazol-4-il) - acetamidoJ-3-f l-( lH-tetrazol~5-il~metil)~IH- tetrazol-5-il-merkaptometilJ-3-cefem-4-karbonsav 7,5 g (20,6 mmól), a 3. példában leírt módon kapott termék 75 ml víz és 75 ml aceton elegyével készült oldatához hozzáadunk 8,6 g (23,5 mmól) a-metoxi-imino-a-(2-amino-1,3-tiazol-4-il)-ecetsav-hidroxi-benzotriazol-észtert. Az elegy pH-ját 45%-os kálium-foszfát-oldattal 7,5-ön tartjuk. A reakcióelegyet körülbelül 12 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd az acetont csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradék vizes oldatot megszűrjük és pH-ját jeges fürdőben 20%-os sósavval 2,4-re állítjuk. A sárga színű csapadékként kivált terméket kiszűrjük, vízzel többször mossuk és levegőn szárítjuk. Ily módon világos krémszínű, szilárd anyag formájában 6,5 g terméket kapunk. A terméket az alábbiak szerint nagynyomású folyadék-kromatográfiával tisztítjuk. Körülbelül 12 g fenti módon kapott terméket feloldunk 100 ml vízben, és annyi 45%-os, vizes kálium-foszfát-oldatot adunk hozzá, míg az elegy pH-ja el nem éri az ; 5,4-et. Ezt az oldatot egy Waters and Associates Model 500 készüléken, fordított fázisú szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáljuk, az alábbi oldó- i szer-elegyekkel: ; 5 A) acetonitril:ecetsav:viz = 8:2:90 (4 liter), B) acetonitril:ecetsav:víz = 10:2:88 (6 liter). 40, egyenként 250 ml térfogatú frakciót szedünk, és a kromatografálást ultraibolya abszorpció mérésével követjük. A 11-22. frakciókat egyesítjük és 10 fagyasztva szárítjuk. Ily módon 2,5 g amorf, fehér színű, szilárd anyagot kapunk. NMR-spektrum (360 MHz, DMSO-d6): 5 (ppm): 3,65 (m, 2H, C-2 metiléncsoport), 3,85 (s, 3H oximmetilcsoport, szín), 4,35 (m, 2H, C-3' metiléncso- 15 port), 5,13 (d, 1H-C-6H), 5,80 (q, 1H, C-7H), 6,02 (m, 2H, a tetrazolgyűrűk közötti metiléncsoport), 6,75 (s, 1H, tiazolgyűrű H), 7,24 (széles s, 2H, tiazol-aminocsoport) és 9,60 (d, 1H, 7-amid-H). 20 25 5. példa 7$-[a-Metoxi-imino-a-( 2-amino-l ,3-tiazol-4~il)acetamido ]-3~[ 2-( lH-íetrazol-5-il-metil)-2H- tetrazol-5-il-merkaptometil]-3-cefem~4-karbonsav 202 mg (1,1 mmól) 2-(lH-tetrazol-5-il-metil)-2H- tetrazoí-5-il-merkaptán 6 ml, 7-es pH-jú pufferoldattal készült oldatához (a feloldáshoz 176 mg, azaz 2,1 mmól nátrium-hidrogén-karbonát szüksé- 30 ges) hozáadunk 460 mg (1 mmól) 7ß-[a-metoxiimino-ct-(2-amino-1,3-tiazol-4-il)-acetamido]-cefalosporánsavat, és az elegyet 22 órán át olajfürdőn,a körülbelül 55 °C és körülbelül 60 °C közötti hőmérsékleten tartjuk. Ezután a reakcióelegy vékonyré- 35 teg-kromatográfiás vizsgálata azt mutatja, hogy a reakció körülbelül félig játszódott le. Ekkor az elegyhez hozzáadunk további 100 mg merkaptánt, és vele egyenértéknyi mennyiségű nátrium-hidrogén-karbonátot. A reakcióelegyet további 12 órán 40 át 55-60 °C hőmérsékleten tartjuk. Ezután szobahőmérsékletre hütjük, és kétszer 50 ml etil-acetáttal kirázzuk A vizes részt megszűrjük, és a tiszta szűrletet jeges fürdőben körülbelül 0 °C hőmérsékletre hűtjük. pH-ját erélyes keverés közben 3,2-re állít- 45 juk; ekkor a termék sárgás-narancssárga színű csapadék formájában kiválik. Ezt kiszűrjük, vízzel mossuk és szobahőmérsékleten, csökkentett nyomáson megszárítjuk. Ily módon a termék szin és anti formájának keverékét kapjuk (súlya: 153 mg). 50 Az izomereket fordított fázisú szilikagélen kromatografálva választjuk szét, eluens: acetonitrikecetsavivíz = 15:2:83 arányú elegye. Szin-izomer: NMR-spektrum (360 MHz, DMSO-d6): 8 3,65 (m, 2H, C-2 metiléncsoport), 55 3,85 (s, 3H, oxim-metilcsoport), 4,27 (m, 2H, C-3', metiléncsoport), 5,13 (d, 1H, C-6H), 5,82 (q, 1H, C-7H), 6,42 (s, 2H, a tetrazolgyűrűk közötti metiléncsoport), 6,78 (s, 1H, tiazol-H), 7,29 (széles s, 2H, tiazol-aminocsoport) és 9,61 (d, 1H, 7-amid- 60 H). Anti-izomer NMR-spektrum (360 MHz, DMSO- d6): 8 3,60 (m, 2H, C-2 metiléncsoport), 3,95 (s, 3H, oxim-metilcsoport), 4,27 (m, 2H, C-3' metiléncsoport), 4,97 (d, 1H, C-6H), 5,76 (q, 1H, C-7H), 6,33 65 9
