185657. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új cefem-vegyületek előállítására

N

185 657

2

2. Vizelettel és epével kiválasztott hatóanyagmennyiség mérése

A vizelettel kiválasztott hatóanyag mennyiségének mérése során 3-3 patkányból álló állatcsoportoknak orálisan 100 mg/kg vizsgálandó vegyületet adtunk be, majd a kezeléstől számított 24 órán át az állatoktól vizeletmintát vettünk.

Az epével kiválasztott hatóanyagmennyiség mérése során intraperitoneális pentobarbitál-injekcióval altatott patkányokat hátonfekvő helyzetben kikötöttünk, és az állatok epevezetékébe polietilén-csövet helyeztünk. Az állatoknak orális úton 100 mg/kg vizsgálandó vegyületet adtunk be, majd a kezeléstől számított 24 órán át az állatoktól epemintát vettünk. A kapott epeminták antibiotikum-tartalmát 1/15 mólos foszfátpufferral (pH — 7,0) készített standard oldatokkal összehasonlítva határoztuk meg, és kiszámítottuk a kiválasztott hatóanyag százalékos mennyiségét. A kísérleteket 3-3 patkányból álló állatcsoportokon végeztük.

A vizsgálatokhoz a következő vegyületeket használtuk fel :

„A” vegyület: 7-[2-karboximetoxiimino-2-(2-amino-tiazol-4-il)-acetamido]-3-metoxi-cef-3-em-4-karbonsav (szín-izomer), és „B” vegyület: 7-[2-karboximetoxiimino-2-(2-amino-tiazol-4-il)-acetamido]-3-klór-cef-3- -em-4-karbonsav (szín-izomer).

Az észlelt eredményeket a 2. táblázatban közöljük.

2. táblázat

Hatóanyag

Kiválasztott hatóanyag %-os mennyisége

Vizelettel

Epével

Összesen

„A” vegyület

41,62

17,98

59,6

„B” vegyület

35,80

15,52

51,32

A találmány szerinti eljárást az oltalmi kör korlátozása nélkül az alábbi példákban részletesen ismertetjük.

/. példa

0,6 g vízmentes N,N-dimetil-formamidból, 2,4 ml vízmentes etil-acetátból és 1,4 g foszfor-oxikloridból ismert módon előállított Vilsmeier-reagenshez 20 ml vízmentes tetrahidrofuránt és 2,1 g 2-(terc-butoxikarbonil-metoxiimino)-2-(2-formamido-tiazol-4-iI)-ecetsavat (szín-izomer) adunk, és a kapott elegyet 30 percig — 3 °C és +3 °C közötti hőmérsékleten keverjük. Az aktivált savat tartalmazó oldatot kapunk.

2,5 g 7-amino-3-klór-cef-3-em-4-karbonsav-(4-nitro-benzíl)-észter-hidrokloridhoz 50 ml vízmentes etilacetátot és 5,4 g N-(trimetil-szilil)-acetamidot adunk, és az elegyet 20 percig 40 °C-on keverjük. Az így kapott oldatot —10 °C-ra hűtjük, hozzáadjuk az aktivált sav oldatát, majd a reakcióelegyet 30 percig —10 °C és —5 °C közötti hőmérsékleten keverjük. A kapott oldathoz 40 ml vizet adunk, és az elegyet szobahőmérsékleten állni hagyjuk. A szerves fázist elválasztjuk, telített, vizes nátrium-hidrogénkarbonát-oldattal kétszer, majd telített, vizes nátrium-klorid-oldattal egyszer mossuk, ezután magnézium-szulfát fölött szárijuk. Az oldatot szárazra pároljuk, és a maradékot diizopropil-éterrel eldörzsöljük. A kivált csapadékot leszűrjük és szárítjuk. 3,9 g 7-[2-(terc-butoxikarbonil-metoxi-imino)-2-(formamido-tiazol-4-il)-acetamido]-3-klór-cef-3-em-4-karbonsav-(4-nitro-benzil)- 5 -észtert (szin-izomer) kapunk.

Infravörös spektrum sávjai (Nujol): 1780, 1730, 1680, 1640 cm~

NMR-spektrum vonalai (DMSO-dJ: ő— 1,45 (9H, s), 3,93 (2H, q, J - 16,0 Hz), 4,63 (2H, s), 5,26 (1H, ’0 d, J - 5,0 Hz), 5,48 (2H, s), 5,96 (1H, dd, J - 5,0 Hz és 8,0 Hz), 7,45 (1H, s), 7,72 (2H, d, J » 9,0 Hz),

8,28 (2H, d, J - 9,0 Hz), 8,55 (1H, s), 9,72 (1H, d, J — 8,0 Hz) ppm.

2. példa

Az 1. példában ismertetett eljárással, 4,02 g 7-amino-3-metoxi-cef-3-em-4-karbon-sav-(4-nitro-benzil)-észter-hidrokloridból és 3,62 g 2-(ter-butoxikarbonil-metoxiimino)-2-(2-formamido-tiazol-4-il)-ecetsavból (szín-izomer) kiindulva 6,8 g 7-[2-(terc-butoxikarboniI-metoxiimino)~2-(2-formamido-tiazol-4- -il)-acetamido]-3-metoxi-cef-3-em-4-karbonsav-(4- -nitro-benzil)-észtert (szín-izomer) állítunk elő.

Infravörös spektrum sávjai (Nujol): 3400—3150, 1770, 1720, 1680, 1600, 1530 cm-t

NMR-spektrum vonalai (DMSO-dJ: ő = 1,46 (9H, s), 3,70 (2H, széles s), 3,86 (3H, s), 4,66 (2H, s), 5,26 (1H, d, J = 5 Hz), 5,36 (2H, m), 5,70 (1H, dd, J - 5 és 8 Hz), 7,53 (1H, s), 7,65 (2H, d, J = 8 Hz), 8,20 (2H, d, J - 8 Hz), 8,50 (1H, d, J = 8,0 Hz), 9,56 (1H, d, J = 8 Hz) ppm.

3. példa

3.8 g 7-[2-(terc-butoxikarbonil-metoxiimino)-2-(2- -formamido-tiazol-4-il)-acetamido]-3-klór-cef-3-em-4-karbonsav-(4-nitro-benzil)-észterhez (szín-izomer) 40 ml metanolt, 20 ml tetrahidrofuránt és 0,3 ml ecetsavat adunk. A kapott oldathoz 3 ml víz és 1,9 g 10%os palládium/csontszén katalizátor keverékét adjuk, és az elegyet 4 órán át redukáljuk. A katalizátort kiszűrjük, és a szűrletet vákuumban betöményítjük. A maradékhoz etilacetátot és vizet adunk, és az oldat pH-ját telített, vizes nátrium-hidrogénkarbonát-oldattal 7,5-re állítjuk. A vizes fázist elválasztjuk, etilacetátot adunk hozzá, majd 10%-os sósavoldattal pH="2,0-ra savanyítjuk. Az etilacetátos fázist elválasztjuk, telített, vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfát fölött szárítjuk, majd vákuumban bepároljuk, és a maradékot diizopropiléterrel eldörzsöljük. A kivált csapadékot leszűrjük és szárítjuk. 2,31 g 7-[2-(terc-butoxikarbonil-metoxiimino)-2-(2-formamido-tiazol-4-il)-acetamido]-3-klór-cef-3-em-4-karbonsavat (szín-izomer) kapunk.

Infravörös spektrum sávjai (Nujol): 3160, 1780, 1720, 1670 cm-'.

;C

4. példa

6.8 g 7-[2-(terc-butoxikarbonil-metoxiimino)-2-(2- -formamido-tiazol-4-il)-acetamido]-3-metoxi-cef-3- -em-4-karbonsav-(4-nitro-benzil)-észter (szín-izomer),

6