185640. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új pentapeptidek előállítására
1 185 640 2 A leírásban és az igénypontokban, valamint a példákban a következő rövidítéseket alkalmazzuk: Met-ol CH3SCH2CH2CH(CH2OH)NH- képletű L-metioninol maradék, Met(0)-ol CH3S(0)-CH2CH2CH(CH20H)NH-kép- 5 letű L-metioninol-szulfoxid-maradék, MePhe -N-metil-Phe- csoport, (N-propil)-Phe -N-n-propil-Phe- csoport, (N-propil)Phe(p-F) -N-n-propil-p-fluor-Phe- csoport, DMF dimetilformamid, 10 Boc terc-butiloxikarbonil-csoport, Z benziloxikarbonil-csoport. Az általánosan elfogadott nomenklatúrával összhangban minden három betűvel jelzett aminosav-maradék L-konfigurációjú, hacsak másképpen nem jelöljük. 1. példa Na-A midino-Tyr-D-A la-Gly-MePhe-Met ( 0)-ol-acetát 20 1,0 H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-Met (O)-ol-hidrokloridot 10 ml dimetilformamidban feloldunk és 1,9 g 1-amidino- 3,5-dimetilpirazolnitráttal reagáltatjuk 0,5 ml N-metilmorfolin és 0,8 ml trietilamin jelenlétében. 5 nappal 25 később a reakcióelegy pH-ját 5-6 közé állítjuk 1 n ecetsavval és vákuumban szárazra pároljuk az elegyet. A maradékot vízben oldjuk és az oldatot 50 g gyengén savas ioncserélő gyantát tartalmazó kromatográfiás oszlopon engedjük keresztül. 0,1%-os ecetsavas mosás után a 30 terméket 0,1%—95% gradiensű ecetsavval eluáljuk. A cím szerinti terméket tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és liofolizáljuk, így a terméket világos, amorf por formájában kapjuk, mely 140 °C-on bomlik; [aj^ = = -50,8° (c = 0,7, dimetilformamidban). 35 2. példa Na-Amidino-Tyr~Q'Ala-Gly-M?Phe(p-F)-Met(Oj-ol- 40 hidroklorid A cím szerinti vegyületet az 1. példában leírtak szerint állítjuk elő H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe (p-F)-Met(0)-ol-hidrokloridból. [a]o = -29,3° (c = 1, 95%-os ecetsavban). 45 3. példa Na-A midino-Tyr-D-A la-Gly-(N-propil)Phe-Met-ol- 50 hidroklorid 1,04 g N“-amidino-Tyr-D-Ala-NH-NH2-hidroklorid 20 ml dimetilformamiddal készült oldatához -18 °C-on 1.3 ml 8 n dioxános sósavat, majd 0,35 ml terc-butil- 55 nitritet adunk. 10 perces állás után a reakcióelegyet 2.3 ml N-etil-diizopropilaminnal semlegesítjük és 1,5 g H-Gly-(N-propil)Phe-Met-ol hidrokloridot és 0,62 ml N-etil-diizopropilamint adunk hozzá, 15 ml dimetilformamidban előre lehűtve. Az elegyet 1 óra hosszat 60 -15 °C-on további 3 óra hosszat -10 °C-on tartjuk, majd az oldószert vákuumban lepároljuk és a maradékot vízzel felvesszük, néhányszor metilénkloriddal mossuk, A vizes fázist kb. 60 ml-re bepároljuk, polisztirol adszorpciós gyantára adszorbeáljuk, vízzel mossuk, majd vizes 65 metanollal eluáljuk. Szárazra parlas és a metanol-etilacetátos oldatból éterrel való leválasztás után a cím szerinti vegyületet kapjuk: Md =-41,0° (c = l, dimetilformamidban); bomláspont: 90 °C. A fenti eljáráshoz a kiindulási anyagokat a következőképpen állítjuk elő: a) H-(N-propil)Phe-NH-NH-Z-hidroklorid 14.0 g H-Phe-NH-NH-Z-hidroklorid 120 ml metanollal készült oldatához 20 °C-on 10,0 g nátriumcianobcr-hidridet és 5 perccel később 3,2 ml propionaldehidet adunk. 2,5 óra reakcióidő után az oldószert vákuumban lepároljuk, 50 ml vizet adunk a maradékhoz és a pH-t erősen meglúgosítjuk (kb. pH 12) 10 n nátriumhidroxid ol lattal és a terméket metilénkloriddal extraháljuk. Az extraktumot alaposan mossuk vízzel, vízmentes nátriumsz ilfáton szárítjuk és éteres hidrogénklorid feleslegével kezeljük. További éter hatására a kristályosodás teljessé válik, így a cím szerinti terméket kapjuk: [a]“ = +42,5° (c = 1, dimetilformamidban). b) Boc-Gly-(N-propil)Phe-NH-NH-Z 16.8 g Boc-Gly-OH 100 ml tetrahidrofuránnal készült oldatához -20 °C-on 11,8 ml pivaloilkloridot adunk és az elegyet 15 percig -15 °C-on keverjük. 12,5 g H-(N- propi!)Phe-NH-NH-Z és 5,5 ml N-etil-diizopropilamin 50 ml tetrahidrofuránnal készült oldatát adjuk a fenti elegy hez és a reakciókeveréket 1 órán át -15 °C-on, 1 órán át 0 °C-on, majd 20 órát 10 °C-on keverjük. 150 ml 1 n káliumhidrogénkarbonát oldat hozzáadása után a terméket etilacetáttal exíraháljuk, lűg káliumhidrogénkarbonát és káliumhidrogénszulfát oldattal és vízzel mossuk, szárítjuk és az oldószert vákuumban lepároljuk. A cím szerinti vegyületet kromatográfiás úton tisztítjuk kovasavgélen, metilénklorid-metanol elegyével eluálva. c) Boc-Gly-fN-propiljPhe-NH-NHj 21.1 g Boc-Gly-(N-propil)Phe-NH-NH-Z-t 100 ml metanolban palládium katalizátor jelenlétében 1 órán át 2-3 bar hidrogénnyomásnál hidrogénezünk. Az oldószert vákuumban lepároljuk és az amorf maradékot foszforpentoxid és káiiumhidroxid felett vákuumban szárítjuk, így a cím szerinti vegyületet kapjuk: [aJo = — -39,4° (c = 1, dimetilformamidban). d) Boc-Gly-(N-propil)Phe-Met-ol 7.8 g Boc-Gly-(N-propil)Phe-NH-NH2 50 ml dimetil- formamiddal készült oldatához —18 °C on 8,6 ml 8 n dioxános sósavat, majd 2,1 ml íerc-butilnitritet adunk keverés közben. 10 perc állás után -18 °C-on az elegyet 12,0 ml N-etil-diizopropilaminnal semlegesítjük és 5,4 g metioninol (CH3SCH2-CH2CH(NI12)CH20H) 30 ml dimetilformamiddal készült előhűtött oldatát adjuk: hozzá. A reakcióelegyet 3 órán át -10 °C-on tartjuk, majd etilacetáttal hígítjuk, híg káliumhidrogénkarbonát és káliumhidrogénszulfát oldattal és vízzel mossuk, nátriumszulfáton szárítjuk. Az oldószert vákuumban lepároljuk és a terméket kromatográfiásan tisztítjuk kovasavgélen, metilénklorid-metanol eleggyel eluálva, így a cím szerinti vegyületet kapjuk. 3
