185535. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új gonadoliberin-származékok előállítására
1 2 185 535 A találmány tárgya eljárás új gondadoliberin-származékok előállítására. Közelebbről a találmány tárgya eljárás az (I) általános képlett! Glp-His-Trp-Ser-Tyr-X-Leu-Arg-Pro-Y (I) — amely képletben X D-4-klór-fenil-alanil, D-fenil-alanil, D-tiroxil vagy D-tironil csoportot jelent, és Y jelentése glicin-amid vagy 1—4 szénatomos alkil-amid csoport — nonapeptid-alkil-amid, illetve dekapeptid-amid és e vegyületek gyógyászatiig felhasználható savaddíciós sóinak előállítására. A képletekben alkalmazott rövidítések megegyeznek a peptid-kémiában elfogadott nomenklatúrával, amelyet például a J. Biol. Chem. ismertet [241, 527 (1966)]. A továbbiakban alkalmazott egyéb rövidítések: — Cpa = 4-klór-fenil-alanin — Thy = tironin — Thx = tiroxin. A gonadoliberin (a szakirodalomban ismert egyéb nevei: gonadotropin releasing hormon, Gn-RH, luteinizáló és follikulusz-stimuláló hormon releasing hormon, LH/FSH-RH) és e hormon ismert származékainak általános tulajdonsága, hogy képesek a luteinizáló és a follikulusz-stimuláló hormonok (LH és FSH) felszabadítására. Az irodalomból ismeretes [M. Monahan et al., Biochemistry 12, 4616—4620 (1973)], hogy a gonadoliberin azon származékai, amelyek a 6-os helyzetű glicin helyett bizonyos D-aminosavakat tartalmaznak, a gonadoliberinhez viszonyítva megnövekedett hatást mutatnak. Ez a hatásnövekedés legkedvezőbb a 6-os helyzetben D-triptofánt vagy D-terc.butil-szerint tartalmazó ismert származékokban (J. Sandow et al., Control of Ovulation, Butterworths, London, 1978, pp. 49-70). Ismeretes továbbá, hogy a 10-es helyzetben levő glicinamid csoportot alifás szénláncú amid-csoportokkal helyettesítve a gonadoliberin biológiai hatása tovább fokozható [M. Fujino et al., J. Med. Chem. 16, 1144—1147 (1973)]. A találmány célja olyan új gonadoliberin-származékok előállítása, amelyek az ismert származékoknál kedvezőbb biológiai hatékonyságot mutatnak. A találmány további célja a származékok olyan egyszerű eljárással való előállítása, amely a 6-os helyzetű glicin helyére más aminosavak beépítését racemizáció nélkül és jó kitermeléssel teszi lehetővé. A találmány alapja az a felismerés, hogy a fenti cél elérhető, ha a gonadoliberin 6-os helyzetű glicin csoportja helyére D-tiroxil, D-tironil, D-4-klór-ténil-alanil vagy D-fenil-alanil csoportot építünk be. A találmány további alapja az a felismerés, hogy az ilyen gonadoliberin-származékok hatása még tovább növelhető, ha a 10-es helyzetű glicin-amid csoportot 1—4 szénatomos alkil-amid csoportra cseréljük ki. A fentiek alapján a találmány eljárás az (I) általános képletű — Glp-His-Trp-Ser-Tyr-X-Leu-Arg-Pro-Y (I) — amely képletben X jelentése D-tiroxil, D-tironil, D-4-kIór-feniI-alanil, D-fenil-alanil, D-4-3H-fenil-alanil vagy D-3’,5:3,5-3H-trionil csoport, és Y jelentése glicinamid vagy 1—4 szénatomos alkil-amid csoport — nonapeptid-C^-alkil-amid, illetve dekapeptid-amid és e vegyületek savaddíciós sóinak és komplexeinek az előállítására, amely abban áll, hogy valamely (II) képletű Glp- His-Trp-Ser-Tyr-N3 (II) pentapeptid-azidot valamely (III) áltlános képletű X-Leu-Arg-Pro-Y (ül) — amely képletben X és Y jelentése a fenti — tetra- vagy penta-peptiddel kondenzálunk, és a képződött nona-, illetve dekapeptid-amidot kívánt esetben gyógyászatilag elfogadható savval reagáltatva savaddíciós sóvá alakítjuk, vagy kívánt esetben a savaddíciós sóból bázissal reagáltatva felszabadítjuk a szabad bázist, és kívánt esetben a kapott nona-, illetve dekapeptid-amidot fémkomplexszé alakítjuk. A D-Phe6-gonadoliberin és a D-Tny6-gonadoliberin-származékok célszerűen a D-Cpa6-gonadoliberin, illetve a D-Thx6-gonadoliberin-száramzékok hidrogénnel végzett redukciójával állíthatók elő. A redukciót célszerű hidrogénnel végezni, katalizátor jelenlétében. Ha a redukciót tríciumgázzal katalizátor jelenlétében végezzük, a D-Thx6-gonadoliberinből a D-Thy6-gonadoliberin tríciummal specifikusan jelzett formája, míg a D-Cpa6-goradoliberin tríciummal specifikusan a 6-os helyzetű D-aminosavak aromás oldalláncában jelzett alkja állítható elő. Ezek a nagy fajlagos radioaktivitású gonadoliberin származékok igen előnyösen felhasználhatók különböző vizsgálatokhoz, valamint diagnosztikumként. A (II) képletű pentapeptid komponenst célszerűen piroglutamil-hisztidil-triptofán-azid és szeril-tirozin-metilészter kondenzációjával állíthatjuk elő. E módszerrel a nem kívánatos racemizáció elkerülhető. A kiindulási vegyületként felhasznált piroglutamil-hisztidil-triptofánt pirogíutaminsav és (N-imidazol-dinitro-fenil)-hisztidil-triptofán-metilészter kapcsolásával állíthatjuk elő. A (ül) általános képletű tetra- vagy pentapeptidet célszerűen úgy állíthatjuk elő, hogy az irodalomból [N. Yanaihara et al., J. Med. Chem. 16, 373 (1973)] ismert Leu-Arg-Pro-Y általános képletű — amely képletben Y jelentése a fenti — tri- vagy tetrapeptidet a peptid-kémiában általánosan alkalmazott kapcsolási módszerrel amino-csoportján Boc vagy Z védőcsoporttal ellátott X aminosavval — ahol X jelentése a fenti — acilezzük. A találmány tárgya továbbá eljárás az I általános képletű vegyületek átalakítására gyógyászati kompozíciókká. Ezt az átalakítást célszerűen úgy végezzük, hogy valamely (I) általános képletű vegyületet vagy annak gyógyászatilag elfogadható sóját a gyógyszerkészítésben szokásos hordozó és/vagy vivőanyagokkal összekeverve tabletta, drazsé, kapszula, kúp, injekciós oldat, orrpermet stb. alakjában gyógyászati készítménnyé alakítjuk. Az (I) általános képletű gonadoliberin-származékok szarvasmarhák esetén egyszeri intramuszkuláris, szubkután vagy intravénás injekcióban 5—200 jtg dózis-tartományban hatékonyak. A találmány szerinti eljárás főbb előnyei a következők: a) Az eljárással előállított új gonadoliberin-származékok szarvasmarhákon és nyulakon végzett szaporodásbiológiai kísérletek szerint azonos hatékonyságúak, ill. hatékonyabbak az eddig ismert gonadoliberin-származékoknál. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
