185404. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pertusszisz toxoid előállítására
1 185 404 2 1. táblázat leukocitózis gyorsító egység, a „Medicine and Biology”, 83, 117-123 irodalmi helyen ismertetett módszer szerint meghatározva), és nem elfogadható, ha ettől eltérő. Hasonlóan, HSF érték elfogadható, ha nem több mint 0,8 HS-egység/ml (HS-egység: hisztamin szenzitizáló egység a „Journal of Biological Standardization”, 7, 21-29, 1979 irodalmi helyen ismertetett módszer szerint meghatározva) és nem elfogadható, ha ettől eltérő. Az egérvédési hatás (az Am. J. Public health 37, 803-810, 1947 irodalmi helyen ismertetett módszer szerint mérve), hasonlóan statisztikai értékelés után, akkor elfogadható, ha értéke legalább 8 nemzetközi egység milliliterenként vagy ennél több (3 héttel az immunizálás után), és nem elfogadható, ha ettől eltérő. Amint a 2. táblázatból kitűnik, a találmány szerinti detoxifikáiási eljárással dolgozva 14 egymást követő eljárásban nem kaptunk el nem fogadható LPF, HSF és egérvédési hatás-értékű terméket, az átlagos érték 13,5 nemzetközi egység volt milliliterenként. Ezzel szemben, amikor L-lizint adtunk az elegyhez, 23 termelési ciklus terméke esetén 4 esetben az LPF érték, 8 esetben a HSF érték és 10 esetben az egérvédési hatás érték nem volt megfelelő, az átlagos elfogadhatósági érték 6/23=26 % volt. A használt Cohen—Wheeler táptalaj összetétele 5 Oldható keményítő NaCl K H2P04 MgCi2.6H20 CaCl2 10 CuS04.5H20 Nátrium-L-glutamát Nikotinamid Kazein 1 5 Cisztein-hidroklorid Tris-puffer 225 g 375 g 75 g 750 ml (8 súly/térf.%-os oldat) 75 ml (2 súly/térf.%-os oldat) 112,5 ml (0,1 súIy/térf.%-os oldat) 30 g 4.5 g 1800 g 4.5 g 12,5 1 A táblázatban szereplő anyagokat desztillált vízzel 150 1-re hígítottuk, pH-ját 7,0 és 7,2 közötti értékre állí- 20 tottuk be és sterilizáltuk, majd a következő anyagokat adtuk hozzá-Glutation (redukált forma) 50 ml (1 súly/térf.%os oldat) FeS04.7H20 50 ml 25 (1 súly/térf.%-os oldat). 2. táblázat Találmány szerinti eljárás De'oxifikálás L-lizin hozzáadásával LPF HSF Egérvédési hatás LPF HSF Egérvédési hatás LPF HSF Egérvédési hatás 0 0 8,0 X X 4,2 A 0 0 3,0* 0 0 14,5 X X 6,9 0 0 3,0* 0 0 12,8 0 X 11,3 0 0 7,0 0 0 10,0 0 X 10,0 0 0 5,0 0 0 12,0 0 X 10,2 0 0 2,2* 0 0 15,0 0 X 1,5* 0 0 8,4 0 0 13,0 X X 8,0 0 0 2,0* 0 0 18,0 X 0 7,5 0 0 3,0* 0 0 11,0 0 X 14,1 0 0 1,8* 0 0 12,2 0 0 4,5* 0 0 15,2 0 0 4,5* 0 0 14,3 0 0 8,0 0 0 18,1 0 0 7,7 0 0 15,5 0 0 5,9 Átlagérték 13,5 Átlagérték: 8,2 Átlagérték: 4,7 LPF 0: Kevesebb, mint 0,5 LPegység/mlnek megfelelő x: más mint 0 (nem elfogadható) HSF 0: Kevesebb mint 0,8 HS egység/ml-nek megfejelő x: más mint 0 (nem elfogadható) Egérvédési hatás: nemzetközi egység/ml * : nem megfelelő hatás (nem elfogadható) 4
