185404. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pertusszisz toxoid előállítására
Az 1. példában leírt módon nyert pertusszisz toxoidot tartalmazó folyadékot, a Japanese Biological Products Standard-nak megfelelő diftéria toxoidot tartalmazó folyadékot és ugyanolyan minőségű tetanusz toxoidot az 1. példában leírt módon kicsapásos kezelésnek vetettünk alá, és így kicsapott tisztított kombinált pertusszisz-diftéria-tetanusz vakcinát állítottunk elő. A kombinált vakcina összetétele a következő volt: Pertusszisz toxoid: fehérje eredetű nitrogéntartalom: kb. 15 jig/ml Diftéria toxoid: kb. 30 Lf/ml Tetanusz toxoid: kb. 5 Lf/ml Alumínium: kb. 0,2 mg/ml Tiomerzál- 0,01 sűly/térf.%. Az előállított kombinált vakcina alapvető tulajdonságai a következők: pH = 7,0; pirogenicitás nyúlon (50-szeresre hígítva, fiziológiás sóoldattal, intravénásán lml/testsúly kg dózisban adagolva) negatív; egér testsúly csökkenés kevesebb mint 10 BWDU/ml (BWDU = testsúly csökkentési egység, a J. Med. Sei. Bioi. 21, 115-135 irodalmi helyen ismertetett módszer szerint mérve): egér leukocitózis gyorsító aktivitás kevesebb mint 0,5 LPU/ml; egér hisztamin szenzitizáló aktivitás kevesebb mint 0,8 HSU/ml; pertusszisz toxoid tartalom 8 nemzetközi egység/ml; diftéria toxoid tartalom 45 nemzetközi egység/ml; tetanusz toxoid tartalom 30 nemzetközi egység/ml. A kombinált vakcinát embereknek lehet adagolni pél dául a következő ütemezés szerint: 3-48 hónapos gyerekeknek 0,5 ml vakcinát adunk be szubkután úton 3-szor 2—8 hetes időközönként. 12-18 hónappal az utolsó oltás után további 0,5 ml vakcinát adunk be szubkután úton minden gyermeknek. 2. példa 1. Eljárás pertusszisz toxoid előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely Bordetella pertussis I törzs, előnyösen Bordetella pertussis Tokama I (lFO-14073) törzs tenyészetének dializált vagy dializálatlan felülúszójából vagy annak koncentrátumából fajsúly- vagy molekulasúly különbségen alapuló módszerekkel eltávolítjuk az endotoxint, és az így kapott folyadékot formaldehiddel keverjük úgy, hogy a formaldehid koncentrációja 0,1 és 0,6 térfogat% között legyen, majd az elegyet 32 °C és 42 °C közötti hőmérsékleten az exotoxin detoxifikálódásáig, előnyösen 3—14 napig inkubáljuk és ilyen módon a pertusszisz exotoxint flokkuláljuk, és kívánt esetben a ílokkulált exotoxint tartalmazó szuszpenziót dializáljuk, és kívánt esetben a dializált vagy dializálatlan, a ílokkulált exotoxint tartalmazó szuszpenziót előnyösen ultrahangos kezeléssel diszpergáljuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatos!tási módja, azzal jellemezve, hogy az endotoxin eltávolítását úgy végezzük, hogy a tenyészet felülúszóját vagy annak koncentrátumát 0 és 60 súly% közötti szacharóz fajsúly-gr idiens mellett 62000 és 122000 gközötti értéknél 10-24 óra hosszat centrifugáljuk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a ílokkulált anyagot ultrahangos kezeléssel diszpergáljuk a képződő szuszpenzióban. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy egy dializáló kezelést iktatunk a megfelelő lépések közé. 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a tenyészet felülúszójának koncentrátumát oly módon készítjük, hogy a felülúszót ammónium-szulfáttal kisózzuk. 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy Bordetella pertussis I törzsként Bordetella pertussis Tohama I (IFO-14Q73) törzset használunk. Szabadalmi igénypontok 5 10 15 20 25 30 35
