185379. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új luteotróp releasing faktor monapeptid és dekapeptid származékainak előállítására
1 185 379 2 kor nedves granulátumot kapjunk. A teljes összekeverést követően a granulátumot tálcás vagy fluid-ágyas szárítóban szárítjuk. A száraz granulátumot szitáljuk, hogy a nagyobb aggregátumokat kiszűrjük, és a maradék komponensekkel összekeveijük. Ezután standard tablettázó berendezéssel specifikus súlyú tablettákká préseljük. b) E módszer szerint amennyi kompozíció 0,01% zselatint, USP-t tartalmaz. A zselatint a vizes granulátumot tartalmazó oldószerben az LH-RH analóg hozzáadása előtt először feloldjuk, majd az a) pont szerinti módon járunk el. A 4. kompozíciót tablettaként orális adagolási célokra is használhatjuk. B) Tartós hatású intramuszkuláris injekciós kompozíció 1. Tartós hatású,intramuszkuláris injektálható szezám olaj, gél LH-RH analóg 1,0 mg alumínium-monosztearát, USP 20,0 mg szézánr olaj q.s. 1,0 ml. Alumínium-monosztearátot szézám olajjal összekeverünk és keverés közben 125 °C-on addig melegítjük, hogy tiszta,sárga oldató1' kapjunk. Ezután autoklávban sterilizáljuk és hagyjuk lehűlni, majd az LH-RH analógot aszeptikusán, péppé keverve hozzáadjuk. Különösen előnyösen az LH-RH analógok kevéssé oldható sóit, pl. cink-, cink-tannát-, pamoát sóit, valamint ezekhez hasonlókat használunk. E kompozíciók nagymértekben tartós hatásúaknak bizonyulnak. 2. Tartós hatású intramuszkuláris injektálható, biofázisban lebomló polimer mikrokapszulák LH-RH analóg 1 % 25/75 glikolid/laktid kopolimer 99% (belső viszkozitása 0,5) A fenti kompozícióból készült mikrokapszulákat (0—150 fi) az alábbi rendszerben szuszpendáljuk. dextróz 5,0% CMC, nátrium 0,5% benzil-alkohol 0,9% Tween 80 0,1 % tisztított víz, q.s. 100,0% C) Vizes oldat intramuszkuláris injekciós kompozíció készítése LH-RH analóg 25 mg nem-antigén tulajdonságú zselatin 5 mg víz q.s. 100 ml. A zselatint és LH-RH analógot feloldjuk az injekciós kompozició céljára megfelelő vízben, majd sterilen szűrjük az oldatot. D) Vizes oldat nazális adagolási! kompozíció céljára LH-RH analóg 250 mg dextróz 5 gm benzil-alkohol 0,9 gm tisztított víz q.s. 100 ml. Az LH-RH analógot, dextrózt, benzil-alkoholt a tisztított vízben feloldjuk, majd a megadott térfogatra kiegészítjük. E) Rckúíiis adagolásra alkalmas kompozíció kúp-kötőanyag rektális alkalmazás esetén LH-RH analóg 500 pg WitepsolH15 20,0 gm. Az LH-RH analógot olvadt Witepsol H15-tel keverjük, és 2 gm-ás formákba öntjük. 9. példa Ösztrusz-szupresszió vizsgálata patkányokban Módszer: nőstény patkányokat (kb. 200 g súlyú, nyitott hüvelyű Hilltop, Sprague Dowley fajták) súlycsoportokba sorolunk: 5/ketrecenként és 2 ketrec/csoportonként. A patkányokat szubkután 14 napon át, naponta kétszer (hacsak alább nincs egyéb megjegyzés) kezeljük. Naponta hüvelykenetet veszünk, hogy az ösztrusz-ciklus stádiumát meghatározzuk; továbbá a 0, 1. és 2. héten testsúly méréseket végzünk. Azoknak a nőstényeknek a számát, amelyek a 4. naptól részleges ösztrusz-szupreszsziót (azaz csak diösztruszt és proösztmszt, de ösztruszt nem), s úgyszintén azokét, amelyek a 4. naptól teljes ösztrusz-szupressziót (azaz csak diösztruszt) mutatnak, %-ban kifejezve megadjuk. Az ösztrusz-szupressziót kifejező százalékos adatokhoz legjobban simuló egyenesből az ED50 értéket meghatározzuk. Az LH-RH analógokat ecetsavas sójuk formájában 0,1% szarvasmarha szérum albumint tartalmazó fiziológiás sóoldatban adagoljuk. A kontrol! állat (szarvasmarha szérum albumint tartalmazó fiziológiás sóoldattal kezelt) nem mutat ösztrusz-szupressziót. A részleges és teljes ösztrusz-szupresszióra vonatkozó EDS0 értékeket a következő táblázatban foglaltuk össze: Vegyidet EDS0 (pg/inj.) (piro)-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-3-(2-naftil)D-alanil-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2 0,08 (piro)-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-3-(2-naftil)D-alaníl-Leu-Arg-Pro-NHEt 0,22 (piro)-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-3-(2-naftil)D-alanil-N-McLeu-Arg-Pro-Gly-NH2 0,07 (piro)-G!u-His-Trp-Ser-Tyi'-3-(2-naftil)D-alanil-N-MeLeu-Arg-Pro-NHEt 0.12 (piro)-Glu-HisTrp-Ser-Tyr-3-(2.4,6-trimetíl-fenilJ-D-alanil-Leu-Arg-Pro-Gly-NHj 0,08 (piro)-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-3-(l-naftil)D-alanil-Leu-Arg-Pro-Gly-NH 0,3 (piro)-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-3-(9-antril)D-alanil-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2 0,27 (piro)-Ghi-His-Trp-Ser-Tyr-3-(4-bifenil-il)D-alanií-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2 0,283 (piro)-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-3-(2-fluorenil)D-alanil-Leu-Arg-Pro-G!y-NH2 0,403 (piro)-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-3-(2,2-difenilmetil-D-alanil-Leu-Arg-Pro-Gly-NHEt o, 11 (piró)-GluHis-Trp-Ser-Tyr-3-(2.4.6-trimetil-fenil)-D-alanil-N-MeLeu-Arg-Pro- Gly-NHí 0,35a (piro)-Glu-His-3-(l-naftii)-L-alanil-Ser-Tyr- 3-(2-naftil)-D-alanil Leu-Aig-Pro-NHEt 0,16 a = E vegyületeket naponta egyszer adagoltuk. 10. példa Hat, egyenként kb. 25 g súlyú Swiss—Webster (Simonsen) egeret 0,25 ml (piro)-G!u-His-Trp-Ser-Tyr-3-(2- naftil)-D-alanil-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2 ecetsavas sójának vizes oldatát tartalmazó szubkután injekcióval, 40 mg/kg 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 12
