185321. lajstromszámú szabadalom • Eljárás farmakológiailag hatásos enkefalin analógok előállítására
1 185 321 2 A jelen találmány új enkefalin analógok előállítására szolgáló eljárásra vonatkozik, ezek az új vegyületek fájdalomcsillapító hatással rendelkeznek. A közelmúltban a morfinhoz hasonló tulajdonságokkal rendelkező endogén anyagokat extraháltak emlősök agyszövetéből vagy agy- és gerincvelő folyadékából (csf.) Ezeket az anyagokat énkefalinnak nevezik. Azonosításukat Hughes és munkatársai végezték el [Nature, 258, 577 (1975)] és ezek az anyagok az alábbi összetételű pentapeptideknek bizonyultak: H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-OH, H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-OH. A fenti vegyületeket metionin-enkefalinnak, illetve leucin-enkefalinnak nevezik. Jóllehet a metionin- és a leucin-enkefalin analgetikus hatást mutattak egéren intracerebroventrikulárls (agykamrában történő) alkalmazás esetén [Buscher és munkatársai: Nature, 261, 423 (1976)], a szóbanforgó vegyületeknek nincs gyakorlatilag hasznosítható analgetikus Itatásuk, ha azokat parenterálisan alkalmazzák. Ennélfogva az enkefalinok felfedezése óta eltelt idő alatt komoly erőfeszítések történtek annak érdekében, hogy enkefalin-analógokat állítsanak elő, abban reménykedve, hogy majd találnak fokozott aktivitással rendelkező és a gyakorlatban is alkalmazható vegyületeket, melyek parenterális vagy orális beadás esetén is hatásosak. Dutta és munkatársai [Life Sciences, 21, 559-562 (1977)] bizonyos szerkezeti módosításokról számoltak be, melyek - véleményük szerint - a hatásosság növekedését eredményezik. Javaslatuk szerint a szóbanforgó vegyületek aktivitását növelni lehet az alábbi műveletekkel, akár külön-külön, akár együttesen: (a) a 2-helyzetben levő Gly helyettesítése bizonyos D- vagy a-aza-aminosavakkal; (b) a terminális karboxilcsoport átalakítása metilészterré vagy amiddá; (c) a 4-helyzetben levő Phe módosítása a-aza-helyettesítéssel, N-metiiezéssel vagy az aromás gyűrű hidrogénezésével. A fentieken túlmenően Roemer és munkatársai [Nature, 268, 547—549(1977)] hasznos módosításként a Met5-nek a megfelelő karbinoliá történő átalakítását, illetve a Met kénatomjának szulfoxiddá való oxidációját ajánlották. További és jelentős szerkezeti módosításokat ismertetnek a 859,026 számú belga szabadalmi leírásban. Az említett leírásban az enkefalin-analógok aktivitásának növelésére és az alkalmazási lehetőségek bővítésére a molekula 2-helyzetébe egy D-aminosavgyök (maradék) bevezetését, a terminális karboxilcsoport amiddá történő átalakítását és az 5-helyzetű aminosavrész N-alkilezését javasolják. Kutatásaink során az enkefalinanalógok olyan csoportját fedeztük fel, amelyek nagyfokú analgetikus aktivitással rendelkeznek. Ezek az analógok az említett analgetikus hatásukon túlmenően a morfin (p) receptorhoz vaió kötődési tulajdonságok jellemzőivel összehasonlítva még az enkefalin (5) receptorhoz való nagyfokú kötődési képességükkel is kitűnnek. Az analóg vegyületek ezen csoportjánál ezért a morfinjellegű mellékhatások kisebb mértékűek. A fokozott enkefalinreceptor aktivitás miatt a szóbanforgó vegyületek igen hasznosak a skizofrénia kezelésében. Ezek az enkefalin- 2 analógok gyűrűben helyettesített fenil-alanint tartalmaznak és a helyettesítés mind a helyettesítő, mind annak kapcsolódási helyzete szempontjából nagymértékben specifikus. Nevezetesen: a szóbanforgó analóg származékok pentapeptidek, melyek a peptidmolekula 4-helyzetében egy meta-szubsztituált-L-fenil-alaningyököt tartalmaznak. A szakirodalomból még további, gyűrűben helyettesített 4-fenil-alanil-enkefalin analógok is ismertek, de ezek közül egyik sem meta-helyettesített-fenil-alanil-enkefalinszármazék. így Day A. R. és munkatársai [Res. Comm. in Own. Path, and Pharmacol. 14 (4), 597—603 (1976)] a H-Tyr-Gly-Gly-p-CIPhe-Nle-OH képletű vegyületet ismertetik. Miller R. J. és munkatársai [Vitamins and Hormones 36, 297—382, Academic Press (1978)] a H-Tyr-D-Ala-Gly-pCIPhe-D-Leu-OH a H-Tyr-D-Ala-GlypClPhe-D-Leu-OMe és a H-Tyr-D-Ala-Gly-pClPhe-D-Leu- NHEt képletű vegyületeket említik. Pless és munkatársai a 15. Európai Peptidszimpózium alkalmából [1978. szeptember 4-9., Gdansk, Lengyelország] tartott „Opioid Activity of Enkephalin” című előadásukban a H-Tyr-D-Ala-Gly-pClPhe-Met(0)-olról számoltak be. Coy D. H. és munkatársai [BBRC 83 (3), 977-983 (1978)] a H-Tyr-D-Ala-Gly-FsPhe-Met-NH2 képletű vegyületet említik. A 77/0579 számú dél-afrikai szabadalmi leírás általánosságban olyan enkefalin-analóg \ pentapeptideket ismertet, melyekben a fenil-alanin-rész gyűrűje sokféle helyettesítőt tartalmaz. A 886,677 számú belga szabadalmi leírásban ismertetés és szabadalmi oltalomra irányuló igény is található olyan pentapeptid enkefalin-analógok vonatkozásában, melyek para-helyzetű fluoratommal helyettesített fenil-alanin-részt tartalmaznak. Miller R. a 176. Amer. Chem. Soc. Nat’l. Mtg. [1978. szeptember 11 — 14., Miami Beach, Florida, Amerikai Egyesült Államok] alkalmából tartott „Structural Pharmacology and Neurobiology of the Enkephalins and Endorphins” című előadásában bizonyos enkefalin-analógokat ismertetett, melyek a peptid 4-helyzetében egy para-helyzetű helyettesítőt hordozó fenilalanint tartalmaznak; különösen kiemelte ezek közül a p-klór- és a p-bróm-helyettesítővel helyettesített fenilalanint tartalmazó vegyületeket. Meitzer és munkatársai [Life Sciences 22, 1931-1938 (1978)] néhány enkefalinanalógot, így különösen kétféle p-klór- és egy p-metoxihelyettesítővel helyettesített fenil-alanint tartalmazó analóg származékot ismertetnek. A fentiekben felsorolt közleményekben és előadásokban azonban egyáltalán nem ismertetik az I általános képletű vegyületeket. Azt találtuk, hogy az enkefalin analógok fájdalomcsillapító hatásának mértéke és egyéb tulajdonságai tekintetében mind az L-fenil-alanin gyűrűjében lévő helyettesítő milyenségének, mind az említett helyettesítő helyzetének szignifikáns szerepe van. A jelen találmány tárgya ennélfogva eljárás új enkefalin analógok, közelebbről az I általános képletű új vegyületek és gyógyászatban alkalmazható savaddíciós sóik előállítására. Az 1 általános képletben A jelentése D-alanilcsoport, X jelentése klór-, bróm- vagy jódatom, 1—3 szénatomos alkilcsoport, trifluor-metil-csoport vagy 1-2 szénatomos alkoxicsoport; B és Z együttesen N-metil-metionin-amid- vagy feiillglicin-amid-csoportot jelentenek. Az eljárást az jellemzi, hogy a megfelelően védett I általános képletű vegyületről a védőcsoportokat erre 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
