185307. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vinkaleukoblasztin-származékok előállítására
1 185 307 2 dákot kapunk. A desztillációs maradékból kromatográfiával három anyagot izolálunk. Az első a VLB (111,6 mg). A második termék 30,8 mg 4'-acetil-amino-VLB, végül a harmadik termék 36,2 mg leurozidin (váratlan átalakulás következett be a VLB kiindulási anyag C-4'-atomján a reakcióelegyben jelenlévő hidroxilionok miatt, vagy a feldolgozás során, a hidroxilionok reagáltak a karbóniumionnal). — Ä fentiekhez hasonlóan végzett előállítás során keletkező 4'-acetil-amino-VLB az alábbi fizikai jellemzőkkel rendelkezik: tömegspektrum: m/e = 863, 848, 849, 820, 806, 807,792,777, 733, 732* 674. A CDCl3-ban vizsgált mágneses magrezonanciaspektrum (S): 1,87 (szinglett, acetil-metil), 2,09 (szinglett, acetoxi), 2,74 (N-l-metil), 3,60 (karbometoxi), 3,78, 3,80, 5,25 (multiplett), 5,46 (szinglett, 1H), 5,85 (multiplett), 6,09 (gyűrűben lévő hidrogénatom), 6,40 (NH), 6,51 (gyűrűben lévő hidrogénatom). A kloroformos oldatban vizsgált infravörös abszorpciós spektrum (v): 3675, 3435, 3400 (széles), 1740, 1660 (amid), 1618, 1585, 1505, 1460, 1440, 1375, 1045 cm *. A fenti eljárást megismételjük, azzal a különbséggel, hogy 1 ml vízmentes acetonitrilben 16,1 mg leurozidint oldunk, az oldathoz 15 csepp, 18 mólos kénsavat adunk. A terméket arányosan kisebb mennyiségű reagenseket használva, az előzőek szerint izoláljuk és tisztítjuk, ami után ismét 4'-acetil-amino-VLB-t kapunk. A fenti eljárást más kiindulási vegyületekkel is elvégezhetjük, ekkor a VLB vagy a leurozidin helyett például VLB-3-N-metil-karbonsav-amidot, 4-dezacetil-vinkrisztin-3-karbonsav-amidot, 4-dezacetil-leurozidin-3-N-(2-hidroxi-etil)-karbonsav-amidot, vagy más hasonló vegyületeí használunk. Hasonlóképpen, az acetonltril helyett használhatunk butironitrilt vagy izo-butironitrilt, minden esetben a megfelelő 4'-acil-amino-származékot kapjuk meg. 2. példa A 4’-formil-amino-VLB és 4'-formil-amino-4-dezacetil- VLB előállítása 5 5 ml folyékony halmazállapotú hidrogén-cianidhoz 16,7 mg VLB-szulfátot adunk. Az oldathoz ezután 3 ml bór-trifluor-eterátot adunk, és a kapott, átlátszó, halványsárga színű oldatot 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Csökkentett nyomáson kivitelezett desztillációval eltávolítjuk az illékony összetevőket. A desztillációs maradékként kapott elegyhez vizet adunk, a vizes oldat pH-ját 14 mólos, vizes ammónium-hidroxid-oldattal bázikusra állítjuk be. Az oldatot négyszer azonos mennyiségű metilén-dikloriddal extraháljuk. Egyesítjük a metilén-dikloridos extraktumokat, és az oldószert desztillációval eltávolítjuk. A kapott desztillációs maradékot toluollal végzett azeotrop desztillációval vízmentesítjük, ily módon 87,7 mg vízmentes terméket kapunk. A terméket preparatív vékonyréteg-kromatográfiával szétválasztjuk, az eluálást éter, toluol, dietil-amin és metanol 20:1:1:1 arányú elegyével végezzük. Ily módon négy termékhez jutunk. Ezek az eluálódás sorrendjében a következők: VLB, 4-dezacetil-VLB, 4'formil-amino- VLB és 4'-formil-amino-4-dezacetil-VLB. A 4'-formil-amino-VLB az alábbi fizikai jellemzőkkel rendelkezik: tomegspektrum: m/e = 851 (transzmetileződés), 837, 806. 793, 792, 778, 733, 732, 678, 633, 575, 495, 494, 469,381,379, 336, 332, 180, 167, 149, 135, 111. A kloroformos oldatban vizsgált infravörös abszorpciós spektrum a következő: 3670, 3470, 3390 (széles), 1735, 1680,1615,1500,1455,1435,1370,1040 cnf1. A 4'-formil-amino-4-dezacetil-VLB az alábbi fizikai jellemzőkkel rendelkezik: t ámegspektrum: m/e = 809 (transzmetileződés), 795, 751 750, 737, 736, 690, 688, 649, 633, 598, 553, 427, 382, 379, 366, 336, 295, 240, 188, 180, 174, 149, 135, 117 A kloroformos oldatban vizsgált infravörös abszorpciós spektrum a következő: 3670, 3550, 3470, 3390, 1735, 1680, 1615, 1500, 1460, 1435, 1370, 1100, 1043, 1010 cm“1. 3, példa A 4'-metil-tio-acetil-amino-VLB előállítása 4,0 ml metil-tio-acetonitriiben 315,6 mg VLB-szuI- fátct oldunk. 18 mólos, vizes kénsavból 50 cseppet adu ik az oldathoz, majd ezt követően 15 percen át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Ezután 20 ni, 7 g szilárd, vízmentes nátrium-karbonátot tartalmazó, vízmentes metanolhoz öntjük a reakcióelegyet. 1,5 órán át keverjük a reakcióelegyet, ezután 100 ml telített, vizes nátrium-klorid-oldatot adunk hozzá. Ezt az elegyet 200 ml-re egészítjük ki vízzel. A kapott vizes, alkeiikus elegyet azonos térfogatú toluollal négyszer extiáltáljuk, Összegyűjtjük a toluolos extraktumokat, a toluolt csökkentett nyomáson desztillálva eltávolítjuk, ami után 176,7 mg desztillációs maradékot kapunk. Ezt preparatív vékonyréteg-kromatográfiával tisztítjuk, oldószer elegyként etil-acetát és metanol 1:1 arányú elegyét használjuk. A 4'-metil-inerkapto-acetil-amino-VLB-t tart tlmazó frakciókat egyesítjük, és az oldószert csökken ett nyomáson desztillálva eltávolítjuk. Ily módon 18,4 mg 4'-metil-tio-acetil-amino-VLB-t kapunk, amelynek az alábbi fizikai jellemzői vannak: nfravörös abszorpciós spektrum (kloroformos oldathat): 3660, 3470, 3360, 1735, 1655 (amid), 1610, 15L0 cm Tömegspektrum: m/e = 911 (transzmetileződés), 895, 86' , 838, 792, 751, 734, 634, 525, 469, 336, 282, 235, 149 és 135. \ fenti reakció során más alkil-tio-alkil-nitrileket is használhatunk, mint például metil-tio-propio-nitrilt, etiltío-acetonitrilt és más hasonlókat, a megfelelő 4,-alkiltio acil-amino-VLB, vinkrisztin vagy amidjaik előállítására. 4. példa A 4'-metoxi-karbonil-ureido-VLB előállítása 3 ml folyékony halmazállapotú hidrogén-cianidban szobahőmérsékleten 99,8 mg VLB-szulfátot oldunk. Az oldathoz 25 csepp, 18 mólos, vizes kénsavat adunk, az így kapott elegyet 18 órán át szobahőmérsékleten 3 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
