185230. lajstromszámú szabadalom • Eljárás farmakológiailag hatásos enkefalin-analóg peptidek előállítására
1 185 210 2 Aminosav-analí/.is: 1,00 Gly; 1,00 Tyr; 1,00 NH3; 1,08 Pgl; 92,8% pepiid. 9. példa L-Tirozil-D-alanil-glicil-L- ( N-n-propi! )fenilahmil-L-fenilglicin-amid-acetát A 8. példa eljárásával 478 mg termékei kapunk, melynek jellemzői a következők: [a];,5 = 4- 25,49 (c — 0,5; 1 n sósavoldat) . [^Íjö5 = +87,45 (c = 0,5 1 n sósavoldat). Elemi analízis a C3öH46N608 (690,798) képlet alapján: C H N Számított 62,59 6,71 12,17 talált 62,33 6,43 12,45 Aminosav-elemzés: 0,99 Gly; 1,01 Alá; 1,02 Tyr; 1,11 NH3; 0,98 Pgl; 90% peptid. 10. példa ( N-Melilj-L-tirozil-D-aland ~glici!-L-( N-metil)fenilalanil-L-fenilglicin-ainid-acetát A 8. példa eljárásával 676 mg terméket kapunk. Jellemzői a következők: [a]p = +30,9° (c = 0,5; metanol) [aj3ös == + 1 16,4° (c = 0,5; metanol). Elemi analízis a C33H44N608 (676,776) képlet alapján: C H N Számított 62,11 6,55 12,42 talált 62,39 6,13 12.28 Aminosav-analízis: 1,01 Gly; 0,99 Alá; 1.04 NH3; 0,96 Pgl; peptid 92%. 12. példa (N-Melil)-L-íirozil D-alanil-glicil-L-(N-melil)fenilalanil-D-fenilglicin-anid-acetát A 8. példa eljárását használva 782 mg termékei kapunk, melynek jellemzői a következők: [a][j = -26,0° (c = 0,5; metanol) [a]365 = ~ 105,3° (c = 0,5;melanol). Elemi analízis a C35H44Ne08 (676,776) képlet alapján: C H N Számított 62,11 6,55 12,42 talált 61,86 6,74 12,75 Aminosav-elemzés: 1,01 Gly: 0,99 Alá; 1.15 NH3; 1,00 Pgl; 92% peptid. Az I általános képlelíí vegyületek fájdalomcsillapító hatását egéren imitáljuk a forró lemezes próba segítségével. E próbában az egeret függőleges akrilhengerbe tesszük, amely alul 52 °C-on tartott fémlemezt tartalmaz. Az egérnek orálisan vagy szubkutánjnjekcióval alkalmas hordozóanyagban oldott vagy szuszpendált, meghatározott mennyiségű vizsgálandó vegyületet adunk be, és a vegyület beadása után 15 perc múlva az egeret a forró lemezfelületre tesszük. Meghatározzuk az időt (másodpercekben), amely a forró lemezről való felugrásig eltelik. Fájdalomcsillapító hatású anyagok növelik a látens időt, a csak hordozóanyaggal kezelt kontroll egerekhez hasonlítva. Ennek olyan dózistartományban kell bekövetkeznie, ami nem okoz mozgási koordinálatlanságot vagy képtelenségeket. A következő táblázat a fenti próbában kapott eredményeket tartalmazza: 1. táblázat Fájdalomcsillapító hatás, forró lemezes próba EDS0, mg/kg Vegyidet szubkután 1. példa 3,14 2. példa 0,40 3. példa 0,23 4. példa 1,0 5. példa 0,74 6. példa 0,19 7. példa 3,82 8. példa 0,064 9. példa 0,15 Az I általános képletű vegyületek fájdalomcsillapító hatásának kimutatására használt másik próba az egéren végzet vonaglási próba. Ebben 20-22 gramm súlyú, éjszakán át éheztetett, Cox-törzsű fehér hím egereket alkalmazunk. A hasizomzat öszszehúzódásával, a hátsó lábak kinyújtásával és a törzs forgásával jellemzett vonaglást 55 mg/kg ecetsav (0,55%) intraperítoneális injekciójával váltjuk ki. Minden kezeit csoport 5 egérből áll. A kezelt csoportoknál a vonaglások számának összességét 10 perces megfigyelési idő alatt állapítjuk meg; a megfigyelést az ecetsav beadása után 5 perc múlva kezdjük el, A kontroll csoportok összes vonaglási száma 200-350-a megfigyelési idő alatt. Orális alkalmazásnál a vizsgálandó vegyületek bői 100 mg/kg. mennyiséget adunk be 30,90 és 180 perccel az ecelsav intraperitoneális alkalmazása előtt. Szubkután alkalmazás esetén a fenti dózist az ecetsav injekciója előtt 30 perccel adjuk be. A következő táblázat a fenti próbában kapott EDS0- értékeket tartalmazza: 2. Fájdalomcsillapító hatás, egér vonaglási próba táblázat ED50, mg/kg ED5C >• mg/kg Vegyidet szubkután orális 1. példa 112 — 2. példa 12 80 3. példa 2,2 330 6. példa 1,4 — 10. példa 1,4 320 11. példa 1,8 320 Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás I általános képletű vegyületek és gyógyszerészetiieg elfogadható savaddíciós sóik előállítására, ahol L és D a kiralítást jelzi; 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
