185230. lajstromszámú szabadalom • Eljárás farmakológiailag hatásos enkefalin-analóg peptidek előállítására
1 185230 2 A találmány tárgya eljárás fájdalomcsillapító hatással rendelkező új enkefalin-analóg peptidek előállítására. Újabban emlősök agyából és gerincagyi folyadékából morfinszerű tulajdonságokkal rendelkező endogén anyagokat vonlak ki. Ezeket az enkefalinoknak nevezett anyagokat Hughes és munkatársai Nature 25tí, 577 (1975) a következő aminosavszekvenciájú penlapeptidekként azonosították: H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-OH és H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-OH. E vegyüleleket metionin-enkefalinnak illetve leucin-enkefalinnak nevezik. Bár a metionin- és leucin-enkefalin fájdalomcsillapító hatást mutatott egérnél intracerebroventrikuiáris (agykamrába való) alkalmazása esetén [Büscher és munkatársai, Nature 261, 423 (1976)], parenterálisan adva gyakorlatilag semmiféle fájdalomcsillapító hatást nem fejtett ki. Ezért az enkefalinok felfedezése óta sok kutatást szenteltek enkefalin-analógok előállítására, abban a reményben, hogy nagyobb aktivitású és gyakorlati hasznú, a szervezet által parenterális vagy orális adagolás útján hasznosítható vegyületeket találjanak. Dúlta és munkatársai [Life Sei. 21, 559 (1977)] bizonyos szerkezeti módosításokat közölnek, melyek szerintük alkalmasak a hatásosság fokozására. Javaslatuk szerint az aktivitás a következő módon növelhető: a) a 2-es helyzetű Gly helyettesítése bizonyos D- vagy a-aza-amlnosavakkal; b) a terminális karboxilcsoport melil-észterré vagy amiddé való átalakítása; c) a 4-es helyű Phe módosítása ü-aza-szubsztitucióval, N-meti!ezésseI vagy az aromás gyűrű hídrogénezésével Ezenfelül Rocmer és munkatársai [Nature 26H, 547 (1977)] hasznos módosiiásként írják le a metionin-karboxilcsoport karbinoianalóggá (Met5-ol) való átalakítását és a metionin kénatomjának szulfoxiddá való oxidálásál. Más jelentős szerkezeti módosítást közölnek a 859 026. számú belga szabadalmi leírásban. Eszerint az enkefalin-analógok aktivitása és a szervezet általi hasznosíthatósága fokozható, ha a 2-es helyre D-aminosavcsoportot iktatnak be, a terminális karboxilcsoportot amiddá alakítják át és az 5-ös helyű aminosavesoportot N-alkilezik. Magunk magas szintű fájdalomcsillapító hatással rendelkező enkefalin-analógok csoportját fedeztük fel. Ezek az analógok pentapeptidek melyek 5-ös helyükön fenil-glicil-gyököt vagy gyűrűn szubsztituálí fenil-glicilgyököt tartalmaznak. Az irodalom más penlapeptid enkefalin-analógokat is ismer, melyek az 5-ös helyen aromás aminosavgyököt tartalmaznak. Például Ling és munkatársai ([„Structure-Activity Relationships of Enkephalin and Endroplin Analogs”, Peptides: Proceedings of the Fifth American Peptide Symposium, John Wiley and Sons, New York (1977), 96-99. oldal] a Tyr-D-Ala-Gly-Phe-D-Phe-OH pentapeptidet ismertetik. E vegyület azonban csak mérsékelt fájdalomcsillapító képességgel rendelkezik, míg a találmány szerinti pentapeptidek, melyek az 5-ös helyen fenil-glicil-gyököt tartalmaznak, meglepően nagyfokú fájdalomcsillapító hatást mutatnak. Így a találmány tárgya eljárás az I általános képletéi vegyületcsoport és gyógyszerészetileg elfogadható, savaddíciós sóik előállítására, ahol L és D a kiralitást jelzi; R, hidrogénatomot vagy 1-3 szénatomszámú primer alkilcsoportot; R3 hidrogénatomot vagy 1-4 szénatomszámú primer vagy szekunder alkilcsoportot; X hidrogénatomot, hidroxil- vagy 1-3 szénatomszámú aikoxicsoportot; és Z általános képletü csoportot jelent, ahol R4 hidrogénatomot vagy 1-3 szénatomszámú alkilcsoportot. E vegyületeket úgy állítjuk elő, hogy egy II általános képletü vegyületet - ahol R, és R3 jelentése a fenti; R6 hidrogénatomot, 1-3 szénatomszámú alkilcsoportot vagy a peptidkémiában ismert aminovédőcsoportot jelent; R„ jelentése hidrogénatom vagy a peptidkémiában ismert hidroxil-védőcsoportot; X' azonos X fenti jelentésével, vagy a peptidkémiában ismert hidroxil-védőcsoportot jelent; Z' azonos Z fenti jelentésével, vagy a Z szubsztituens prekurzora, beleértve a hordozógyantát; azzal a kikötéssel, hogy az R6, X' vagy Z' szubsztituensek közül legalább az egyik a peptidkémiában ismert módon védett csoport - valamely, a védőcsoport eltávolítására képes, a peptidkémiában szokásosan alkaimazoztt reagenssel reagáltatunk. A gyógyszerészetileg elfogadható savaddíciós sók közé szerves és szervetlen savaddíciós sók tartoznak, például hidrogén-kloriddal, kénsawal, szulfonsavval, borkősavval, fumársawal, hidrogén-bromiddal, glikolsavval, citromsavval, moleinsavval, foszforsavval, borostyánkősavval, ecetsavval, salétromsavval, benzoesavval, aszkorbinsavval, p-toluol-szulfonsavval, benzol-szulfonsavval, naftalinszulfonsavval, propionsavval és hasonlókkal képezett sók. Előnyben részesítjük a hidrogénkloriddal, ecetsavval vagy borostyánkősavval előállított savaddíciós sókat. Valamennyi fenti sót szokványos módszerekkel állítjuk elő. A fenti szerkezetben előforduló különböző szubsztituensek definíciójából adódóan az I általános képletü vegyületek pentapeptidek. melyeknek C-lerminális része primer alkohol vagy ennek kisszénatomszámú alkil-éter-származéka, primer vagy szekunder amid, vagy kisszénatomszámú alkílészter. Az I általános képletü vegyületek alapvető sajátossága a térszerkezetük. Kényelmi okokból az 1 általános képletü pentapeptidek aminosavgyökeit egymás után következően - szekvenciálisán - számozzuk. az. N-terminális aminosavtól kezdve. Az aminosavgyökök kiralilása - az 1-es helytől a 4-es helyig olvasva - L, D, semmi és L. A 3-as helyen levő gyök gliciigyök, ezért itt nincs kiralitás. Ami a 5-ös helyet (C-terminális rész) illeti ezt úgy jellemezhetjük, hogy kiralilása összhangban van és megfelel az aktuális L-aminosavgyök, D-aminosavgyök, valamint természetesen a kettő racém keveréke kiralitásának. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
