185229. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gyógyászatilag hatásos peptidek és acetátjaik előállítására
1 18:229 2 A találmány tárgya eljárás fájdalomcsillapító hatással rendelkező új, (I) általános képletíi tetrapeptidek és acetátjaik előállítására. Újabban emlősök agyából és gerincagyi folyadékából morfin-jellegű tulajdonságokkal rendelkező endogén anyagokat állítottak elő. Ezeket az enkefalinoknak nevezett anyagokat Hughes és munkatársai [Nature 258, 577 (1975)] a következő aminosav-szekvenciájú pentapeptidekként azonosították: H-Tyr-Gly-Phe-Met-OH és H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-OH. E vegyülelekel metionin-enkefalinnak illetve leucin-enkefalinnak nevezik (a fenti röviditett írásmód magyarázatát lásd alább). Bár a metionin- és a leucin-enkefalin fájdalomcsillapító hatást mutatott egérnél intracerebroventrikuláris (agykamrákba való) alkalmazás esetén [Böscher és munkatársai, Nature 261, 423 (1976)], parenterálisan adva gyakorlatilag semmilyen fájdalomcsillapító hatás nem jelentkezett. Ezért az cnkefalinok felfedezése óta sok kutatást szentellek enkefalin-analógok előállítására, abban a reményben, hogy nagyobb aktivitású és gyakorlati hasznú, a szervezet által parenterális vagy orális adagolás útján hasznosítható vegyületeket találnak. Dutta és munkatársai [Life Sei. 21, 559 (1977)] bizonyos szerkezeti módosításokat közölnek, melyek szerintük a hatékonyság fokozására alkalmasak. Javaslatuk szerint az aktivitás a következő módon növelhető: (a) a 2-es helyű Gly helyettesítése bizonyos D- vagy a-aza-aminosavakkal; (b) a terminális karboxilcsoporl metil-észlerré vagy amiddá való átalakítása; és/vagy (c) a 4-es helyű Phe módosítása a-aza-szubsztitucióval, N-metilezéssel vagy az aromás gyűrű hidrogénezésével. Ezenfelül Roomer és munkatársai [Nature 268 547 (1977)] hasznos módosításként írják le a inetioninkarboxiiesoport karbinolanalóggá (Met5-ol) való átalakítását és a metionin kénalomjának s/.ulfoxiddá való oxidálásál. Más jelentős szerkezeti módosítást közölnek a 859,026 számú belga szabadalmi leírásban. Eszerint az enkefalin-analógok aktivitása és a szervezet általi hasznosíthatósága fokozható, ha a 2-es helyre D-aminosavcsoportot iktatnak be, a terminális karboxilcsoportot amiddá alakítják át és az 5-ös helyű aminosavesoportot N-alkilezik. Vizsgálataink szerint nagy mértékű fájdalomcsillapító hatással rendelkeznek bizonyos enkefalinanalógok, melyek olyan tetrapeptidek, ahol a peptid 4-es helyén lévő L-fenil-alanin-gyököt nitrogénatomján cikiopropil-metil- vagy allilcsoport szubsztituálja. A találmány tárgya eljárás új (I) általános képletü vegyületek és acetátjaik előállítására, ahol L és D az optikai aktivitást jelöli, R2 jelentése metilcsoport, R3 cikiopropil-metil- vagy allilcsoportot és Z karbomoilcsoportot jelent. E vegyületeket úgy állítjuk elő, hogy egy (II) általános képlelü vegyületet - ahol R2 és R3 jelentése a fenti, R6 hidrogénatomot vagy aminovédő-csoportot jelent, Rr hidrogénatomot vagy hidroxilvédő-csoportot jelent, Z' azonos Z fent megadott jelentésével, vagy a Z szubsztituens valamely prekurzora, vagy valamely a peptidkémiában ismert hordozógyanta, azzal a kikötéssel, hogy az Re, R8 vagy Z' szubsztituenseknek legalább egyike védett csoport, valamely a peptidkémiában ismert, védőcsoport lehasításra szolgáló reagenssel reagáltatunk és kívánt esetben ioncserélő gyantával kezelünk. Az (I) általános képletü vegyületek térszerkezete a vegyületek alapvető sajátossága. Az (I) általános képletü tetrapeptidek aminosavgyökeit egymás után következően (szekvenciálisán) számozzuk, a lánc végén álló aminofunkció gyökével kezdve. Az aminosavgyökök kiralitása - az 1-es helytől a 4-es helyig olvasva -L, D, semmi és L. a 3-as helyen lévő gyök glicilgyök, azért itt nincs kiralitás (a glicin aszimmetriás szénatomot nem tartalmaz és ezért optikailag inaktív). Az (1) általános képletü tetrapeptidek gyökeinek sajátos helyére vonatkozóan a következő megfontolások érvényesek: (A) 1-es hely Ez a hely a peptid N terminális részét képezi. A gyök a L- lirozinszármazék, melynek nitrogénatomja szubsztituálatlan. (B) 2-es hely Az (I) általános képletü pepiidben a 2-es helyen levő aminosavgyöknek D-sztereoizomernek kell lennie és a D-alainból származik (Alá) (R2 = metilcsoport). (C) 3-as hely. A 3-as helyen levő aminosavgyök glicinből származik. (D) 4-es hely. A 4-es helyen levő aminosavgyök L-fenil-alaninból (Phe) származik. A gyök amino - nitrogénje szubsztituált (Rj), a szubsztituens ciklopropilmctil- vagy allilcsoport. Az (I) általános képletü vegyület C-terminális helyén levő gyök strukturálisan amiddá (Z = karbamoil-csoport) átalakított aminosavszármazék. A leírásban az aminosavak szekvenciájának megjelölésére széles körben elterjedt írásmódot használunk, az aminosavgyököt az aminosav első három betűjével jelölve: Alá - alain Tuyr - tirozin Gly - glicin Az (I) általános képletü vegyületeket peptidszinléziseknél szokásosan használt eljárásokkal állítjuk elő. Bizonyos (1) általános képletü vegyületek szintézise folyamán részleges racemizálódás következhet be. Azonban - ha ez egyáltalán létrejön - a racemizálódás nem olyan mértékű, hogy az (I) általános képletü vegyületek fájdalomcsillapító hatását jelentősen befolyásolná. Az (1) általános képletü vegyületeket szilárd fázisú peplidszintézisscl vagy klasszikus, folyékony fázisú szintézissel állítjuk elő. A szilárd fázisú eljárásban a peptidláncol szekvenciálisán állítjuk elő hordozógyantái, jellemzően benzhidril-amin gyantát 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
