185021. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ciklusos hexapeptidek előállítására
1 2 •(n -do dekán oil) -p-amino -benzoesav-2,4,5 -triklór-fenil-észtert oldunk. 15 órán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Csökkentett nyomáson kivitelezett desztillációval eltávolítjuk az oldószert, a desztillációs maradékot kétszer dietil-éterrel mossuk. A mosófolyadékot kiöntjük. A mosott terméket 50 ml metanolban oldjuk, és nagynyomású, reverz fázisú folyadékkromatográfiával tisztítjuk Prep LC/System 500 egységgel (Waters Associates Inc., Milford, Mass.) prop Pak-500/Cig oszlopot használva (Waters Associates Inc.) stacioner fázisként. Az oszlopot víz, metanol és acetonitril 2565:10 térfogatarányú elegyével eluáljuk 2 atm nyomáson. A frakciókat vékonyréteg-kromatográfiával ellenőrizzük, szilikagél lemezeken, az eluálást víz, metanol és acetonitril 25:65:10 térfogatarányú elegy ével végezve. Az előállítandó terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és fagyasztva szárítjuk, amiután 3,5 g A-30912 A alapvegyület. N-(n-dodekanoil)-p-amino-benzoil-származékot kapunk. 36. példa Az A-30912 B alapvegyület acilezése 100 ml dimetil-formamidban 10,2 mmól A-30912 B alapvegyületet és 10,2 mmól N-(n-dodekanoil)-p-amino-benzoesav-2,4,5-triklór-fenil-észtert oldunk. 15 órán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Az oldószert csökkentett nyomáson kivitelezett desztillációval eltávolítjuk, a desztillációs maradékot két alkalommal dietil-éterrel mossuk. A mosófolyadékot kiönijük. A mosott terméket 50 ml metanolban oldjuk és nagynyomású, reverz fázisú folyadékkromatográfiával tisztítjuk Prep LC/System 500 egységet, és Prep Pak-500/C18 oszlopot (Water Associates, Inc., Milford, Mass.) használva stacioner fázisként. Az oszlopot víz, metanol és acetonitril 2565:10 térfogatarányú elegyével eluáljuk 2 atm nyomáson, a frakciókat vékonyréteg-kromatográfiával analizáljuk szilikagél lemezeken, az eluálást víz, metanol és acetonitril 25:65:10 térfogatarányú elegyével végezve. Az előállítandó terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, majd ezt követően fagyasztva szárítjuk, amiután megkapjuk az A-30912 B alapvegyület N-(n-dodekanoil)-p-amino-benzoil-származékát. 37. példa Az A-30912 D alapvegyület acilezése 100 ml dimetil-formamidban 10,2 mmól A-30912 D alapvegyületet és 10,2 mmól N-(n-dodekanoil)-p-amino-benzoesav-2,4,5-triklór-fenil-észtert oldunk. 15 órán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Csökkentett nyomáson kivitelezett desztillációval eltávolítjuk az oldószert, a desztillációs maradékot kétszer dietil-éterrel mossuk. A mosófolyadékokat kiöntjük. A mosott terméket 50 ml metanolban oldjuk, és reverz fázisú, nagynyomású folyadékkromatográfiával tisztítjuk Prep LC/System 500 egységet (Waters Associates, Inc., Milford, Mass,), ami Prep Pak-500/Cig oszloppal (Water Associates Inc.) rendelkezik, stacioner fázisként. Az oszlopot víz, metanol és acetonitril 26:65:10 térfogatarányú elegyével eluáljuk 2 atm nyomáson. A frakciókat vékonyréteg-kromatográfiával analizáljuk, szilikagél lemezeket és víz, metanol és acetonitril 25:65:10 térfogatarányú elegyét használva. Az előállítandó terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és fagyasztva szárítjuk, amiután megkapjuk az A-30912 D alapvegyület N-(n-dodekanoil)-p-amino-benzoil-származékát. 38. példa Az A-30912 H alapvegyület acilezése 100 ml dimetil-formamidban 10,2 mmól A-30912 H alapvegyületet és 10,2 mmól N-(n-dodekanoil)-p-amino-benzosavat oldunk. Az oldatot 15 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Csökkentett nyomáson desztillálva eltávolítjuk az oldószert, a desztillációs maradékot kétszer dietil-éterrel mossuk. A mosófolyadékokat kiöntjük. A mosott terméket 50 ml metanolban oldjuk és reverz fázisú, nagynyomású folyadékkromatográfiával tisztítjuk Prep LC/System 500 egységet (Waters Associates Inc., Milford, Mass.) használva, amely Prep Pak-500/Ci8 oszloppal van felszerelve stacioner fázisként. Az oszlopot víz, metanol és acetonitril 25:65:10 térfogatarányú elegyével eluáljuk 2 atm nyomáson. A frakciókat vékonyréteg-kromatográfiával analizáljuk szilikagél lemezeken, oldószer-elegyként víz, metanol és acetonitril 25:65:10 térfogatarányű elegyét használva. Az előállítandó terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és fagyasztva szárítjuk, amiután megkapjuk az A-30912 H alapvegyület N-(n-dodekanoil)-p-amino-benzoil-származékát 39. példa Az S 31794-F/l alapvegyület acilezése 100 ml dimetil-formamidban 10,2 mmól S 31794/ F-l alapvegyületet és 10,2 mmól N-(n-dodekanoil)-p-amino-benzoesav-2,4,5 -triklór-fenil-észtert oldunk. 15 órán át szobahőmérsékleten keveijük a reakcióelegyet. Csökkentett nyomáson kivitelezett desztillációval eltávolítjuk az oldószert, a kapott desztillációs maradékot két alkalommal dietil-éterrel mossuk. A mosófolyadékokat kiöntjük. A mosott terméket 50 ml metanolban oldjuk, és reverz fázisú, nagynyomású folyadékkromatográflával tisztítjuk Prep LC/System 500 egységet használva (Waters Associates Inc., Milford, Mass.), amely Prep Pak-500/CI8 oszloppal (Water Associates Inc.) van felszerelve stacioner fázisként. Az oszlopot víz, metanol és acetonitril 25:65:10 térfoga tara nyű elegyével eluáljuk 2 atm nyomáson. A frakciókat vékonyréteg-kromatográfiával analizáljuk, szilikagél lemezeken, oldószer-elegyként víz, met,mól és acetonitril 25 65:10 térfogatarányú elegyét használva. Az előállítandó terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és fagyasztva szárítjuk, amiután megkapjuk az S 31794/F-l alapvegyület N-(dodekanoil)-p-amino-benzoil-származékát. A Debono II-származékok előállítása Az alábbiakban ismertetjük azoknak a III általános képletű vegyületeknek az előállítását, ahol R5 egy V képletű csoport. Ezzel szemléltetjük a III általános képletű vegyületek Debono Il-típusú vegyületeinek előállítását. 40. példa A pj(n-oktiloxi)-benzoesav előállítása 120 ml 10%-os, vizes nátrium-hidroxidban 19,2 g (150 mmól) p-hidroxi-benzoesavat oldunk, az oldatot előzőleg 80 “C-ra melegített, 480 ml térfogatú dimetil-szulfoxidhoz adjuk. Az oldathoz cseppenként 28,95 g (150 mmól) n-oktil-bromidot adunk. 4 órán át szobahőmérsékleten keverjük a reakéióelegyet, amiután 1200 ml jeges vízbe öntjük. 30 ml tömény hidrogén-kloridot adunk az elegyhez, majd addig hagyjuk állni, míg a csapadékképződés teljessé válik. A csapadékot összegyűjtjük, szárítjuk és acetonitril és víz elegyéből kikristályosítjuk. A kapott vegyület 185.021 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 19
