185021. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ciklusos hexapeptidek előállítására
1 2 kenteit nyomáson szárazra desztilláljuk. Ily módon 550 mg termeket kapunk. A fenti kromatoráfiás tisztítást négyszer megismételjük, amiután további négy terméket kapunk: ezek súlya: 620 mg, 520 mg, 670 mg és 490 mg. összsúlyuk 2,8 g. A fenti eljárást követve 40 g A-30912 A alapvegyületet reá gáltatunk 2,4,5-triklór-fenil-n-tridekanoáttal, amiután 2,6 g tiszta előállítandó terméket kapunk. A két kísérletből származó készítményeket egyesítjük, így 5,4 g termékhez jutunk. A meződeszorjrciós tömegspektrometriával vizsgált iontömeg (M + Na+): 1016. (Elméleti: 1016). Az analitikai nagynyomású folyadékkromatográfiás (C)g, Micro Bondapak, Waters Co.) szerint (eluálás víz, metanol és acetonitril 2:1:2 arányú elegyével) a termék egy csúcsot mutat. 27. példa Az A-30912 B alapvegyület acilezése 2,4,5-triklór-fenil-n-tridekanoáttal 200 ml diniét il-formamidban 3,3 mmól 2,4,5-triklór-fenil-n-tridekanoátot és 1 mmól A-30912 B alapvegyületet oldunk. 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Az oldószer eltávolítására csökkentett nyomáson desztilláljuk az elegyet,a desztillációs maradékot 300 ml metilén-kloridban szuszpendáljuk és 45 perc múlva szűrjük. A szürletet kiöntjük. A szilárd halmazállapotú terméket 300 ml metanollal extraháljuk, a metanolos extraktumot szűrjük és csökkentett nyomáson desztilláljuk, amikor desztillációs maradékként megkapjuk a nyers'terriiéket. A nyersterméket nagynyomású folyadékkromatográfiával tisztítjuk, az alábbiak szerint: 1 g terméket 5 ml metanolban oldunk,1 az oldatot 2,5 x 65 cm méretű, saválló acélból készült oszlopban lévő LP-1 /C, g gyanta tetejére injektáljuk (lásd a 10. és 11. példát). Az oszlopot víz, metanol és acetonitril 33:4 arányú elegyével eluáljuk. Az eluálást 40-60 atm-n végezzük, 11—12 ml/perc áramlási sebességgel, amit LDC pumpával (Milton-Roy) biztosítunk. A effleunst ultraibolya detektorral (ISCO UA-5) vizsgáljuk 280 nm hullámhosszon. Minden második percben különítünk el egy frakciót (21-24 ml). Az előállítandó terméket tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és csökkentett nyomáson desztillálva megkapjuk az előállítandó vegyületet. A tiszta terméket vékonyréteg-kromatográfiával analizáljuk, reverz fázisú Clg lemezeken (Whatman KCjg), a futtatást víz, metanol és acetonitril 1:2:2 térfogatarányú elegyével végezzük. A futtatást követően a lemezeket a termék előhívására ultraibolya fényben vizsgáljuk. 30. példa Az A-30912 D alapvegyület acilezése 2,4,5-triklór-fenil-n-tridekanoáttal 200 ml dimetil-forrnamidban 3,3 mmól 2,4,5-triklór-fcnil-n-tridekanoátot és 1 mmól A-30912 D alapvegyületet oldunk, az oldatot 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Csökkentett nyomáson desztillálva eltávolítjuk az oldószert, a desztillációs maradékot 300 ml metilén-kloridban szuszpendáljuk. 45 perc múlva szűrjük a szuszpenziót. A szűrletet kiöntjük. A visszamaradó, szilárd halmazállapotú terméket 300 ml metanollal extraháljuk, az extraktumot szűrjük és csökkentett nyomáson desztilláljuk, amiután megkapjuk a nyersterméket. A nyersterméket a 29. példában megadottak szerint eljárva, reverz fázisú, nagynyomású folyadékkromatográfiával tisztítjuk, 31. példa Az A-30912 H alapvegyület acilezése 2,4,5-triklór-fenil -n-tridekanoáttal 200 ml dimetil-forrnamidban 3,3 mmól 2,4,5-triklór-fenil-n-tridekanoátot és 1 mmól A-30912 H alapvegyületet oldunk, az oldatot 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Csökkentett nyomáson desztillálva eltávolítjuk az oldószert, a desztillációs maradékot 300 ml metilén-kloridban szuszpendáljuk. 45 perc múlva szűrjük a szuszpenziót. A szűrletet kiöntjük. A visszamaradó, szilárd halmazállapotú terméket 300 ml metanollal extraháljuk, az extraktumot szűrjük és csökkentett nyomáson desztilláljuk, amiután megkapjuk a nyersterméket. A nyersterméket a 37. példában megadottak szerint eljárva, reverz fázisú, nagynyomású folyadékkromatográfiával tisztítjuk. 32. példa Az S 31794/F-l alapvegyület acilezése 2,4,5-triklór-fenil-n-tridekanoáttal 200 ml dimetil-forrnamidban 3,3 mmól 2,4,5-triklór-fenil-n-tridekanoátot és 1 mmól S 31794/F-l alapvegyületet oldunk, az oldatot 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Csökkentett nyomáson desztillálva eltávolítjuk az oldószert, a desztillációs maradékot 300 ml metilén-kloridban szuszpendáljuk. 45 perc múlva szűrjük a szuszpenziót. A szűrletet kiöntjük. A visszamaradó, szilárd halmazállapotú terméket 300 ml metanollal extraháljuk, az extraktumot szűrjük és csökkentett nyomáson desztilláljuk, amiután megkapjuk a nyersterméket. A nyersterméket a 29. példában megadottak szerint eljárva, reverz fázisú, nagynyomású folyadékkromatográfiával tisztítjuk. A Debono 1-származékok előállítása Az alábbiakban ismertetjük azoknak a III általános képletű vegyületeknek az előállítását, ahol R5 egy IV képletű csoport. Ezzel szemléltetjük a III általános képletű Debono I-vegyületek előállításának módszerét. 33. példa Az N-(n-dodekanoil)-p-amino-benzoesav előállítása 100 ml piridinben 5,5 g (40 mmól) p-amino-benzoesavat oldunk, az oldathoz cseppenként 8,74 g (40 mmól) n-dodekanoil-kloridot adunk. 3 órán át keverjük a reakcióelegyet, ezt követően 3 1 vízhez öntjük. A kivált csapadékot szűréssel elkülönítjük és csökkentett nyomású térben szárítjuk, amiután 11,01 gN(n-dodekanoil)-p-amino-benzoesavat kapunk. 34. példa Az N-(n-dodekanoil)-p-amino-benzoesav 2,4,5-triklór-fenil-észterének előállítása 250 ml metilén-kloridban 11,01 g (34,5 mmól) N-(n-dodekanoil)-p-amino-benzoesavat 7,5 g (38 mmól) 2,4,5-triklór-fenolt és 6,94 g (34,5 mmól) N,N-diciklohexil-karbodiimidet oldunk. 3,5 órán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet, majd szűrjük. A szűrletet csökkentett nyomáson desztilláljuk, a desztillációs maradékot acetonitril és víz elegycből kikristályosítjuk, amiután 12,84 g 2,4,5-triklór-fenil-észtert kapunk az N-(n-dodekanoit)-p-aminp-benzoesavnak. 35. példa Az A-30912 A alapvegyület acilezése 100 ml dimetil-forrnamidban 8,16 g (10,2 mmól) A-30912 A alapvegyületet és,4,72 g (10,2 mmól) N-185.02 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 18
