185021. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ciklusos hexapeptidek előállítására
1 2 hidroxi-prolin a = 4,29,ß= 2,20 és 1,84, (6) részképlet A-30912 B alapvegyület 7= 4,41, 5 = 3,79 és 3,69. metil-hidroxi-prolín a = 4,15, ß-3,98,7= 2,35, (1) részképlet CII3 =0,96, 6 = 3,83 és ' 3,22. dihidroxi-ornitin a. = 3,14, ß = 1,69 és 1,41, (2) részképlet 7= 3,85, 5 = 5,24, NH = 7,98. treonin/1 NH = 7,30, a= 4,65,0= 3,87, (3) részképlet CII3 = 1,05. treonon/2 NH = 8,18,a = 4,75,(3= 4,46, (4) részképlet CH3 = 0,99, hidroxi-homotirozin NH = 7,82, a = 4,17, (3 = 3,99, (7) részképlet 7= 4,36, 5 = 3,96 és 3,57. hidroxi-prolin a = 4,28, ö = 2,18 és 1,90, (6) részképlet A-30912 D alapvegyület 7 = 4,36, 0 = 3,96 és 3,57, metil-hidroxi-prolin a = 4,14, /?= 3,98,7= 2,29, (1) részképlet CH3 =0,94, 5 = 3,80és 3,22. ornitin a = 3,16, Q - 1,04 és 1,79, (8) részképlet 7= 1,60, 5 = 3,33 és 2,87, NH = 7,70. treonin/1 NH = 7,44, a = 4,69,/3 = 4,06, (3) részképlet CH3 = 1,03. trconin/2 NH = 7,85, a = 4,66, /3= 4,42, (4) részképlet CH3 = 1,04. hidroxi-homotirozin NH = 8,04, a = 4,12, 0 = 4,06, (7) részképlet 7 = 2,57 és 2,48, orto = 6,92, méta =6,63. hidroxi-prolin a = 4,34, ß = 2,19 és 1,93, 7= 4,40, (6) részképlet A-30912 H alapvegyület 5 = 3,98 és 3,64. metil-hidroxi-prolin a=4,21,(3=4,03,7 = 2,31, CH3 =0,96, (Î) részképlet 6=3,85 és 3,22. metoxi-hidroxi-ornitin a= 3,12,0 = 1,69 és 1,42, 7=3,97, (9) részképlct S = 5,03,OCH3 =3,20, NH = 7,95. treonin/1 NH = 7,15, a = 4,61, (3 = 3,83, (3) részképlet CH3 = 1,08. trconin/2 NH = 8,24, a =4,79, (3 = 4,51, (4) részképlet CH3 = 1,03. hidroxi-homotirozin NH = 7,46, a = 3,94,0 = ■' 3,77,7 = 4,27, (5) részképlet orto = 6,95, meta = 6,65. hidroxi-prolin a =4,25, (3= 2,19 és 1,86, 7 = 4,42, (6) részképlet S31794/F-1 alapvegyület 6 = 3,87 és 3,67. metil-hidroxi-prolin a = 4,23, /3= 3,98,7= 2,32, CH3 = 0,94, (1) részképlet 5 = 4,05 és 3,12. dihidroxi-ornitin aNH = 8,l8,a = 4,22,/3 = 1,75 és 1,75, (2) részképlet 7 = 3,73, 5 = 4,95, NH » 8,05. (3-hidroxi-glutamin NH = 7,19, a -4,85, ß = 4,16,7=2,45 (10) részképlet és 2,25, -CO-NH3 = 7,29 és 6 78 treonin NH = 8,23, a - 4,75, ß = 4,34 CHs = 1,06. (4) részképlet dihidroxl-homotirozin NH = 7,40, a - 3,97, ß = 3,97,7= 4,13, (5) részképlet orto * 7,00, meta = 6,66, fenol % 9,29. hidroxi-prolin a = 4,33, ß= 1,85 és 2,22, 7 = 4,40, (6) részképlet 0 3,72 és 3,72. Az alábbiakban ismertetjük a III általános képletű vegyületek előállítását az ún. aktív észter módszerrel. Az eljárás során olyan III általános képletű vcgyületet állítunk elő, ahol Rs egy CH3(CH2)i 1 -képletű csoport, továbbá, ahol R1, R3, R4 és R4 az előállítandó alapvegyületben megadottak. A 27—47. példákban leírt eljárások nem tartoznak a találmány körébe. 27. példa A 2,4,5-triklór-fenil-tridekanoát előállítása 650 ml metilén-kloridban 12,5 g n-tridekanoánsavat (Sigma Chemical CO.) 11,5 g 2,4,5-trikiór-fenolt és 12,0 g N,N-diciklohexil-karbodiimidet oldunk. 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Ezután szűrjük és csökkentett nyomáson szárazra desztilláljuk, amiután desztillációs maradékként 22 g 2,4,5-triklór-fenil-tridekanoátot kapunk. A termék szilikagéllel (Woelm) és eluálószerként toluollal kivitelezett oszlopkromatográfiával tisztítjuk. A frakciókat vékonyréteg-kromatográfiával vizsgáljuk, és rövidhullámhosszú ultraibolya fényben detektáljuk. A tiszta terméket tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és csökkentett nyomáson szárazra desztilláljuk. 28. példa Az A-30912 A alapvegyület acilezése 2,4,5-triklór-fenil-n-tridekanoáttal 600 ml dimetil-formamidban 6,0 g 2,4,5-triklór-fenil-tridekanoátot és 4,5 g A-30912 A alapvegyületet oldunk, az oldatot 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Csökkentett nyomáson desztilláljuk az elegyet, amiután desztillációs maradékként 12 g terméket kapunk. Ezt 500 ml metilén-kloridban szuszpendáijuk, majd 45 perc múlva szűrjük a szuszpenziót. A szűrletet kiöntjük. A kapott szilárd halmazállapotú terméket 500 ml metanollal extraháljuk, szűrjük a metanolos extraktumot és csökkentett nyomáson desztilláljuk, amiután 5,0 g nyers terméket kapunk. A nyersterméket reverz fázisú, nagynyomású folyadékkromatográfiával tisztítjuk, az alábbiak szerint: 1 g nyers terméket 5 ml metanolban oldunk, az oldatot 2 és 1/2-szer 65 cm méretű saválló oszlopban lévő LP-l/Cj $ gyantára injektáljuk (lásd a 10. és 11. példákat). Az oszlopot víz, metanol és acetonitri! 3 3 4 arányú elegyével eluáljuk. Az eluálást 40-60 atm nyomáson végezzük, az áramlási sebesség 11-12 ml/perc, amit LDC pumpával (Milton-Roy) biztosítunk. Az effluenst 280 nm-en vizsgáljuk ultraibolya detektorral (ISCO UA-5). Minden második percben elkülönítünk egy frakciót (21—24 ml). Az előállítandó terméket tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és csök-185.021 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 17
