184707. lajstromszámú szabadalom • Eljárás izotóposan jelzett gibberelin-aldehid-származékok előállítására
1 2 184.707 63 mg reagálatlan kiindulási gibberelÜn-A3-^-aldehidet ad. Végül kloroform/ecetsav-etil-észter 1:1 .tf-arányü elegyével 217 mg (az elméleti 81%-a) (lb) képletű ent-3a,7f 10,13-tetrahidroxi-7,15-ciklo-20-nor-gibberella-1,16-dién-19-sa v-19,10-laktont kapunk (a kitermelés a reagált (la)-ra vonatkozik). Az (Ib) képletű amorf izomer elegy spektroszkópiai adatai a következők: IR (Nujol): nm„y 3400 (sz.) és 1755 Cy-lakton-CO), mMS: m/e 33Ö (ívf). 217 mg (lb) képletű vegyületet 10 ml nátrium-metilát oldattal (készítve 10 ml CH303H és 15 mg Na reakciójával, a CH303H fajlagos rádióaktivitása = = 0,5 mCi/mmól) elegyítünk szobahőmérsékleten, 10 perc múlva 1 ml jégecetet adunk hozzá és az oldatot vákuumban bepároljuk. 15 g kovasavon (Woelm) kloroform/ecetsav-etil-észter 8:2 tf-arányú elegy ével végzett kromatográfiás tisztítás 134,5 mg (az elméleti 62%-a) (Ic) képletű [15-3H]-gibberellin-A3-(7)-aldehidet eredményez: amorf, [a ]?)5 * = -119,2er (c= 0,58, etanol), IR (CHC13): ^max:3610 (OH), 2820, 2725 és 2725 (aldehid), 1775 (7-lakton-CO), 1665 (=CH2) és 1635 cm'1 (-CHCH-), MS. m/e 330 (M+), 100 MHz-NMR: 8 CDC13 » 1,20 (s, 18-H3), 2,79 (dd, J= 10,5 és J’= 2,5 Hz, 6-H), 3,22 (d, J% 10,5 Hz, 5-H), 4,17 (d, J= 3,5 Hz, 3-H), 5,00 és 5,29 (m, 17-H2), 5,91 (dd, J= = 9,5 és J’= 3,5 Hz, 2-H), 6,33 (d, J= 9,5 Hz, 1-H) és 9,81 ppm (d, J= 2,5 Hz, 7-H). A fajlagos rádioaktivitás 0,43 mCi/mmól. 2. példa 414,5 mg (1 mmól) (lia) képletű 0(3),0(13^-diacetil-gibberellin-A3-(7)-aldehid 40 ml abszolút benzollal készített oldatát 25 órán keresztül kvarccsőben nitrogén alatt (léghűtés) besugározzuk (THU 500, THELTA Elektroapparate, Zella-Mehlis). Az oldatot vákuumban bepároljuk és a maradékot 30 g kovasavon (Woelm) kromatografáljuk. Az n-hexán/ /kloroform gradienssel végzett eluálás során a 24— —28. frakciókban (amelyek n-hexán:kloroform =■ 3:7 tf-arány mellett eluálódnak) 80 mg (Ha) képletű kiindulási vegyületet nyerünk vissza. Az azonos eleggyel levett 30-55. frakciókból 305 mg (az elméleti 91%-a) (Ilb) képletű ent-3a-13-diacetoxi-7£, 10-diliidroxi-7,15-ciklo-20-nor-gibberella-1,16- -dién-19-sav-19,10-laktont kapunk (kitermelés az átalakult (Ila)-ra vonatkozik). Kloroform/n-hexán elegyben végzett többszörös átkristályosítással tisztán izolálhatok a (Ilb) 7/3-epimerjei. Az ent-3a,13- -diacetoxi-7/3,10-dihidroxi-7,15-ciklo-20-nor-gibberella-1,16-dién-19-sav-19,10-lakton fizikai és spektroszkópiai adatai a következők: Op.: 217—220 °C (kloroform/n-hexánból nyertük), [«]fj5 = +122,2°C (c= 0,45, etanol), MS: m/e 414 (NT, illetve M'), IR (CHCI3): rmax: 3610 (OH), 1778 (y-lakton-CO), 1740 (észter-CO), 1668 ( C=CH2) és 1260 cm'1 (acetil), 100 MHz-NMR spektrum: 5 3; 1,30 (5, 18-H3), 2,10 és 2,14 két acetil, 3,03 (d, J= 7Hz, 5-H), 4,68 (gyenge dublett, J= 7Hz, 7-H), 4,86 (d,J=2,25Hz, 17-H), 5,24 (d, J= 2,75Hz, 17-H), 5,36 (d, J= 3,5Hz, 3-H), 5,87 (dd, J= 9,5 Hz és J’= 3,5Hz 2-H), 6.41 (d, J= 9,5 Hz, 1-H). A (II) képletű 0(3), 0(13)-diacetil-gibberellín-Aî'7-altleliid fotokémiai átalakítását más oldószerekben, például toluolban, ecetsav-etil-észterben, 5 10 15 20 25 30 35 tetrahidroíuránban, dioxánban, metilén-kloridban, metanolban, terc-butanolban is végeztük. A 7-hidroxi-7,15-ciklobutanol-származék elért kitermelései az átalakult aldehidre vonatkoztatva 80-92% között vannak. 414,5 mg (1 mmól) (Ilb) képletű vegyületet 3 ml tetrahidrofuránban oldunk és 0,1 ml (5,55 mmól) 3 H2 O-t (fajlagos radioaktivitás 3 mCi/mmól) adunk hozzá. 10 perc múlva szobahőmérsékleten 20 mg lítium-metilátot adunk az oldathoz és 15 perces reakció után 0,5 ml jégecet hozzáadásával megszakítjuk az átalakulást. Utána az elegyet bepároljuk és a maradékot 4 ml abszolút piridinnel és 4 ml acetanhidriddel elegyítjük. 20 perc múlva az elegyet újból bepároljuk és a maradékot 30 g kovasavon (Woelm) kromatografáljuk. Kloroform/n-hexán 6:4 tf-arányú elegyével végzett eluálás során 265 mg (az elméleti 64%-a) (IIc) képletű [15-3H]-0(3),0(13)-diacetil-gibberellin-A3-(7)-aldehidet kapunk, melynek fajlagos rádióaktivitása 1,34 mCi/mmól, Op.: 161 — —163 °C (éter/n-hexánból), [a]|)S = +205,5° (c= = 0,51, abszolút dioxán), IR (CHCI3): rraax 2820, 2725 és 1725 (aldehid), 1775 (7-lakton-CO), 1740 (észter-CO), 1665 ( C=CH2) és 1255 (acetát), MS: m/e 414 (M+). 414,5 mg (Ilb) képletű vegyidet 3 ml tetrahidrofuránnal és 0,1 ml 2 H2 O-val (99,9% tisztaságú) és 20 mg lítium-metiláttal végzett analóg reakciója az acetilezés után 257 mg (az elméleti 62%-a) (X) képletű [15-2H]-0(3),0(13)-diacetil-gibbereUin-A3-(7)-aldehidet eredményez: Op.: 16Ô—164 °C (éter/n-hexánból), [a]J)S = +204,1° (c= 0,46, abszolút dioxán), MS: m/e 415 (M*). 143 mg (X) képletű vegyület 3,5 ml 0,2 n nátrium-metilát oldattal végzett dezacetilezése (4 óra, szobahőmérséklet) kromatográfiás feldolgozás után 78 mg (az elméleti 68%-a) [15-2H]-gibberellin-A3-£7)-aldehidet eredményez: amorf, [a]f) = +119,0 (c= 0,60, etanol), MS: m/e 331 (M+). 40 45 50 55 60 3. példa 414.5 mg (1 mmól) (Ha) képletű 0(3),0(13)-diacetü-gibberellin-A3-(7)-aldehidet 60 ml kloroformban oldunk és az oldatot kvarccsőben vákuumban bepároljuk. A visszamaradó anyagfilmet 70 órán keresztül forgatás közben argon alatt ultraibolya fénnyel besugározzuk (léghűtés, THU 500, THELTA Elektronapparate, Zalle-Mehlis). Ezután a kapott fotóterméket 30 g kovasavon n-hexán/kloroform-gradienssel kromatografáljuk. Az n-hexán: Jdoroform = 3:7 térfogatarány mellett eluálódó 22—27. frakciókban 120 mg (Ha) képletű 0(3),- 0(13)-diacetil-gibberellin-A3 -7-aldehidet nyerünk vissza. Azonos eleggyel kapunk a 30-55. frakciókból 236 mg (az elméleti 80%-a) (Ilb) képletű ent-3a,13-diacetoxi-7g,10-dihidroxi-7,15-ciklo-20-nor-gibberella-1,16-dién-19-sav-l9,10-laktont (kitermelés az átalakult (Ila)-ra vonatkoztatva). 414.5 mg ent-3a,13-diacetoxi-7/3,10-dihidroxi-7,- 15-ciklo-20-nor-gibberella-l, 16-dién-19-sav-19,10- -laktont 4 ml piridinben feloldunk és 4 ml ecetsav-anhidridet adunk az oldathoz. Az elegyet 1 órán keresztül szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd vákuumban bepároljuk. A maradékot 30 g 4
