184707. lajstromszámú szabadalom • Eljárás izotóposan jelzett gibberelin-aldehid-származékok előállítására
1 2 184.707 kovasavon (Woelm) kromatografáljuk, n-hexán/ /kloroform 6:4 tf-arányú elegyével kapunk 389 mg (az elméleti 85%-a) ent-3a,7/3,13-triacetoxi-10- -hidroxi-7,15-ciklo-20-nor-gibberella-1,16-dién-19- -sav-19,10-laktont: Op.: 229-231 °C (éterből), [a]f>5 = ti 58,0° (c= 0,63, etanol), MS: m/e 456 (M+), IR (CHCI3): n a 1778 (7-lakton-CO), 1740 (észter-CO), 1670 ( C=CH2 ) és 1260 cm’1 (acetil). 228 mg (0,5 mmól) ent-3a,7/?,13-triacetoxi-10- -hidroxi-7,15-ciklo-20-nor-gibberella- 1,16-dién-19- -sav-19,10-laktonhoz adunk 5 ml vízmentes tetrahidrofuránt és 0,05 ml 3H20-t (fajlagos radioaktivitás 3 mCi/mmól). 1 óra alatt részletekben 112,2 mg (1 mmól) alkoholmentes kálium-terc-butilátot adunk az elegyhez, további 1 órán keresztül keverjük, majd 0,3 ml jégecetet adunk hozzá. Az elegyet vákuumban bepároljuk, majd 2 ml piridint és 2 ml acetanhidridet hozzáadva a 2. példa szerint feldolgozzuk, 153 mg (az elméleti 67%-a) (IIc) képletű 115-3H]-0(3),0(l 3 )-diacetil-gibberellin-A3-^-aldehidet kapunk (fajlagos rádióaktivitás = 1,5 mCi/ /mmól). 153 mg (11c) képletű vegyidet 3,7 ml 0,2 n nátrium-metilát oldattal végzett dezacetilezése az 1. példának megfelelő kromatográfia után 85 mg (az elméleti 70%-a) (Ic) képletű [15-3H]-gibberellin-A3- -(7)-aldehidet eredményez (fajlagos radioaktivitás = = 1,48 mCi/mmól). =CH2 ) és 1260 cm’1 (acetil, MS: m/e 374 (WT). 2 ml metanolban oldott 271 mg (Illb) képletű 5 vegyülethez adunk 0,5 ml 3H20-t (fajlagos radioaktivitás = = 3 mCi/mmól) és 150 mg vízmentes nátrium-acetát, majd az elegyet másfél hétig szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ezután az elegyet bepároljuk, étert adunk hozzá és az éteres fázist vízzel JQ többször kirázzuk. Az éteres oldatot nátrium-szulfáttal szárítjuk, vákuumban bepároljuk, és a maradékot 4 ml piridinnel és 4 ml ecetsavanhidriddel elegyítjük. Az elegyet 10 perc múlva vákuumban ismét bepároljuk és a maradékot 20 g kovasavon (Woelm) kromatografáljuk. n-Hexán/kloroform 15 2.8 tf-arányú elegyével kapunk 184 ml (az elméleti 68%-a) (lile) képletű amorf [15-3H]-0(3)-acetil-gibberellin-Al-(7)-aldehidet: IR (CHC13): rmax 3610 (OH), 2725, 2820 és 1725 (aldehid), 1775 (7-lakton-CO), 1740 (észter-CO), 1665 ( C=CH2), 1255 cm’1 (acetát, MS: m/e 374 (M+, illetve M’). ?0 A fajlagos radioaktivitás 0,23 mCi/mmól). 153 mg (lile) képletű vegyület dezacetilezése 2 ml 0,2 n nátrium-metilát oldattal kromatográfia után 99 mg (az elméleti 73%-a) [ 15-3 Hj-gibberellim -Ai-(7)-aldehidet eredményez: amorf, [a]J) = +62,8° r- (c= 0,42, etanol), MS: m/e 332 (M+). Fajlagos radio^5 aktivitás 0,20 mCi/mmól). 6. példa 4. példa 41,5 mg (0,1 mmól) (lia) képletű 0(3),0(13)-diacetil-gibberellin-A3-(7)-aldeliidet feloldunk 2 ml abszolút tetrahidrofuránban és az oldatot 0,05 ml 3 H2 O-val elegyítjük (fajlagos rádióaktivitás = 3 mCi/ /mmól), utána 80 órán keresztül Pyrex csőben ultraibolya fénnyel besugározzuk (léghűtés, THU 500, THELTA Elektroapparate, Zella, Mehlis). Ezután az elegyet vákuumban bepároljuk, a maradékot éterben felvesszük és az éteres oldatot vízzel többször kirázzuk. A megszárított és bepárolt éteres fázis maradékát 2 g kovasavon (Woelm) kromatografáljuk. A 2. példában leírtakkal azonos eluciós körülmények között 17,4 mg (az elméleti 42%-a) (IIc) képletű [ 15-3 H]-0(3),0(l 3)-diacetil-gibberellin-A3 -^-aldehidet (fajlagos radioaktivitás = 0,11 mCi/mmól) és 20,7 mg (az elméleti 50%-a) (Ilb) képletű 13-diacetoxi-7£,l 0-dihidroxi-7,l 5-cíklo-20-nor-gibberella-l ,- 16-dién-l 9-sav-l 9,10-laktont kapunk. 5. példa 374,5 mg (1 mmól) (Illa) képletű 0(3)-acetil -gíbberellin-A 1 -(7)-aldehidet 40 ml toluolban nitro gén alatt kvarccsőben 26 órán keresztül 25 °C hő mérsékleten besugározzuk (THU 500, THELTA Elektroapparate, Zella-Mehlis). Vákuumban tör ténő betöményítés után a maradékot 25 g kovasavon (Woelm) kromatografáljuk. n-Hexán/kloroform 2:8 tf-arányú elegyével 63 mg 0(3)-acetil-gibberellin-A! (7) aldehidet nyerünk vissza. Végül kloroform mai aluálva 271 mg (az elméleti 87%-a) (Illb) kép letű ent-3a-acetoxi-7£,l 0,13-trihidroxi-7,15-ciklo-20-nor-gibberella-16-én-l 9-sav-19,10-lakton izomer elegyét kapjuk: IR (CHC13): t'mav 3610 (OH), 1780 (7-lakton-CO), 1740 (észter-CO), 1665 ( C= 30 35 40 45 50 55 60 35,8 mg (0,1 mmól) (IVa) képletű 0(3)-acetil-gibberellin-A4-(7)-aldehidet 5 ml metilén-kloridban argon alatt kvarccsőben higanygőzlámpával (THU 500, THELTA Elektroapparate, Zella-Mehlis) 25 órán keresztül besugározzuk. A hőmérsékletet a fotokémiai reakció alatt (-30)-(-60)°C között tartjuk. Végül az oldatot vákuumban bepáioljuk és a maradékot 2,5 g kovasavon (Woelm) kromatografáljuk. n-Hexán/kloroform 4:6 tf-arányú elegyével végzett eluálás 7,2 mg (IVa) képletű reagálatlan 0(3)-acetil-gibberellin-A4-(7)-aldehidet ad. n-hexán/ /kloroform 3:7 tf-arányú elegyével 17,5 mg (az elméleti 61%-a) (a reagálatlan (IVa)-ra vonatkoztatva) (IVb) képletű ent-3a-acetoxi-7£,10-dihidroxi-7,15- -ciklo-20-nor-gibberella-16-én-19-sav-19,10-laktont kapunk, MS: m/e 358 (M+), IR (CHCI3): *W 3610 (OH), 1780 (7-lakton-CO), 1740 (észter-CO), és 1260 cm’1 (acetil). 17,9 mg (0,05 mmól) (IVb) képletű vegyületet 1 g 12 Ci/mmól) fajlagos radioaktivitású tríciumfenolból és 3 mg nátriumból előállított, 50 °C-ra melegített nátrium-fenolát-oldathoz adunk. Három óra után a reakciót 0,2 ml jégecettel befagyasztjuk. Ezt követő kétszeres kromatografálás 2,5 g kovasavon (Woelm) szükséges a fenol gibberellintől való elválasztásához. n-Hexán/kloroform 2:8 tf-arányu elegyével végzett eluálás 8,6 mg (az elméleti 54%-a) amorf [15- H]-gibberellin-A4-7-aldehidet ad: IR (CHCI3): i>max 3610 (OH), 2725, 2820 és 1725 a(aldehid) es 1775 (7-lakton-CO). MS: m/e 316 (M+). Fajlagos radioaktivitás 10 MCi/mmól. 7. példa 314,4 mg (1 mmól) (Va) képletű gibberellin-Aj - -(7)-aldehidet 50 ml terc-butanolban oldunk és 28 órán keresztül kvarccsőben 30-50 °C hőmérsékle-5
