184704. lajstromszámú szabadalom • Eljárás biológiailag aktív enkefalin analógok előállítására

A.

J

1

2

184.704

3. táblázat

Tyr

Gly

Gly

Phe

Termelés

opzi

BOC.Tyr.OH

H-Gly (4) Gly —

— Phe.OMe

OBzl

BOC.Vyr

— Gly

(9) Gly—

— Phe.OMe

76,9%

. OBzl BOciyr BOC.Tyr-------— Gly —Gly

(10) Glv (6) Gly—

Phe.OH

Phe.OH

össztermelés:

86,2% 90 % 34,8%

Rf* Op. (°C) és a Analízis

kristályosítás oldószere

(9) 0,83a

0,34b

0,70a

138,2

C2 4 H4 0 N4 O, :

0,06b

EtAc

számított%: C:64,56, H: 6,33, N:8,86 talált%: C:64,42, H: 6,46, N:8,55

*01 dószer

■ (a) n-butanol, ecetsav, víz (3:1:1)

(b) metiletilketon

A 3. táblázat a (9) és (10) közbenső termékek jellemző adatait tartalmazza, ahol Rf a Merck-szilikagélen és a fent említett oldószerekkel végzett vékonyrétegkromatográfiára vonatkozik.

1-3. példa 40

H—Tyr.Gly.Gly.Phe.X7 .OH

A fenti képletű peptideket úgy állítjuk elő, hogy a BOC.Tyr.Gly.Gly.Phe.OH képletű védett tetrapepiidet (1 és 2 referencia-készítmények) megfelelő ^ karboxil-védett H-X7-OR képletű aminosav-származékkal kondenzáljuk - ahol -OR jelenthet -OMe,

OEt, OBu*, -OBzl, 0Bzl(p-N02) stb. csoportot, attól függően, hogy a védőcsoportok eltávolítására milyen módszert választunk. -OMe és OEt jelentések gg esetén a karboxilcsoportot felszabadíthatjuk lúgos szappanosítással, -OBut esetén enyhe savas acidolízissel és -OBzl vagy -0Bzl(p-N02 ) esetén hidrogeno- 1 ízissei.

Tyr Gly Gly Phe X7

BOC.Tyr—Gly_L Gly—Phe.OH— H.X7 .OR

BOC.Tyr—Gly_2 Gly—Phe-------- X’.OR

H.Tyr ----GlyJ.Gly— Phe --------- X7.OH

A) lépés: A BOC-Tyr.Gly.Gly.Phe.X7 .OR - ahol X7 = Gly, Alá, Val és R=Me képletű vegyület előállítására szolgáló általános módszer,

0,92 mmól BOC.Tyr.Gly.Gly.Phe.OH, 0,92 nunól HCl.H.X7.OMe (például glicin-metilészter-hidroklorid) és 1,84 mmól HOBZ elegyét 5 ml DMF-ben oldjuk és 0,92 mmól NMM-t adunk hozzá. Az elegyet lehűtjük —10 °C-ra és 0,92 mmól DCCI-t adunk hozzá. Az oldatot lassan engedjük felmelegedni szobahőmérsékletre és éjszaka keverjük. A DCU-t leszűrjük, kevés DMF-el mossuk és a szűrletet vákuumban bepároljuk. A maradékot etilacetátban oldjuk és egymás után 5% vizes nátrium-hidrogénkarbonáttal, vízzel, 5% citromsavval és vízzel mossuk. Az oldatot vízmentes magnéziumszulfáttal szárítjuk, bepároljuk és a maradékot egy megfelelő oldószerből átkristályosítjuk.

7