184612. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új szomatosztatin-tipusú ciklopeptidek előállítására
1 184612 2 adunk, és szobahőmérsékleten és normál nyomáson 3 órán át hidrogénezzük, miközben a reakciókeverék pH-értékét 1 n metanolos sósavoldat hozzáadásával 5,5-ön tartjuk. Ezután a katalizátort kiszűrjük, és a szűrletet vákuumban bepároljuk. A nyersterméket további tisztítás nélkül használhatjuk fel a következő művelethez. 1.2 művelet Z-Thr(But)-Phe-OTmse 10,30 g Z-Thr(But)-OH 120 ml vízmentes tetrahidrofuránnal és 4,20 ml N-etil-morfolinnal készített oldatához -15°-on 3 perc alatt hozzáadjuk 4,43 ml klórhangyasav-izobutilészter 20 ml tetrahidrofuránnai készített oldatát. 10 percig — (10-15)°-on tartjuk, majd -15°-on hozzáadjuk 10,05 g H-Phe-OTmse-hidroklorid (1.1 művelet) 40 ml tetrahidrofuránnai készített oldatát, és további 4,20 ml N-etil-morfolint, és a reakciókeveréket 1-1 órán át —15°-on, 0°-on és szobahőmérsékleten tartjuk. Ezután a kivált N-etil-morfolin-hidrokloridot kiszűrjük, a szűrletet vákuumban bepároljuk, a maradékot etilacetátban feloldjuk, és 1 n citromsavval, háromszor, 1 n nátriumhidrogénkarbonáttal háromszor, és vízzel háromszor mossuk. A szerves fázist vízmentes nátriumszulfáton szárítjuk, vákuumban bepároljuk, és nagyvákuumban az oldószer utolsó nyomait eltávolítjuk. A terméket sűrűn folyó sárgás olaj alakjában kapjuk, amely vékonyrétegkromatográfiásan egységes. Vékony ré tegkromatogram : kloroform-metanol (9:1), Rf = 0,83, etilacetát-petroléter (7:3), Rf = 0,77. 1.3 művelet H-Thr(But)-Phe-OTmse 8,84 g Z-Thr(But)-Phe-OTmse (1.2 művelet) 325 ml metanollal készített oldatához 880 mg 10%-os palládiumozott szén katalizátort adunk, és 5 órán át normál nyomáson és szobahőmérsékleten hidrogénezzük. A katalizátort kiszűrjük, és a szűrletet vákuumban bepároljuk. Az olajos maradék vékonyrétegkromatográfiásan egységes, ezt a terméket tisztítás nélkül használjuk az 1.4 művelethez. Vékonyrétegkromatogram: kloroform-metanol (9 :1), Rf - 0,62. 1.3A művelet Z-(D-Trp)-Lys(Boc)-OH 33,84 g Z-(D-Trp)-OH és 17,42 g 8-hidroxi-kinolin 50 ml acetonitrillel készített oldatához 0-5°-on 45 perc alatt 21,87 g DCC1 100 ml acetonitrillel készített oldatát csepegtetjük. A reakciókeveréket 30 percig 5°-on tartjuk, majd a kivált diciklohexilkarbamidot kiszűrjük, és 50 ml acetonitrillel mossuk. A szűrlethez 27,09 g H-Lys(Boc)-OH 25,9 ml 4,25 n káliumhidroxidda! és 80 ml acetonitrillel készített oldatát adjuk, és a reakciókeveréket 15 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. 8 Ezután a reakciókeveréket vákuumban bepároljuk, a maradékot 1 liter etilacetátban felvesszük, 0°-on 200- 200 ml 1 n sósavval háromszor és 200-200 ml vízzel mossuk, a szerves fázist nátriumszulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. Az így kapott barna olajat ] 50 ml kloroformban feloldjuk, és erélyes keverés közben 1,5 liter hexánba csepegtetjük. A pelyhes ragadós csapadékot kiszűrjük, 5ÛÛ ml hexánnal mossuk, és vákuumban szárítjuk. További tisztítás céljából a terméket széntetraklorid-etilacetát (6:4 térfogatrész) keverékének 150 ml-ében feloldjuk, és ugyanezzel az oldószerkeverékkel kovasavgéi oszlopon kromatografáljuk. A vékonyrétegkromatográfiásan egységes megfelelő frakciókat vákuumban bepároljuk, így a tiszta terméket habszerű massza alakjában kapjuk. Vékonyrétegkromatogram: kloroform-met.anol-víz (14:6:1), Rf = 0,61, 1.4 művelet Z-(D-Trp )-Lys (Bo c)-Thr (But j-Phe-OTmse 7,24 g nyers (titrálással 87%-os) H-Thr(But)-Phe- OTmse (1.3 művelet) és 8,45 g Z-(D-trp)-Lys(Boc)-OH (1.3A művelet) 100 ml dimetüformamiddal készített oldatához 5°-on 2,28 g N-hidroxi-benzotriazolt és 3,38 g DCCl-et adunk, és a reakciókeveréket 1 órán át 5°-cn és további 15 órán át szobahőmérsékleten tartjuk. Ezután a kivált diciklohexilkarbamidot szűréssel eltávolítjuk, és a szűrletet nagyvákuumban bepároijuk. A maradékot etilacetát-petroléter keverékéből kétszer átkristályosítjuk, és vákuumban szárítjuk. A termék olvadáspontja 114-120°. Vékonyrétegkromatogram: kloroform-etilaceíát (1:1) Rf = 0,23, toluol-aceton (1:1) Rf = 0,70. 1.5 művelet H-(D-trp j-Lys (Bo ej- ThrfBut )-Phe-OTmse 5,00 g Z-(D-trp)-Lys(Boc)-THr(But)-Phe-OTmse (1.4 művelet) 300 ml metanollal készített oldatához 0,50 g palládiumozott/szén katalizátort (10%-os) adunk, és szobahőmérsékleten és normál nyomáson 5 órán át hidrogénezzük. Ezután a katalizátort kiszüljük, a szűrletet bepároljuk, és a maradékot az 1.6 művelethez tovább visszük. 1.5A művelet Z-A sn -Phe-Phe-OH 2,95 g H-Phe-Phe-OH 30 ml dimetilformamiddal és 6 ml vízzel készített szuszpenziójához 2,36 ml 4 n nátriumhidroxidot, majd 5,29 g Z-Asn-ONP-t adunk, és a reakcióelegyet 20 órán át 35°-on erélyesen keverjük. Ezután a reakcióoldathoz 5°-on 2,36 ml 4 n sósavat adunk, a kissé zavaros oldatot megszűrjük, és a szűrletet nagyvákuumban kb. 15 ml-re bepároljuk. A maradékhoz 150 ml vizet adunk, így a nyerstermék kocsonyás alakban kiválik, ezt kiszűrjük, és vákuumban foszfor-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
