184612. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új szomatosztatin-tipusú ciklopeptidek előállítására
1 184 612 2 Z- [U-Trp (F)]-Lys (Boc)-Thr(But j Phe-OTmse 380 mg Z-[D Trp(F)]-Lys(Boc)-OH, 300 mg H-Thr(But)-Phe-OTmse (1.3 művelet) és 110 mg N-hidroxibenzotriazol 2,5 ml dimetilformamiddal készített oldatához 0°-on 170 ing DCCI-et adunk. 15 óra múlva a reakciókeveréket a 7.1 művelet szerint feldolgozzuk, és a terméket etilacetát-petroléter keverékéből átkristályosítva tisztítjuk. Vékonyrétegkromatogram: 157A rendszer: Rf = 0,76. 11.3 művelet 11.4 művelet Z-Asn-Phe-Phe-[D-Trp(F)]-Lys(Boc)-Thr(But)Phe-OTmse 490 mg Z- [D-Trp(F)]-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe-OTmse metanol-víz (9:1) keverékének 15 ml-ével készített oldatát 50 mg 10%-os palládiumozott/szén katalizátor jelenlétében hidrogénezünk, ez alatt 0,2 n sósavat adagolva a fenti oldószerhez a pH-értékét állandóan 5-ön tartjuk. Ezután a reakciókeveréket szüljük, a szűrletet bepároljuk, és diinetilformamiddal háromszor bepárolva víztelenítjük. A visszamaradó 1,2 g oldathoz 305 mg Z-Asn-Phe-Phe-OH-t, 83 mg N-hidroxi-benzotriazolt, 0,06 ml N-metil-morfolint és 1,2 ml dimetilformamidot adunk. -5°-on 130 mg DCCI-et adunk a keverékhez, és 16 órán át ezen a hőmérsékleten állni hagyjuk. A reakciókeveréket a 7.1 művelet szerint feldolgozzuk, és a terméket acetonitril-víz keverékéből átkristályosítjuk. Vékonyrétegkromatogram: 157A rendszer: Rf = 0,6. 11.5 művelet Z-Asn-Phe-Phe-[D-Trp(F)]-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe-OH 600 mg Z-Asn-Phe-Phe-[D-Trp(F)]-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe-OTmse 4,2 ml dimetilformamiddal készített oldatához 30°-on 3,8 ml 0,34 mólos dimetilszulfoxidos tetraetilammóniumfluorid-oldatot adunk, és a keveréket 30 percig 30°-on állni hagyjuk. Az oldatot jeges hűtés közben 50 ml víz és 0,65 ml 2 n sósav elegyébe csepegtetjük, és a kivált csapadékot kiszűrjük. A terméket acetonitril-víz keverékéből átkristályosítva tisztítjuk. Vékonyrétegkromatogram: 157A rendszer: Rf = 0,35. 11.6 művelet Z-Asn-Phe-Phe- [£>- Trp (F) ]-Lps (Boc)- Thr(But)Phe-Gaba-OBzl 470 mg Z-Asn-Phe-Phe-[D-Trp(F)]-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe-OH, 165 mg H Gaba-OBzl.p-toluolszulfonát (1.7A művelet) és 66 mg N-hidroxi-benzotriazol 2 ml dimetilformamiddal készített oldatához -5°-on 0,05 ml N-metil-morfolint és 100 mg DCCI-et adunk. A reakciókeveréket 16 órán át a fenti hőmérsékleten állni hagyjuk, 16 és a 7.1 művelet szerint feldolgozzuk. A terméket tisztán kapjuk meg, nyomokban diciklohexilkarbamidot tartalmaz. Vékonyrétegkromatogram: 157A rendszer. Rf = 0,55. 11.7 művelet V- Asn-Phe-Phe-[D-Trp(F)]-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe-Gaba\~ 520 mg Z-Asn-Phe-Phe-[D-Trp(F)]-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe-Gaba-OBzl 20 ml dimetilformamiddal készített oldatát 50 mg 10%-os palládiumozott/szén katalizátor jelenlétében 2 órán át hidrogénezzük. Ezután a katalizátort kiszűrjük, a szűrletet nagyvákuumban bepároljuk, és a maradékhoz 350 ml dimetilformamidot, 540 mg N-hidroxi-benzotriazolt és 720 mg DCCI-et adunk. A reakciókeveréket 20 órán át 50°-on tartjuk, majd a 8.2 művelet szerint feldolgozzuk és tisztítjuk (K = 1,1)Vékonyrétegkromatogram : 157A rendszer: Rf = 0,35. 12. példa — Asn-Phe-Phe-[D-Trp(N02)] Lys-Thr-Phe-Gaba — Az 1. példában leírtak szerint az L j Asp-Phe-Phe-[D-Trp(NO, )]-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe-Gaba j védett pepiidet trifluorecetsavval kezeljük és feldolgozzuk. A terméket 220 lépcsőben ellenáramú megoszlásnak alávetve (K=4,5) az előállítani kívánt anyagot vékonyrétegkromatográfiásan egységes amorf termék alakjában kapjuk. Vékonyrétegkromatogram: 101. rendszer: Rf = 0,58, 111B rendszer: Rf = 0,40, 112A rendszer: Rf = 0,45. A [D-Trp(N02)] jelentése 6-nitro-D-triptofán. A kiindulási anyagot a következőképpen állítjuk elő: 12.1 művelet Z-Gaba-OTmse 5,93 g Z-Gaba-OH és 3,84 g trimetilszilil-etanol 10 ml acetonitrillel és 6 ml piridinnel készített oldatát 5°-ra lehűtjük, és keverés közben 5,70 g DCCI-et adunk hozzá. Egy órán át 5°-on, majd további 15 órán át szobahőmérsékleten tartjuk a reakciókeveréket, a kivált diciklohexilkarbamidot kiszűrjük, etilacetáttal mossuk, és a szűrletet bepároljuk. A maradékot 350 g kovasavgél oszlopon kromatografáljuk, eluensként széntetrakloridetilacetát (6:4) arányú keverékét használva. A terméket tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és bepároljuk. Az így kapott színtelen olajat nagyvákuumban szárítjuk. Vékonyrétegkromatogram: kloroform-metanol (85 :15), Rf = 0,69, toluol-aceton (7 :3), Rf = 0,59. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
