184612. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új szomatosztatin-tipusú ciklopeptidek előállítására
1 184 612 2 12.2 művelet H-Gaba-OTmse 4,70 g Z-Gaba-OTmse (12.1 művelet) 50 ml izopropa- 5 nollal készített oldatához 0,5 g palládium/szén (10% os) katalizátort adunk, és az oldaton hidrogént vezetünk át, amíg kiindulási anyag vékonyrétegkromatográflásan (kloroform-metanol 85:15) már nem mutatható ki. A katalizátort kiszűrjük, és a szűrletet vákuumban bepá- 10 roljuk. Az így kapott olajos nyersterméket közvetlenül felhasználjuk a következő művelethez. 12.3 művelet 15 Z-Phe-Gaba-OTmse 4,60 g Z-Phe-OH és 2,83 g H-Gaba-OTmse (12.2 művelet) 15 ml metilénkloriddal készített oldatához 20 0—5°-on hozzáadjuk 3,75 g DCCI 5 ml metilénkloriddal készített oldatát. A reakciókeveréket 15 petcig még 5°-on, majd 2 órán át szobahőmérsékleten tartjuk, ezután a kivált diciklohexilkarbamidot kiszűrjük, és a szűrletet bepároljuk. A maradékot háromszor eíilacetát- 25 ból (12 ml) és petroléterből (60 ml) átkristályosítva tisztítjuk. A termék olvadáspontja 88-93,5° (bomlással). Vékonyrétegkromatogram: kloroform-metanol (85:15), Rf = 0,72, 30 toluol-aceton (7 :3), Rf = 0,72. tett oldatához 0-5°-on 1,25 g DCCI 5 ml metilénkloviddal készített oldatát adjuk. A keveréket 15 percig 0-5° on, majd 15 órán át szobahőmérsékleten tartjuk. A kivált diciklohexilkarbamidot kiszűrjük, a szűrletet vákuumban bepároljuk, és a maradékot etilacetát-petroiéter (20 ml : 100 ml) keverékéből háromszor átcsapjuk. Vékonyrétegkromatogram: kloroform-metanol (85:15), Rf = 0,73, kloroform-metanol-víz (14:6.1), Rf = 0,87. 12.5A művelet Bpoc-Phe- [D-Trp (N02 )}-OH 0,50 g 6-nitro-D-triptofán és 1,10 g Bpoc-Phe-ONSu dimetilformamid-víz (8:2) keverékének 10 ml-ével készített szuszpenzióját 0,1 n nátriumhidroxiddal szobahőfokon úgy kezeljük, hogy a pH-értéke 7,5 marad. 2.5 óra múlva az összes nátriumhidroxid-felhasználás 31.5 ml. A reakciókeveréket 0-5°-ra lehűtjük, és lassan 3.5 ml 1 n sósavat adunk hozzá. A kivált nyersterméket kiszűrjük, szárítjuk, és kovasavgél oszlopon (60-60 g adszorbens) kétszer kromatografáljuk, eluensként kloroform-metanol (85 :15) és széntetraklorid-etilacetát (6 :4) keverékeket használva. Vékonyrétegkromatogram: kloroform-metanol (85 :15), Rf = 0,12, kloroform-metanol-víz (14:6:1), Rf = 0,50. 12.6 művelet 12.4 művelet Z-Thr(But)-Phe-Gaba-OTmse 3,93 g H-Phe-Gaba-OTmse (5,42 g Z-Phe-Gaba- OTmse-ből (12.3 művelet) a 12.2 művelethez hasonlóan hidrogénezéssel előállítva és 5,45 g Z-Thr(But)-ONSu 40 25 ml dimetilformamiddal készített oldatát 15 órán át szobahőmérsékleten tartjuk, az oldathoz 0,34 ml dimetilaminopropilamint adunk, és a keveréket további egy órán át szobahőmérsékleten tartjuk. Ezután a reakciókeveréket nagyvákuumban bepároljuk, a maradékot kb. 45 200 ml etilacetátban feloldjuk, és 30X30 ml 5 %-os vizes borkősav-oldattal háromszor és 30X30 ml vízzel háromszor mossuk. A szerves fázist vízmentes nátriumszuifáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. A maradékot etilacetát (10 ml) — petroléter (80 ml) keverékéből kétszer 50 átkristályosítjuk. A termék olvadáspontja 114—117° (bomlással). Vékonyrétegkromatogram: kloroform-metanol (85:15), Rf = 0,75, széntetraklorid-etilacetát (6:4), Rf = 0,39. 55 12.5 művelet Z-Lys( Boc)-Thr(But j-Phe-Gaba-OTmse 60 2,37 g H-Thr(But)-Phe-Gaba-OTmse (3,00 g Z-Thr(But)-Phe-Gaba-OTmse-ből a 12.2 művelet szerint hidrogénezéssel előállítva), 1,96 g Z-Lys(Boc)-OH és 0,70 g N-hidroxi-benzotriazol 10 ml metilénkloriddal készí- 65 Bpoe-Phe-[D-Trp(N02)]-Lys(Boc)-Thr(But)- 35 Phe-Gaba-OTmse 1,08 g H-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe-Gaba-OTmse (1,30 g Z-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe-Gaba-OTmse-ből (12-5 művelet) a 12.2 művelet szerint hidrogénezéssel előállítva), 0,93 g Bpoc-Phe-[D-Trp(NOí)]-OH (12.5A művelet) és 0,22 g N-hidroxi-benzotriazol 8 ml metilénkloriddal készített oldatához 0-5°-on hozzáadjuk 0,36 g DCCI 2 ml metilénkloriddal készített oldatát. A reakciókeveréket 15 percig 0—5 -on, majd 4 órán át szobahőmérsékleten tartjuk. Ezután a kivált diciklohexilkarbamidot kiszűrjük, a szűrletet vákuumban bepároljuk, és a maradékot 10 ml etilacetát és 70 ml petroléter keverékéből átcsapjuk, majd 10 ml metanollal eldörzsöljük. Vékonyrétegkromatogram: toluol-aceton (7:3), Rf = 0,20, kloroform-metanol-víz (14:6:1), Rf = 0,90. 12.7 művelet HCl■ H-Phe-[D-Tvp(N02)]-Lys(Boc) Thr(But)Phe-Gaba-OTmse 1,27 g Bpoc-Asn-Phe-Phe-[D-Trp(N02)]-Lys(Boc)Thr(But)-Phe-Gaba-OTmse (12.6 művelet) 27 ml triíluoretanol és 3 ml víz keverékével készített oldatát trifluoretanol és tömény sósav (9 :1) keverékének fokozatos hozzáadásával 1,5 látszólagos pH-értéken tartjuk (üvegelektróda, automatikus titrálóberendezés). A reakció befejeződéséig 1,5 óra alatt szobahőmérsékleten 17
