184324. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fermentlé szubsztrátum-koncentrációjának növelésére szteránvázas vegyületek mikrobiológiai átalakításánál
184 324 0,2 % élesztőkivonat (szárazanyag) 6,0 % glicerin pH = 7,5 sterilezés előtt. 121 °C-on 25 percig sterilezzük. S jelű táptalaj: 0,4 % aszparagin 0,05 % dikálium-hidrogén-foszfát 0,05 % magnézium-szulfát 0,005 % vas(Ill)-ammónium-citrát 0,2 % citromsav 6,0 % glicerin pH = 7,5 sterilezés előtt. 121 °C-on 25 percig sterilezzük. ÊGC9 jelű táptalaj: 0,5 % élesztőkivonat (szárazanyag) 0,05 % magnézium-szulfát 0,05 % dikálium-hidrogén-foszfát 0,005 % vas(Hl)-ammónium-citrát 0,2 % citroinsav 2,0 % glicerin pH = 7,5 sterilezés előtt. A lombikokat 121 °C-on 25 percig sterilezzük. Amennyiben a fenti táptalajokat fermentációhoz használjuk, 10% tenzid oldatot is tartalmaznak. Tenzid oldat: 10,0 % antihabzin A/3 (gyártja: ('MINŐIN. Budapest) 2,6 % Twcen-80* A desztillált vízzel készült emulziót 121 °C-on 60 percig sterilezzük. Használat előtt jól felrázzuk. Azon táptalajok összetételét, melyek csak egy-két kiviteli példában szerepelnek, a konkrét példában adjuk meg. 0,05 % glükóz 1,5 % pepton 5 0,6% kukoricalekvár (szárazanyag) pH = 6,9-re állítva sterilezés előtt. Sterilezés 121 °C-on 25 percig. A lombikokat ugyancsak 28 °C-on rázatjuk egy napig. 10 Ezután steril vízzel kétszeresére hígítjuk és 100-100 ml tenyészethez 2-2 mg (3-naftolt 1-1 ml acetonban oldva, ezenkívül az 1-es lombikhoz 0,5 g progeszteront, a 2-es lombikhoz pedig 5 g O, jelzésű anyagot adagolunk. A lombikokat tovább rázatjuk 28 °C-on három napig. 15 A diklóreíános extraktumokból preparatív vékonyrétegkromatogiáfiás szétválasztás után (futtató rendszer: etilacetát - n.heptán 6:4 elegye) az 1-es lombik esetén 140 mg, a 2-es lombik esetén 333 ingandroszt-l,4-dién-3,17-diont nyertünk. 2} Oi jelzésű anyag előállítása 0,5 kg progeszteront 7,5 liter kloroformban oldunk, majd a kloroformos oldatot LÖD1GE FM-50 típusú keverő-granuláló készülékben (gyártja: LÖDIGE Maschinenbau-Ges. m.b.H. Paderborn, Német Szövetségi Köz- J társaság) 4,5 kg Aerosil-200 jelzésű kolloid szilícium-dioxid (gyártja: Degussa AG, Frankfurt, Német Szövetségi Köztársaság) felületén - keverés közben - egyenletesen eloszlatjuk. A kloroformos oldat felvitele után az anyagot 1-2 percig keverjük, majd 35-40 °C-on az oldószer elpárologtatásáig szárítjuk. F jetii táptalaj : 2. példa 35 Mindenben az 1. példa szerint járunk el, de a csőszuszpenziói Fusarium solani (MNG 91) tenyészetről készítjük. A diklóretános extraktumokból az 1-es lombik eseten 152 mg, a 2-es lombik esetén 360 mg androszt- 40 -1,4-dién-3,17-diont nyertünk. /, példa Fusarium caucasium (MNG 90) csőszuszpenzióval oltott Richard táptalajon 28 °C-on nőtt, rázott inoku- ^ lum tenyészettel oltunk F jelű táptalajt tartalmazó fermentációs rázott lombikokat. ♦(l’olioxi-ctitén szorbitol-inonooleát) Richard táptalaj: 55 5 % glükóz 0,05 % káiium-dihidrogén-foszfát 0,25 % magnézium-szulfát 0,1 % kálium-nitrát 1,0 % ammónium-nitrát 50 pH = 5,0 sterilezés előtt. A táptalajt 121 °C-on 25 percig sterilezzük. 65 3. példa Arthrobacter simplex (MNG 66) csőszuszpenzióval oltott CS jelű táptalajon 37 °C-on nőtt, rázott inokulum tenyészettel oltunk KAu jelű táptalajt tartalmazó fermentációs rázott lombikot. CS jelű táptalaj: 0.44 % káiium-dihidrogén-foszfát 0.88 % dinátrium-hidrogén-foszfát 1,0 % élesztőkivonat (szárazanyag) pH = 7,0 sterilezés előtt. 121 °C-on 25 percig sterilezzük. KAn jelű táptalaj: 0,2% kukoricalekvár (szárazanyag) 0.1 % aszparagin 0,02 % élesztőkivonat (szárazanyag) 0,5 % glükóz 4
