184041. lajstromszámú szabadalom • Eljárás glükopiranozil-peptidek előállítására
184 041 b) D-glutamin-metilészterének sósavas sója (D-Gln-OMe). /(B) jelzésű vegyület) 1,4 g (5,4 mmól) (A) jelzésű vegyületet 15 ml jégecettel készült normál sósav oldattal kezelünk. Az elegyet 30 percig szobahőmérsékleten tartjuk, majd betöményítjük; az így kapott olajat vákuumban kálium-hidroxid jelenlétében beszárítjuk. c) Terc-butiloxikarbonil-L-alanil-D-glutamin-metilésztere /BOC-L-Ala-D-Gln-OMe/(B jelzésű vegyület) 1,86 g (6,5 mmól) terc-butüoxikarbonil-alanin-szuccinimid-észtert, (BOC-Ala-OSu), amit Anderson és társai szerint állítunk elő (J. Am. Chem. Soc.: 86. 1839—1842 /1964/) 1,2 g (5,4 mmól) (B) jelzésű vegyületnek és 0,6 ml (5,4 mmól) N-metil-morfolinnak 25 ml dimetilformamiddal készült oldatához adjuk. Az elegyet egy éjszakán át szobahőmérsékleten tartjuk, majd a reakcióelegyet beszárítjuk és szilikagél oszlopon (27 X 3 cm) kromatografáljuk. A rendszert kloroform-izopropanol-ecetsav 100:0,5: 0,2 arányú elegyével előzetesen kiegyensúlyozzuk, majd kloroform-izopropanol-ecetsav 100:5:2 elegyével eluáljuk. A kapott frakciókat egyesítjük és beszárítjuk. Az izopropanol-izopropiléter elegyet átkristályosítva 1,035 g (C) jelzésű vegyületet kapunk. Olvadáspont: 115-116 C°, forgatóképessége [o<]p5 = -9° (metanolban). E vegyület analízisének eredménye C14H2SN306 képletre: (Ms: 331,37) C H N Számított: 50,74% 7,60% 12,68% Talált: 50,79% 7,40% 12,42% 17 d) L-alanil-D-glutamin-metilészterének sósavas sója (L-Ala-D-GLn-OMe), (D) jelzésű vegyület 332 mg (1 mmól) (C) jelzésű vegyületet 3 ml jégecettel készült n-sósav oldattal kezelünk. Az elegyet 30 percig szobahőmérsékleten tartjuk, majd a reakcióelegyet betöményítjük; az így kapott olajat vákuumban káliumhidroxid jelenlétében beszárítjuk. ej A (D)-es jelzésű peptid-származékot egy (E) jelzésű (l- tx.-Bzl-4,6-Bzi)-Mur-NAc-L-Ala-D-Gln-OMe vegyülettel, ahol a muramil-részen védőcsoport található, kapcsoljuk össze. 471,5 mg (1 mmól) (l-K-Bzl-4,6-Bzi)-Mur-NAc-t, amit Osawa és Jeanloz (J. Org. Chem.: 30. 488 /1965/) szerint állítunk elő, 5 ml dimetil-formamidban oldunk. A dimetilformamid 0,11 ml (1 mmól) N-mctilmorfolint tartalmaz. Ezt az oldatot -15 C°-ra lehűtjük, és ehhez 0,13 ml (1 mmól) klórhangyasav-izobutil-észtert adunk. 3-5 perc eltelte után az oldatot -15 C°-ra lehűtjük, és ehhez 268 mg (1 mmól) (D) jelzésű vegyületet, továbbá 0,11 ml (1 mmól) N-metilmorfolinnak 5 ml dimetilformamiddal készült ol- 10 datât adjuk. Ezt követően egy éjszakán át az oldatot -15 C°-on tartjuk, majd 1 ml (2,5 mmól) káliumkarbonát-oldatot adunk hozzá. 30 perc eltelte után 0°C-on az elegyhez vizet adunk, ilymódon csapadék válik le, amit szűrünk, káliumhidrogénkarbonát-oldattal mossuk, majd vákuumban foszforpentoxid jelenlétében beszárítjuk. 620 mg (90,5 %) (E) jelzésű terméket kapunk. A kapott termék olvadáspontja 215-220 C°, forgatóképessége [Oíjp5 = = + 92,6 (dimetilformamidban). 18 f) N-acetil-muramil-L-alanilD-glutamin-metil-észtere (Mur-NAc-L-AJa-D-Gln-OMe), (F)-os jelzésű vegyület 587,6 mg (9,86 mmól) (E) jelzésű vegyületet 35 ml jégecetben oldunk fel, majd 450 mg 5 %-os palladium tartalmú aktív szén jelenlétében 60 óra hosszat hidrogénezzük. A katalizátort leszűrjük, ezt követően az ecetsavat vákuumban elűzzük. A kapott terméket 0,1 mól ecetsavoldatban felvesszük, majd 10 X 1 cm-es méretű ioncserélő gyantaoszlopra visszük. (Amberlite AG 50 W-X 2). Az oszlopot fenti ecetsav oldattal eluáljuk. Az eluátumot fagyasztva szárítjuk, majd a kapott terméket Amberlite AG, L X-2 gyantán kromatografáljuk. Ilyen módon 290 mg fagyasztással szárított termékhez jutunk. Az így kapott terméket egy szilikagél oszlopon engedjük át; az oszlopot a művelet előtt n-butanol-ecetsav-víz 65:10:25 arányú elegyével kezeljük. Ugyanez az elegy használható a termék eluálásához. A tiszta terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, vízzel extraháljuk, majd a vizes fázist fagyasztásos szárításnak vetjük alá. 234,4 mg terméket kapunk. Olvadáspont: 108-112 C°, forgatóképessége [o<]p5= + 34,3 (jégecetben). E vegyület analízisének eredménye CJ0H,4N4On-1,25 H20 képletre (Ms: 529,02): C H N Számított: 45,40% 6,95% 10,59% Talált: 45,46% 6,76% 10,56% 2. N-acetil-muramil-L-alanil-D-glutamin-n-butil-ész terének előállítása a) Z-Ala-D-Gln, (A) jelzésű vegyület 2,4 g (16,4 mmól) D-glutamint 35 ml forró vízben szolubilizálunk. Ezt követően szobahőmérsékleten 2,3 ml (16,4 mmól) trietilaminnak és 4,62 g (14,4 mmól) Z-L-Ala-OSu-nak 70 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készült oldatához adjuk. A reakciót 4 C° hőmérsékleten 48 óra hosszat végezzük, majd 0,5 ml (3,85 mmól) dimetilamino-propilamint adunk az elegyhez. A reakcióelegyet 1 óra hosszat szobahőmérsékleten tartjuk, majd 65 ml vízzel meghigítjuk és 2,2-3 pH értékre állítjuk be. A műveletet 0 C° hőmérsékleten 4 n-sósawal végezzük. Ezt követően a tetrahidrofuránt vákuumban eltávolítjuk, A termék csapadék formájában válik le, amit egy éjszakán át 4 C° hőmérsékleten tárolunk, ezután leszűrjük és 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
