183567. lajstromszámú szabadalom • Eljárás (E)-5-(2-brómvinil)-uridin és származékai előállítására
1 183 567 2 A találmány tárgya eljárás az új, VI általános képletű — ahol R1 jelentése hidrogénatom, 1—8 szénatomos alkanoil —, benzoil- vagy para helyzetben 1—4 szénatomos alkilcsoporttal vagy halogénatommal helyettesített benzoilcsoport-(E)-5-(2-brómvinil)-uridin és származékai előállítására. Ismeretes az irodalomból, hogy az 5-szubsztituált uracilbázis 2'-dezoxi-nukleozidjai mind in vitro, mind in vivo jelentős antivirális hatással rendelkeznek [Meth. and Find. Exptl. Clin. Pharmacol. 2, 253(1980)]. Az ismert nukleozidok közül különösen az (E)-5-(2-brómvínil)-uracil-2 ' -dezoxinukleozidjai figyelemre méltó antiherpetikus (Herpes simplex vírusfajtákkal szembeni (hatékonyságukkal tűnnek ki (Proc. Natl. Acad. Sei USA vol. 76, 6 . 2947 (1979)]. Ismeretes,az irodalomból az a megfigyelés is, hogy az 5-ös . helyzetben rövid alkillánccal helyettesített nukleozidok közül csak a dezoxiribonukleozidoknak van jelentős antherpetikus hatása, míg a megfelelő ribonukleozidok csaknem hatástalanok [Chem. Pharm. Bull. 18, 261 (197Q)]. Meglepő módon azt találtuk, hogy ha az (E)-5-(2- -bróm-vinil)-uracil bázis 2'-dezoxiribonukleozidja helyett a ribonukleozidját készítjük el hasonlóan erős antiherpetikus hatású, de kevésbé toxikus vegyülethez jutunk. Továbbá azt találtuk, hogy ezen új nukleozid és származékai előnyösen előállíthatók az 5-etil-uracilból (I) jó hozamú szintézis-lépésekkel kialakítható IV általános képletű — ahol R jelentése a hidrogénatom kivételével R' jelentésével azonos — 2', 3', 5'-tri-0- -acii-5-etil-uridin brómozása, a kapott V általános képletű dibrómszármazék dehidro-halogénezése, majd kívánt esetben dezacilezése útján. (A IV általános képletű kiindulási vegyületek előállítását, valamint a találmány szerinti VI általános képletű vegyületekké való átalakítását a mellékelt reakcióséma szemlélteti.) A fentiek alapján a találmány tárgya eljárás az új, VI általános képletű — ahol R1 hidrogénatomot, 1—8 szénatomos alkanoil-, benzoil- vagy para helyzetben 1—4 szénatomos alkilcsoporttal vagy halogénatommal helyettesített benzoilcsoportot jelent — (E)-5-(2- -brómvinil)-uridin és származékai előállítására, amely abban áll, hogy valamely IV általános képletű — ahol R jelentése 1—8 szénatomos alkanoil —, benzoil — vagy para helyzetben 1—4 szénatomos alkilcsoporttal vagy halogénatommal helyettesített benzoilcsoport — 2', 3', 5'-tri-0-aciI-5-etiI-uridint elemi brómmal reagáltatunk, majd a kapott V általános képletű dibróm-származékot — ahol R jelentése a fenti — dehidrohalogénezzük, majd kívánt esetben dezacilezzük. A találmány értelmében célszerűen úgy járunk el, hogy 1 mól IV általános képletű 2 ', 3 ', 5 ' -tri-0-acil-5- -etil-uridint UV fény jelenlétében valamely halogénezett szerves oldószerben előnyösen diklórmetánban, diklóretánban vagy széntetrakloridban 2,5 mól brómmat reagáltatjuk, majd a kapott V általános képletű dibrómszármazékot elkülönítés nélkül vagy adott esetben elkülönítve, valamely halogénezett szerves oldószerben vagy etilacetátban egy feleslegben alkalmazott tercier bázis, előnyösen tríetilamin jelenlétében dehidrohalogénezzük majd kívánt esetben valamely rövidszénláncú alkanolban egy rövidszénláncú alkálifém-alkoholáttal dezacilezzük. A IV általános képletű 2', 3', 5'-tri-0-acil-5-etil-uridinek brómozása során oldószerként előnyösen alkalmazhatunk aromás szénhidrogéneket például benzolt vagy toluolt is. Az V általános képletű dibróm-vegyületek dehidrohalogénezését R1 helyén 1—8 szénatomos alkanoil-, benzoil- vagy para helyzetben 1—4 szénatomos alkilcsoporttal helyettesített benzoilcsoportot tartalmazó VI általános képletű vegyületekké előnyösen végezhetjük tercier-butilaminnal vagy etil-di-izopropilaminnal is. Azon VI általános képletű vegyületek előállítása során, ahol R1 jelentése hidrogénatom, a találmány értelmében előnyösen úgy is eljárhatunk, hogy a dehidrohalogénezést követően alkoholos-káliumhidroxid oldattal vagy ammóniával telített rövidszénláncú alkanollal végezzük a dezacilezést. A találmány szerint VI általános képletű vegyületek antivirális hatékonyságát az (E)-5-(2-brómvinil)-uridin példáján mutatjuk be. Az antivirális hatás vizsgálatát az alábbi megfontolások alapján végeztük: Az irodalomból ismert, antivirális hatású nukleozid analógusok túlnyomó része valószínűleg úgy fejti ki „antivirális hatását”, hogy lényegében a gazdasejt működését gátolja és ezáltal nem teszi lehetővé a vírusok szaporodását a sejtekben. (Ismert ugyanis, hogy a vírusok szaporodásához a gazdasejt és annak zavartalan működése szükséges.) Az antivirális hatékonyság tanulmányozása céljából mindenek előtt egy olyan módszert dolgoztunk ki, amely alkalmas különböző vegyületek oldatainak melegvérű állatok és ember sejtjeire, szöveteire in vitro kifejtett hatásának igen pontos, emellett érzékeny és objektív meghatározása [Toxicology, 16, 59(1980)]. Ez a módszer alkalmas lett egyben arra is, hogy kiszámítsuk a vizsgált vegyületnek (mért adatokból) azt a töménységét a szövetek tenyésztésére használt folyadékban, amely mérhető vagy észrevehetően káros hatást már nem fejt ki a szövetekre (CT0). Annak a vegyületnek a hatásossága tekinthető vírus-specifikusnak, tehát terápiás célra különösen alkalmasnak, amely CT0, vagy még ennél kisebb töménységben is meggátolja a szövetekben a vírusok szaporodását, ezért várhatóan akut toxieitása melegvérű állatokban és emberben nem nagy. (Az alacsony toxieitás különösen előnyös olyan vegyületek esetén, amelyeket vírus-betegségekben kívánunk gyógyszerként alkalmazni.) Jellemző, hogy az irodalomban közölt és antivirális hatásúaknak leírt vegyületek fenti értelemben vett toxieitására (CT0) vagy nem közöltek adatokat, vagy a CTo-nál nagyobb töménységű oldatokat vizsgáltak és ezeket találták „antivirális” hatásúnak. Megvizsgálván az (E)-5-(2-brómvinil)-2-dezoxiuridinnel [Tetrahedron Letters No. 45, 4415—4418 (1979)] azt találtuk, hogy mindkét vegyület igen kifejezett antivirális hatást mutat in vitro olyan alacsony töménységben is (CT0), amely a tenyésztésre használt sejtekre és szövetekre káros hatást már nem fejtett ki, de meglepő módon az (E)-5-(2-brómvinil)-uridin toxieitása jelentősen kisebb volt, mint a dezoxi-származékoké. A vegyületek antivirális hatékonyságát az 1. táblázatban közölt kísérleti eredmények igazolják. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 2
